أزرق البروموفينول صبغة صناعية تُستخدم على نطاق واسع في المختبرات للكشف عن الأحماض النووية والبروتينات. يتميز بلونه الأزرق، وهو قابل للذوبان في الماء والكحول. يتضمن تحضيره تفاعل 2,4-ثنائي بروموفينيل هيدرازيد مع حمض الكبريتيك المركز.
بالإضافة إلى استخدامه في المختبرات، يُستخدم أزرق البروموفينول أيضًا في صناعة الأغذية كمؤشر لدرجة الحموضة (pH) في المحاليل الحمضية والقلوية. مع ذلك، تجدر الإشارة إلى أن هذه الصبغة سامة، ويجب التعامل معها بحذر، وتجنب ملامستها المباشرة للجلد والأغشية المخاطية.
لذلك، من الضروري اتباع قواعد السلامة عند استخدام صبغة بروموفينول الزرقاء والتخلص من النفايات الملوثة بها بشكل صحيح. قد تُسبب سميتها تهيجًا للجلد والعينين والجهاز التنفسي، لذا تُعد معدات الوقاية الشخصية المناسبة ضرورية عند التعامل معها.
دليل خطوة بخطوة لتحضير محلول البروموفينول الأزرق بطريقة بسيطة.
أزرق البروموفينول هو مؤشر حمضي-قاعدي يُستخدم على نطاق واسع في المختبرات. وهو مركب كيميائي عضوي يتغير لونه تبعًا لدرجة حموضة المحلول الذي يوجد فيه. في هذه المقالة، سنناقش خصائص أزرق البروموفينول، وكيفية تحضيره، واستخداماته، وسميته.
خصائص البروموفينول الأزرق:
أزرق البروموفينول صبغة يتراوح لونها بين الأصفر والأزرق، حسب درجة حموضة الوسط الذي توجد فيه. وهي قابلة للذوبان في الماء، وتُستخدم عادةً في المختبرات لتحديد درجة حموضة المحاليل.
تحضير محلول بروموفينول الأزرق:
لتحضير محلول البروموفينول الأزرق، اتبع الخطوات التالية:
1. وزن 0,1 جرام من الأزرق البروموفينول في قارورة حجمية.
2. أضف الماء المقطر حتى يصل البالون إلى 100 مل.
3. رج المحلول جيدًا للتأكد من التجانس.
استخدامات البروموفينول الأزرق:
يُستخدم أزرق البروموفينول على نطاق واسع في المختبرات كمؤشر لدرجة الحموضة (pH) في المحاليل المائية. ويمكن استخدامه لتحديد ما إذا كان المحلول حامضيًا أو قاعديًا أو متعادلًا، وذلك بناءً على لونه.
سمية البروموفينول الأزرق:
لا يُعتبر أزرق البروموفينول شديد السمية، ولكن من المهم التعامل معه بحذر واتباع جميع احتياطات السلامة عند استخدامه في المختبرات. في حال ملامسته للجلد أو العينين، اشطفهما فورًا بكمية وفيرة من الماء.
باختصار، يُعدّ أزرق البروموفينول مؤشرًا حمضيًا-قاعديًا متعدد الاستخدامات، سهل التحضير، ويُستخدم على نطاق واسع في المختبرات. من المهم معرفة خصائصه، وطريقة تحضيره، واستخداماته، واحتياطات السلامة عند التعامل مع هذا المركب الكيميائي.
بروموفينول الأزرق: الخصائص، التحضير، الاستخدامات، السمية
O بروموفينول الأزرق إنه مادة كيميائية عضوية بطبيعتها، ونظرًا لضعف التزامه بقيم pH معينة، يُستخدم لقياس المواد الكيميائية. بمعنى آخر، يُفيد كمؤشر pH.
يُصنف أيضًا كصبغة ثلاثي فينيل ميثان. تُستخدم مركبات ثلاثي فينيل ميثان ومشتقاتها عادةً كصبغات في صناعات الأغذية والأدوية والمنسوجات والطباعة، وغيرها.
يكون مؤشر الرقم الهيدروجيني هذا أصفر عند قيمة pH ≤ 3، وأرجوانيًا مائلًا للبنفسجي عند قيمة pH ≥ 4,6. لذلك، يتراوح نطاق الانتقال البصري بين 3 و4,6.
