صبغة جيمسا هي تقنية تُستخدم في علم الأحياء الدقيقة وعلم الوراثة الخلوية لصبغ الخلايا والأنسجة، مما يسمح بتصوير هياكل محددة. طورها غوستاف جيمسا عام ١٩٠٤، وهي من أكثر التقنيات استخدامًا في مختبرات التشخيص لتحديد الكائنات الدقيقة والطفيليات والكروموسومات.
تتطلب صبغة جيمسا مواد مثل صبغة جيمسا والميثانول والماء المقطر. تتضمن هذه التقنية تثبيت الخلايا على شرائح زجاجية، ثم وضع صبغة جيمسا المخففة بالميثانول. بعد التلوين، تُغسل الخلايا بالماء المقطر وتُفحص تحت المجهر.
تشمل الاستخدامات الرئيسية لصبغة جيمسا تحديد مسببات الأمراض مثل البلازموديوم (المسبب للملاريا)، والتريبانوزوما (المسببة لمرض شاغاس)، والبكتيريا مثل الكلاميديا والريكتسيا. علاوة على ذلك، تُستخدم صبغة جيمسا على نطاق واسع في تحليل الكروموسومات لتشخيص الأمراض الوراثية وتحديد التشوهات الكروموسومية.
دليل خطوة بخطوة لأداء صبغة جيمسا بشكل فعال.
صبغة جيمسا تقنية أساسية في التحليلات السريرية ومختبرات البحث العلمي. تتيح هذه التقنية تصوير مختلف التراكيب الخلوية، مثل الكروموسومات والطفيليات والبكتيريا، من خلال صبغ مكوناتها بدقة. في هذه المقالة، سنشرح خطوة بخطوة كيفية إجراء صبغة جيمسا بفعالية.
الخطوة الرابعة: حضّر محلول جيمسا، الذي يُمكن شراؤه جاهزًا أو مُحضّرًا من مسحوق. يُخفّف المحلول في الماء المقطر بالكمية المُوصى بها من قِبَل المُصنّع.
الخطوة الرابعة: ثبّت العينة على شريحة زجاجية باستخدام الحرارة أو مواد تثبيت، مثل الكحول الإيثيلي. تأكد من تثبيت العينة بإحكام لتجنب تشوهها أثناء التلوين.
الخطوة الرابعة: غطّ العينة الثابتة بمحلول جيمسا، مع التأكد من تغطية كامل السطح بالتساوي. اترك الشريحة ملامسة للمحلول لفترة زمنية محددة، عادةً ما بين ١٠ و٣٠ دقيقة.
الخطوة الرابعة: اشطف الشريحة بالماء الجاري لإزالة البقع الزائدة. جفف الشريحة برفق باستخدام ورق ماص أو هواء مضغوط.
الخطوة الرابعة: راقب العينة المصبوغة تحت المجهر الضوئي باستخدام عدسة مكبرة مناسبة. يسمح تلوين جيمسا بتصوير الهياكل الخلوية بوضوح وتباين أكبر.
يُستخدم صبغة جيمسا على نطاق واسع في مختلف مجالات علم الأحياء والطب، مثل تشخيص الأمراض الطفيلية، وتحليل خلايا الدم، وتحديد العوامل المُعدية. باتباع الخطوات المذكورة أعلاه بشكل صحيح، يمكن الحصول على نتائج صبغة جيمسا دقيقة وموثوقة.
تعرف على عملية تلطيخ جيمسا وكيفية عملها بالتفصيل.
صبغة جيمسا هي طريقة تُستخدم على نطاق واسع في مختبرات علم الأحياء الدقيقة وأمراض الدم لتصوير البنى الخلوية والكشف عن مسببات الأمراض. طورها غوستاف جيمسا عام ١٩٠٢، وتعتمد على تقارب الأصباغ القاعدية والحمضية لمختلف المكونات الخلوية.
تشمل المواد اللازمة لصبغة جيمسا صبغة جيمسا، ومحاليل التثبيت وإزالة الصبغة، والشرائح، والأغطية الزجاجية، والمجهر. صبغة جيمسا هي مزيج من أزرق الميثيلين والإيوزين والجلسرين، وتُستخدم لصبغ البنى النووية والسيتوبلازمية للخلايا.
