জিমসা স্টেইনিং হল মাইক্রোবায়োলজি এবং সাইটোজেনেটিক্সে ব্যবহৃত একটি কৌশল যা কোষ এবং টিস্যুতে দাগ দেওয়ার জন্য ব্যবহৃত হয়, যা নির্দিষ্ট কাঠামোর দৃশ্যায়নের অনুমতি দেয়। ১৯০৪ সালে গুস্তাভ জিমসা দ্বারা বিকশিত, জিমসা স্টেইনিং হল অণুজীব, পরজীবী এবং ক্রোমোজোম সনাক্ত করার জন্য ডায়াগনস্টিক ল্যাবরেটরিতে সর্বাধিক ব্যবহৃত কৌশলগুলির মধ্যে একটি।
জিমসা স্টেনিংয়ের জন্য জিমসা স্টেন, মিথানল এবং পাতিত জলের মতো উপকরণের প্রয়োজন হয়। এই কৌশলটিতে কোষগুলিকে কাচের স্লাইডে সংযুক্ত করা হয়, তারপরে মিথানলে মিশ্রিত জিমসা স্টেন প্রয়োগ করা হয়। স্টেনিংয়ের পরে, কোষগুলিকে পাতিত জলে ধুয়ে একটি মাইক্রোস্কোপের নীচে পর্যবেক্ষণ করা হয়।
জিমসা স্টেইনিংয়ের প্রধান ব্যবহারগুলির মধ্যে রয়েছে প্লাজমোডিয়াম (যা ম্যালেরিয়া সৃষ্টি করে), ট্রাইপানোসোমা (যা চাগাস রোগের কারণ হয়), এবং ক্ল্যামিডিয়া এবং রিকেটসিয়ার মতো ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণ। অধিকন্তু, জিনগত রোগ নির্ণয় এবং ক্রোমোজোম অস্বাভাবিকতা সনাক্তকরণের জন্য জিমসা স্টেইনিং ক্রোমোজোম বিশ্লেষণে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়।
জিমসা স্টেনিং কার্যকরভাবে করার জন্য ধাপে ধাপে নির্দেশিকা।
ক্লিনিক্যাল বিশ্লেষণ এবং বৈজ্ঞানিক গবেষণাগারে জিমসা স্টেইনিং একটি অপরিহার্য কৌশল। এটি বিভিন্ন কোষীয় কাঠামো, যেমন ক্রোমোজোম, পরজীবী এবং ব্যাকটেরিয়া, তাদের উপাদানগুলির নির্দিষ্ট স্টেইনিংয়ের মাধ্যমে কল্পনা করার সুযোগ দেয়। এই প্রবন্ধে, আমরা ধাপে ধাপে ব্যাখ্যা করব কিভাবে জিমসা স্টেইনিং কার্যকরভাবে করা যায়।
ধাপ 1: একটি জিমসা দ্রবণ প্রস্তুত করুন, যা রেডিমেড কেনা যাবে অথবা পাউডার দিয়ে তৈরি করা যাবে। দ্রবণটি প্রস্তুতকারকের সুপারিশকৃত অনুপাতে পাতিত জলে মিশ্রিত করা উচিত।
ধাপ 2: তাপ বা ইথাইল অ্যালকোহলের মতো ফিক্সেটিভ ব্যবহার করে নমুনাটি একটি কাচের স্লাইডে আটকান। দাগ দেওয়ার সময় বিকৃতি এড়াতে নমুনাটি নিরাপদে স্থির করা হয়েছে তা নিশ্চিত করুন।
ধাপ 3: স্থির নমুনাটি জিমসা দ্রবণ দিয়ে ঢেকে দিন, যাতে পুরো পৃষ্ঠটি সমানভাবে ঢেকে যায়। স্লাইডটিকে একটি নির্দিষ্ট সময়ের জন্য, সাধারণত ১০ থেকে ৩০ মিনিটের মধ্যে, দ্রবণের সংস্পর্শে থাকতে দিন।
ধাপ 4: অতিরিক্ত দাগ দূর করতে স্লাইডটি চলমান জলের নীচে ধুয়ে ফেলুন। শোষক কাগজ বা সংকুচিত বাতাস দিয়ে আলতো করে স্লাইডটি শুকিয়ে নিন।
ধাপ 5: উপযুক্ত ম্যাগনিফাইং উদ্দেশ্য ব্যবহার করে হালকা মাইক্রোস্কোপের নীচে দাগযুক্ত নমুনাটি পর্যবেক্ষণ করুন। জিমসা স্টেইনিং কোষীয় কাঠামোর দৃশ্যায়নকে আরও স্পষ্টতা এবং বৈসাদৃশ্যের সাথে অনুমোদন করবে।