تُعرف هذه المادة أيضًا باسم التترابروميفينول الأزرق، لكن اسمها العلمي هو 3,3,5,5-تترابروميفينول سلفونافثالين؛ وصيغتها الكيميائية C 19 H 10 Br 4 O 5 S.
يتميز مؤشر الرقم الهيدروجيني الأزرق بروموفينول بانخفاض سميته على الجلد والأغشية المخاطية، كما ثبت أنه غير مُسبِّب للطفرات. ويُستخدم حاليًا في تقنيات فصل البروتينات باستخدام الرحلان الكهربائي للهلام البولي أكريلاميدي والرحلان الكهربائي ثنائي الأبعاد.
يُوصف بأنه صبغة جيدة للاستخدام بإختبارin vivo في الجراحات العلاجية، تُستخدم لاستخراج الجسم الزجاجي والبنى البلورية الأخرى من العين البشرية. تُسهّل هذه التقنية تصوير هذه البنى أثناء الجراحة، مما يضمن استخراجها بشكل صحيح.
ملامح
أزرق البروموفينول مسحوق بلوري ذو لون برتقالي بني أو بنفسجي محمر. درجة غليانه ٢٧٩ درجة مئوية، ووزنه الجزيئي ٦٦٩.٩٦ مول/لتر. تتراوح درجة انصهاره بين ٢٧٠ و٢٧٣ درجة مئوية.
تحضير
عادةً ما يتم استخدام مؤشر الرقم الهيدروجيني هذا بتركيز 0,1%، باستخدام 20% من الكحول الإيثيلي كمذيب، لأنه قابل للذوبان قليلاً في الماء.
ومع ذلك، هناك مواد أخرى تعمل كمذيبات، مثل حمض الأسيتيك، وكحول الميثيل، والبنزين، وبعض المحاليل القلوية.
أما بالنسبة لتقنية الرحلان الكهربائي فيتم استخدامه بتركيز (0,001%).
استعمل
مؤشر الرقم الهيدروجيني
وهو أحد مؤشرات الرقم الهيدروجيني الأكثر استخدامًا في المختبرات الكيميائية لمعايرة الأحماض والقواعد.
التلوين بتقنية الرحلان الكهربائي
يُستخدم أزرق البروموثيمول كصبغة بتركيز 0,001% في فصل البروتينات باستخدام تقنية الرحلان الكهربائي للهلام البولي أكريلاميدي (SDS-PAGE). تُفيد هذه الطريقة في التحكم في تراكم مختلف المواد الخام البروتينية في بعض الأطعمة المصنعة، مثل النقانق.
ويستخدم أيضًا 0,05% من البروموفينول الأزرق في تقنية الرحلان الكهربائي ثنائي الأبعاد.
هذه الفائدة ممكنة لأن صبغة البروموفينول الزرقاء مشحونة وتتحرك بسهولة في الجل، تاركةً لونًا أزرق بنفسجيًا واضحًا. علاوة على ذلك، تنتقل هذه الصبغة أسرع بكثير من البروتينات وجزيئات الحمض النووي.
لذلك، يعتبر اللون الأزرق البروموفينول ممتازًا لتمييز الواجهة الأمامية الرائدة، مما يسمح بإيقاف عملية الرحلان الكهربائي في الوقت المناسب، دون خطر خروج الجزيئات التي واجهتها أثناء العملية من الجل.
تسمم
سمية الاتصال المباشر
بهذا المعنى، تُصنّف الرابطة الوطنية للحماية من الحرائق (NFPA) هذه المادة على أنها ذات خطر صحي (1)، وقابلية اشتعال (0)، وتفاعلية (0). هذا يعني أنها تُشكّل خطرًا صحيًا منخفضًا، وفي الواقع، لا يوجد أي خطر في هذين العاملين الأخيرين.
إنه مُهيّج خفيف للجلد. في حالة التلامس المباشر، انزع الملابس الملوثة فورًا واغسلها بكمية وفيرة من الماء. في حالة ملامسة الأغشية المخاطية، اشطفها فورًا. إذا كان الشخص المصاب يرتدي عدسات لاصقة، فانزعها فورًا واستشر طبيبًا.