تتضمن تقنية صبغ جيمسا تثبيت الخلايا على شريحة، ثم تطبيق صبغة جيمسا عليها لفترة زمنية محددة. بعد الصبغ، تُغسل الخلايا بالماء المقطر وتُزال ألوانها لإزالة الصبغة الزائدة. أخيرًا، تُجفف الشرائح وتُفحص تحت المجهر.
تشمل الاستخدامات الرئيسية لصبغة جيمسا تحديد الطفيليات المنقولة بالدم، مثل أنواع البلازموديوم، وتمايز خلايا الدم في لطاخات الدم المحيطية. علاوة على ذلك، تُستخدم هذه الطريقة على نطاق واسع في تحديد البكتيريا والفيروسات ومسببات الأمراض الأخرى في العينات السريرية.
تعتمد طريقة عملها على تقارب الصبغات الأساسية والحمضية مع المكونات الخلوية المختلفة، مما يوفر صورًا واضحة ومفصلة تحت المجهر.
فهم إجراءات التشريح المرضي باستخدام صبغة جيمسا للتحليل السريري.
صبغة جيمسا هي تقنية تُستخدم في علم الأمراض التشريحي للتحليل السريري لعينات الأنسجة. طورها العالم الألماني غوستاف جيمسا، وتُستخدم على نطاق واسع لقدرتها على إبراز مكونات خلوية مختلفة، مثل النوى والكروموسومات والطفيليات.
يتطلب تلوين جيمسا استخدام عدة مواد، منها صبغة جيمسا، والكحول الميثيلي، والمحلول الملحي، والشرائح الزجاجية. تتضمن العملية تثبيت العينة في الكحول الميثيلي، ثم وضع صبغة جيمسا، وغسلها بمحلول ملحي. بعد التلوين، تُفحص العينات تحت المجهر لتحليلها.
يُستخدم تلطيخ جيمسا على نطاق واسع في مختبرات علم الأمراض التشريحي لتحديد أمراض مختلفة، مثل العدوى الطفيلية، وسرطان الدم، وأمراض المناعة الذاتية. تتيح هذه التقنية تحليلًا دقيقًا للهياكل الخلوية، مما يُسهّل التشخيص السريري ومتابعة العلاج.
ويعتبر استخدامه ضروريا لتشخيص وعلاج الأمراض المختلفة، مما يجعله تقنية لا غنى عنها لمهنيي الرعاية الصحية.
التعرف على الصبغة المستخدمة في تلوين عينة الدم.
صبغة جيمسا هي طريقة شائعة تُستخدم لرصد أنواع مختلفة من خلايا الدم في لطاخة الدم. الصبغة الرئيسية المستخدمة في هذه العملية هي صبغة جيمسا، وهو عبارة عن خليط من الأزرق الميثيلين والإيوزين واللون الأزرق B. هذه الصبغة فعالة بشكل خاص في تلطيخ الهياكل مثل نوى الخلايا والكروموسومات والشوائب السيتوبلازمية.
صبغة جيمسا: الأساس والمواد والتقنية والاستخدامات
O صبغة جيمسا هو نوع من تلوين العينات السريرية، يعتمد على مزيج من الأصباغ الحمضية والقاعدية. استُلهم ابتكاره من أعمال رومانوفسكي، حيث قام غوستاف جيمسا، الكيميائي وعالم البكتيريا الألماني، بتحسينه بإضافة الجلسرين لتثبيت المركبات.
لقد سمحت لنا التغييرات التي أجريت على تقنية رومانوسكي الأصلية بتحسين الملاحظات المجهرية بشكل كبير؛ ولذلك، تم تسمية التقنية بصبغة جيمسا.
نظرًا لكونها تقنية بسيطة وعالية الأداء واقتصادية، فهي تستخدم حاليًا على نطاق واسع في المختبرات السريرية لعينات مسحات الدم ونخاع العظم ومقاطع الأنسجة.
تُعد تقنية تلوين جيمسا مفيدة جدًا للدراسات الخلوية، إذ تتيح رصد بنى خلوية محددة. تُلوّن هذه التقنية السيتوبلازم والنوى والنويات والفجوات والحبيبات الخلوية، مما يُمكّن من تمييز آثار الكروماتين الدقيقة.
علاوة على ذلك، من الممكن اكتشاف تغييرات كبيرة في حجم أو شكل أو لون النواة، حيث من الممكن تصور فقدان العلاقة بين النواة والسيتوبلازم.
من ناحية أخرى، يُمكّن هذا الفحص من تحديد الخلايا غير الناضجة في نخاع العظم والدم المحيطي، وهو أمرٌ بالغ الأهمية لتشخيص أمراض خطيرة مثل سرطان الدم. كما يُتيح الكشف عن طفيليات الدم، والبكتيريا داخل الخلايا وخارجها، والفطريات، ومسببات الأمراض الأخرى.
في علم الوراثة الخلوية، يتم استخدامه على نطاق واسع، لأنه من الممكن دراسة انقسام الخلايا.
أساس صبغة جيمسا
تستخدم صبغة رومانوسكي تباينًا بين الأصباغ الحمضية والقاعدية لصبغ التراكيب القاعدية والحمضية على التوالي. وكما هو واضح، تميل الأصباغ الحمضية إلى صبغ التراكيب القاعدية، والعكس صحيح.
الصبغة الأساسية المستخدمة هي الأزرق الميثيليني ومشتقاته المؤكسدة (أزور أ وأزور ب)، في حين أن الصبغة الحمضية هي الإيوزين.
تتكون التركيبات الحمضية للخلايا من الأحماض النووية وحبيبات الخلايا القاعدية المجزأة وغيرها، ولذلك يتم صبغها باللون الأزرق الميثيليني.
وبنفس المعنى فإن التركيبات الأساسية للخلايا هي الهيموجلوبين وبعض الحبيبات مثل تلك الموجودة في الخلايا الحمضية المجزأة وغيرها؛ وسيتم صبغها بالصبغة الإيوزينية.
من ناحية أخرى، بما أن اللون الأزرق الميثيليني والأزرق السماوي يتميزان بأنهما صبغات ميتاكروماتية، فإنهما يمكنهما توفير نغمة متغيرة لهياكل مختلفة وفقًا لشحنة البوليأنيون التي تمتلكها.
بهذه الطريقة، يمكن للجمع الاستراتيجي بين الصبغات الأساسية والحمضية أن يطور مجموعة واسعة من الألوان، وفقًا للخصائص الكيميائية الحيوية لكل بنية، تتراوح من ظلال الأزرق الباهت والأزرق الداكن والأرجواني والأرجواني في حالة البنيات الحمضية.
في حين أن اللون الذي توفره الصبغة الإيوزينية أكثر استقرارًا، إلا أنها تنتج ألوانًا بين البرتقالي المحمر والسلمون.
المواد
المواد اللازمة لإعداد المحلول المخزون
يتطلب تحضير المحلول المخزون وزن 600 ملجم من مسحوق صبغة جيمسا، وقياس 500 مل من الكحول الميثيلي الخالي من الأسيتون، و50 مل من الجلسرين المحايد.
طريقة تحضير المحلول المخزون
ضع مسحوق جيمسا الموزون في هاون. إذا كانت هناك أي كتل، فُتّت. ثم أضف كمية مناسبة من الجلسرين المُقاس واخلط جيدًا. صبّ الخليط الناتج في زجاجة كهرمانية نظيفة جدًا.
يُضاف الجلسرين المتبقي إلى الملاط. يُخلط مرة أخرى لإزالة أي صبغة متبقية عالقة بجدران الملاط، ثم يُسكب في الزجاجة نفسها.
يتم تغطية الزجاجة ونقلها لمدة ساعتين في حمام مائي عند درجة حرارة 2 درجة مئوية. أثناء وجوده في حمام الماء، حرك الخليط برفق كل نصف ساعة.
يُترك الخليط ليبرد قبل إضافة الكحول. يُضاف جزء من الكحول المُقاس إلى الملاط أولاً لإزالة أي صبغة متبقية، ثم يُضاف إلى الخليط مع الكحول المتبقي.
يُترك هذا المستحضر لينضج لمدة أسبوعين على الأقل. يُصفّى الجزء المُستخدم في المحلول الأم.
لتجنب تلوث المستحضر، يُنصح بنقل الكمية التي ستُستخدم باستمرار إلى زجاجة كهرمانية صغيرة مزودة بقطارة. وأعد تعبئتها كلما نفدت الكمية.