في حالة الاستنشاق، يجب إجراء الإسعافات الأولية، مثل التنفس الاصطناعي والعناية الطبية الفورية.
في حالة الابتلاع العرضي، يجب تحفيز التقيؤ وإعطاء المصاب ٢٠٠ مل من الماء. بعد ذلك، يجب نقل المصاب إلى أقرب مركز طبي.
دراسة السمية الجينية
تم إجراء دراسات السمية الجينية للأزرق البروموفينول من خلال منهجيات مختلفة، مثل تقنية Ames Salmonella/microsome، واختبار سرطان الغدد الليمفاوية L5178Y TK+/- في الفأر، واختبار النواة الصغيرة في الفأر، واختبار إعادة التركيب الانقسامي باستخدام سلالة الخميرة. خميرة الخباز د5 .
كشفت الدراسات أن أزرق البروموفينول ليس له أي تأثير سام للجينات. بمعنى آخر، أثبتت الاختبارات عدم وجود طفرة جينية، أو انحرافات كروموسومية، أو تلف أولي في الحمض النووي.
كانت دراسات السمية الجينية ضرورية لأن المركبات المتشابهة هيكليًا أظهرت تأثيرات مُطفرة. ومع ذلك، من المعروف الآن أن هذه التأثيرات ناتجة عن وجود شوائب مُطفرة، وليس عن المركب نفسه.
دراسة السمية النسيجية
من ناحية أخرى، أجرى هاريتوجلو وآخرون تحقيقًا قاموا فيه بتقييم تأثير الأصباغ الحيوية الجديدة بإختبارin vivo قصير المدى لجراحة العين. من بين الصبغات المختبرة، كان أزرق البروموفينول. أُذيبت الصبغة في محلول ملحي متوازن.
أجرى الباحثون عملية استئصال الزجاجية (استخراج الجسم الزجاجي للعين) على 10 عيون خنازير بإختبارin vivo ثم حقنوا الصبغة في التجويف وتركوها لمدة دقيقة، ثم غسلوها بمحلول ملحي. كما صبغوا كبسولة عدسة العين نفسها. ثم دُرست العينان باستخدام المجهر الضوئي والإلكتروني.
من بين جميع الصبغات التي تم تقييمها، أظهر اللون الأزرق البروموفينول أفضل استجابة، حيث تم تلوينه بنسبة 2% و1% و0,2% وفي نفس الوقت دون التسبب في تغييرات نسيجية تظهر السمية.
لذلك، فهو يعتبر المرشح الأفضل للاستخدام في البشر أثناء جراحات الشبكية والزجاجية، مما يسهل تصور الجسم الزجاجي والأغشية فوق الشبكية والغشاء المحدد الداخلي.
المراجع
- «الأزرق البروموفينول» ويكيبيديا، الموسوعة الحرة . 9 مايو 2019، الساعة 09:12 بالتوقيت العالمي. 24 مايو 2019، 20:57. ويكيبيديا.
- لوبيز ل، جريكو ب، رونين ب، فالنسيا إي. آلان [الإنترنت]. سبتمبر ٢٠٠٦ [تم الاستشهاد به في ٢٤ مايو ٢٠١٩]؛ ٥٦ (٣): ٢٨٢-٢٨٧. متوفر على: scielo.org.
- إيشيفيري إن، أورتيز، بلانكا إل، وكامينوس جي. (2010). التحليل البروتيني لثقافات الغدة الدرقية الأولية.المجلة الكولومبية للكيمياء , 39 (3)، 343-358. تم الاسترجاع في 24 مايو 2019، من scielo.org.
- لين جي إتش، دي جي بروسيك. دراسات الطفرات على صبغتين من ثلاثي فينيل الميثان، أزرق بروموفينول وأزرق رباعي بروموفينول. مجلة السموم التطبيقية. أغسطس ١٩٩٢؛ ١٢(٤): ٢٦٧-٧٤.
- هاريتوغلو س، تادايوني ر، ماي س أ، جاس س أ، فراير و، بريجلينجر س ج، كامبيك أ. تقييم قصير المدى داخل الجسم الحي للأصباغ الحيوية الجديدة لجراحة العين. شبكية العين، يوليو-أغسطس ٢٠٠٦؛ ٢٦(٦): ٦٧٣-٨.