المواد اللازمة لإعداد المحلول المنظم
ومن ناحية أخرى، يتم تحضير محلول منظم عند درجة حموضة 7,2 على النحو التالي:
6,77 جرام من فوسفات الصوديوم (اللامائي) (NaHPO الموزون) 4 )، 2,59 جرام من فوسفات ثنائي هيدروجين البوتاسيوم (KH 2 PO 4 ), والماء المقطر حتى 1000 مل.
التحضير النهائي للصبغة
لتحضير محلول التلوين النهائي، قس ٢ مل من المحلول الخام المُرشَّح واخلطه مع ٦ مل من المحلول المنظم. رُجّ الخليط.
إحدى الحقائق ذات الصلة التي يجب أخذها في الاعتبار هي أن تقنيات تحضير الصبغة قد تتغير اعتمادًا على التثبيت التجاري.
المواد الإضافية اللازمة لصنع التلوين
بالإضافة إلى المواد الموصوفة، يجب أن يكون هناك جسور ملونة، وقمصان مع الماء أو سدادة قطنية لغسل الملابس، وملاءات مع أشياء أو أغطية، ومؤقت للتحكم في وقت التلوين وتجفيف الورق أو بعض المواد التي تستخدم للتجفيف (الشاش أو القطن).
تقنية
عملية التلوين
1) قبل التلوين، يجب نشر العينة على شريحة نظيفة.
يمكن أن تكون العينات دمًا، أو نخاعًا عظميًا، أو مقاطع نسيجية، أو عينات من عنق الرحم والمهبل. يُنصح بأن تكون المعاجين رقيقة، وأن تُترك لتجف لمدة ساعة إلى ساعتين قبل التلوين.
٢) على جسر التلوين، تُوضع جميع الأوراق الملونة. يعمل النظام دائمًا بنفس الترتيب، وكل ورقة مُسمّاة بوضوح.
3) ضع بضع قطرات من الكحول الميثيلي 100٪ (الميثانول) على اللطاخة واتركها لمدة 3 إلى 5 دقائق لتثبيت العينة وتجفيفها.
4) تخلص من الميثانول الموجود على الورقة واتركها لتجف في الهواء.
٥) بعد أن يجف، أضف محلول التلوين النهائي باستخدام قطارة حتى يُغطى الورقة بالكامل. اتركه لمدة ١٥ دقيقة. يوصي بعض الباحثين بتركه لمدة تصل إلى ٢٥ دقيقة. يعتمد ذلك على المتجر.
6) صفي البقعة واغسلي البقعة بالماء المقطر أو محلول منظم في 7.2.
7) على ورق ماص، اترك الأوراق لتجف في الهواء، ورتبها عموديًا بمساعدة دعامة.
8) امسح الجزء الخلفي من الشريحة بقطعة شاش أو قطعة قطن مغموسة في الكحول لإزالة أي صبغة.
خدمات
تُستخدم تقنية تلطيخ جيمسا في العديد من المجالات، بما في ذلك: علم أمراض الدم، وعلم الفطريات، وعلم البكتيريا، وعلم الطفيليات، وعلم الخلايا وعلم الوراثة الخلوية.
أمراض الدم
هذا هو الاستخدام الأكثر شيوعًا لهذه الصبغة. فبواسطتها، يُمكن تحديد كل خلية موجودة في نخاع العظم أو عينات الدم المحيطي. بالإضافة إلى تقدير عدد الخلايا في كل سلسلة، يُمكنها الكشف عن كثرة الكريات البيضاء أو نقصها، ونقص الصفيحات الدموية، وما إلى ذلك.
نظرًا لحساسيته في تحديد الخلايا غير الناضجة، فهو مفيد في تشخيص سرطان الدم الحاد أو المزمن. كما يُمكنه تشخيص فقر الدم، مثل فقر الدم المنجلي، وغيرها.
علم الفطريات
في هذه المنطقة، من الشائع استخدام المغمدة النوسجة (فطر ثنائي الشكل داخل الخلايا) في عينات الأنسجة.
علم الجراثيم
في لطاخات الدم الملطخة بصبغة جيمسا، من الممكن اكتشاف بوريلياس sp لدى مرضى الحمى الناكسة. تُلاحظ وجود البكتيريا الحلزونية بكثرة بين كريات الدم الحمراء في العينات المأخوذة عند ذروة الحمى.
ومن الممكن أيضًا تصور البكتيريا داخل الخلايا على أنها ريكتسيا sp e المتدثرة الحثرية في الخلايا المصابة.
علم الطفيليات
وفي مجال علم الطفيليات، سمحت صبغة جيمسا بتشخيص الأمراض الطفيلية مثل الملاريا وداء شاغاس وداء الليشمانيات.
في الطفيليين الأولين، البلازموديوم e تريبانوزوما كروزي، على التوالي، يمكن رؤيتها في الدم المحيطي للمرضى المصابين ويمكن العثور عليها في مراحل مختلفة اعتمادًا على مرحلة المرض.
لتحسين البحث عن الطفيليات في الدم، يوصى باستخدام صبغة جيمسا الممزوجة بصبغة ماي-جرونوالد.
وبالمثل، يمكن تشخيص داء الليشمانيات الجلدي عن طريق تقييم عينات خزعة الجلد المصبوغة بصبغة جيمسا في الأماكن التي يوجد بها الطفيلي.
علم الخلايا
كما تستخدم صبغة جيمسا أيضًا في الدراسة الخلوية لعينات بطانة عنق الرحم، على الرغم من أنها ليست التقنية الأكثر استخدامًا على نطاق واسع لهذا الغرض.
مع ذلك، في حالات ندرة الموارد، يمكن استخدامه، إذ يوفر وظائف مشابهة لمسحة عنق الرحم وبتكلفة أقل. مع ذلك، يتطلب خبرة من الفاحص.
علم الوراثة الخلوية
من أهم خصائص صبغة جيمسا قدرتها على الارتباط بقوة بمناطق الحمض النووي الغنية بالأدينين والثايمين. هذا يسمح بتصوير الحمض النووي أثناء انقسام الخلايا، في حالات مختلفة من التكثيف.
هذه الدراسات ضرورية للكشف عن الانحرافات اللونية، مثل التكرار أو الحذف أو النقل لمناطق مختلفة من الكروموسومات.
بحث يوضح فعالية صبغة جيمسا
قام كانوفا وآخرون (2016) بمقارنة ثلاث تقنيات تلوين لتشخيص داء الليشمانيات الجلدي.
ولتحقيق هذه الغاية، تم استخدام عينات تم الحصول عليها من حيوان تجريبي ( Mesocrisetus auratus) تم تطعيمها تجريبيا بالليشمانيا.
أثبت الباحثون تفوق صبغة جيمسا على صبغة باب-مارت® وصبغة غافني. ولذلك، اعتبروا صبغة جيمسا مثالية لتشخيص داء الليشمانيات الجلدي.
إن النتائج الممتازة التي حصل عليها المؤلفون تعود إلى حقيقة أن مزيج الصبغات الذي يشكل خليط جيمسا لديه الظروف اللازمة لخلق تباين مناسب، مما يجعل من الممكن التمييز بوضوح بين هياكل الأماستيجوت، داخل الخلايا وخارجها.
وقد حققت التقنيات الأخرى (باب-مارت® وغافني) نفس النتيجة، ولكن بدرجة أضعف، وبالتالي يصعب تصويرها. ولذلك، يُنصح باستخدام صبغة جيمسا للتشخيص الطفيلي لداء الليشمانيات.
وعلى نحو مماثل، قامت دراسة أجراها راميريز وآخرون (1994) بتقييم مدى صحة بقع جيمسا وليندروم في مسحات الملتحمة لتحديد الكلاميديا الحثرية.
وقد توصل المؤلفون إلى أن بقع جيمسا وليدروم تتمتع بنفس الخصوصية، إلا أن جيمسا أثبتت أنها أكثر حساسية.
وهذا يفسر لماذا يعد تلطيخ جيمسا حاليا الأكثر استخداما لتشخيص عدوى الكلاميديا، وخاصة في البيئات ذات الموارد المحدودة.
توصيات للتلوين الجيد
لا تجف الأوراق بسرعة. انتظر الوقت المناسب لتجفيفها في الهواء، حوالي ساعتين.
قم بالتلوين فورًا بعد مرور ساعتين للحصول على أفضل النتائج.
لتثبيت البقع ودمجها بشكل أفضل، يجب توزيع العينة على الورقة في طبقة رقيقة ومتساوية.
العينة الدموية المفضلة هي العينة الشعرية، حيث يتم أخذ اللطاخة مباشرة من قطرة الدم، وبالتالي فإن العينة لا تحتوي على أي إضافات، مما يساعد على الحفاظ على البنية الخلوية.
ومع ذلك، إذا تم استخدام الدم الوريدي، فيجب استخدام EDTA كمضاد للتخثر وليس الهيبارين، لأن هذا الأخير عادة ما يؤدي إلى تشويه الخلايا.
الأخطاء الشائعة في صبغة جيمسا
عند استخدام هذه التقنية، قد تحدث أخطاء. يتضح ذلك من خلال التغيرات المفاجئة في لون البنية.
لون أزرق للغاية
قد يكون ذلك بسبب:
- بقع سميكة جدًا
- تجاوز وقت التلوين
- غسل غير كاف.
- استخدام الكواشف ذات درجة الحموضة أعلى بكثير من درجة الحموضة المحايدة (القلوية).
في ظل هذه الظروف، تتشوه ألوان الهياكل التالية، بحيث تتحول كريات الدم الحمراء، بدلاً من أن تموت باللون الوردي السلموني، إلى اللون الأخضر، وحبيبات الخلايا الحمضية، التي يجب أن تكون مصبوغة باللون الأحمر الطوبي، تتحول إلى اللون الأزرق أو الرمادي، وهكذا. انحراف عن الظلال المعتادة.
لون وردي مفرط
قد يكون ذلك بسبب:
- وقت التلوين غير كافٍ.
- الغسيل لفترة طويلة أو بشكل مفرط.
- ليس جافًا جدًا
- استخدام الكواشف الحمضية للغاية.
في هذه الحالة المحددة، ستكون الهياكل التي عادة ما تكون ملونة باللون الأزرق بالكاد مرئية، في حين أن الهياكل التي تكون ملونة باللون الوردي ستكون ذات درجات ألوان مبالغ فيها للغاية.
على سبيل المثال: ستظهر خلايا الدم الحمراء باللون الأحمر الفاتح أو البرتقالي الغامق، وسيظهر الكروماتين النووي باللون الوردي الباهت، وستتحول حبيبات الخلايا الحمضية إلى اللون الأحمر الفاتح.
وجود رواسب في اللطاخة
قد تكون الأسباب:
- استخدم ملاءات متسخة أو مغسولة بشكل سيء.
- لا تترك البقعة تجف جيدا.
- اترك محلول التثبيت لفترة طويلة.
- غسل غير صحيح في نهاية الصبغة.
- عدم وجود ترشيح كافٍ أو عدم وجود ترشيح للصبغة المستخدمة.
وجود آثار مورفولوجية
قد تظهر آثار مورفولوجية في البقع، مما يُصعّب تصوّرها وتفسيرها. وذلك للأسباب التالية:
- نوع مضاد التخثر المستخدم، مثل الهيبارين.
- استخدام الأوراق المتسخة أو التالفة أو الزيتية.
وضع التخزين
بعد التحضير، يُحفظ الصبغ في درجة حرارة الغرفة (15-25 درجة مئوية) لمنع ترسبه. يُحفظ في وعاء كهرماني اللون محكم الإغلاق.
المراجع
- كانوفا د، بريتو إي، وسايمونز م. تقييم تقنيات التلوين لتشخيص داء الليشمانيات الجلدي. سالوس . 2016 ؛ 20 (2): 24-29.
- كواشف PanReac Applichem ITW. تلطيخ جيمسا. الإصدار 2: JMBJUL17 CEIVD10ES. كاستيلار ديل فاليس، إسبانيا.
- كلارك ج. إجراءات التلوين (1981)، المجلد الرابع. ويليامز وويلكينز.
- الكيمياء السريرية التطبيقية. صبغة جيمسا للتشخيص المختبر الموزع: cromakit.es
- راميريز الأول، ميخيا م، جارسيا دي لا ريفا ج، هيرميس ف وجراتسيوسو س. صحة بقع جيمسا وليندروم في مسحات الملتحمة لتحديد الكلاميديا الحثرية. سانيت بانام بول. 1994 ؛ 116 (3): 212-216.
- كاساس رينكون جي. علم الفطريات العام. 1994. الطبعة الثانية. جامعة فنزويلا المركزية، إصدارات المكتبة. فنزويلا، كاراكاس
- «صبغة جيمسا.» ويكيبيديا، الموسوعة الحرة ١ سبتمبر ٢٠١٧، الساعة ١:٠٢ صباحًا بتوقيت UTC. ٦ ديسمبر ٢٠١٨، en.wikipedia.org.