জীববিজ্ঞান এবং চিকিৎসার বিভিন্ন ক্ষেত্রে জিমসা স্টেইনিং ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়, যেমন পরজীবী রোগ নির্ণয়, রক্তকণিকা বিশ্লেষণ এবং সংক্রামক এজেন্ট সনাক্তকরণ। উপরে বর্ণিত পদক্ষেপগুলি সঠিকভাবে অনুসরণ করে, সঠিক এবং নির্ভরযোগ্য জিমসা স্টেইনিং ফলাফল পাওয়া যেতে পারে।
জিমসা স্টেনিং প্রক্রিয়া এবং এটি কীভাবে কাজ করে তা বিস্তারিতভাবে বুঝুন।
জিমসা স্টেনিং হল মাইক্রোবায়োলজি এবং হেমাটোলজি ল্যাবরেটরিতে কোষীয় কাঠামো কল্পনা এবং রোগজীবাণু সনাক্তকরণের জন্য ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত একটি পদ্ধতি। ১৯০২ সালে গুস্তাভ জিমসা দ্বারা বিকশিত, এই পদ্ধতিটি বিভিন্ন কোষীয় উপাদানের জন্য মৌলিক এবং অ্যাসিডিক রঞ্জকগুলির সখ্যতার উপর ভিত্তি করে তৈরি।
জিমসা স্টেনিংয়ের জন্য প্রয়োজনীয় উপকরণগুলির মধ্যে রয়েছে জিমসা স্টেন, ফিক্সেশন এবং ডেস্টেইনিং সলিউশন, স্লাইড, কভারস্লিপ এবং একটি মাইক্রোস্কোপ। জিমসা স্টেন হল মিথিলিন ব্লু, ইওসিন এবং গ্লিসারিনের মিশ্রণ এবং কোষের নিউক্লিয়ার এবং সাইটোপ্লাজমিক কাঠামোতে দাগ দেওয়ার জন্য ব্যবহৃত হয়।
জিমসা স্টেনিং কৌশলে কোষগুলিকে একটি স্লাইডে স্থির করা হয়, তারপরে একটি নির্দিষ্ট সময়ের জন্য জিমসা স্টেন প্রয়োগ করা হয়। স্টেনিংয়ের পরে, কোষগুলিকে পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে অতিরিক্ত দাগ অপসারণের জন্য রঙিন করা হয়। অবশেষে, স্লাইডগুলি শুকানো হয় এবং একটি মাইক্রোস্কোপের নীচে পর্যবেক্ষণ করা হয়।
জিমসা স্টেইনিংয়ের প্রধান ব্যবহারগুলির মধ্যে রয়েছে প্লাজমোডিয়াম এসপিপি-র মতো রক্তবাহিত পরজীবী সনাক্তকরণ এবং পেরিফেরাল ব্লাড স্মিয়ারে রক্তকণিকার পার্থক্যকরণ। তদুপরি, ক্লিনিকাল নমুনায় ব্যাকটেরিয়া, ভাইরাস এবং অন্যান্য রোগজীবাণু সনাক্তকরণে এই পদ্ধতিটি ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়।
এর কার্যকারিতা বিভিন্ন কোষীয় উপাদানের সাথে মৌলিক এবং অ্যাসিডিক রঞ্জকগুলির সখ্যতার উপর ভিত্তি করে তৈরি, যা মাইক্রোস্কোপের নীচে পরিষ্কার এবং বিস্তারিত চিত্র প্রদান করে।
ক্লিনিকাল বিশ্লেষণের জন্য জিমসা স্টেনিং ব্যবহার করে প্যাথলজিক্যাল অ্যানাটমি পদ্ধতিটি বুঝুন।
জিমসা স্টেইনিং হল টিস্যু নমুনার ক্লিনিকাল বিশ্লেষণের জন্য শারীরবৃত্তীয় রোগবিদ্যায় ব্যবহৃত একটি কৌশল। জার্মান বিজ্ঞানী গুস্তাভ জিমসা দ্বারা তৈরি, এই স্টেইনটি নিউক্লিয়াস, ক্রোমোজোম এবং পরজীবীর মতো বিভিন্ন কোষীয় উপাদানগুলিকে হাইলাইট করার ক্ষমতার কারণে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়।
জিমসা স্টেনিংয়ের জন্য জিমসা স্টেন, মিথাইলেটেড স্পিরিট, স্যালাইন দ্রবণ এবং কাচের স্লাইড সহ বেশ কয়েকটি উপকরণের প্রয়োজন হয়। এই পদ্ধতিতে নমুনাটি মিথাইলেটেড স্পিরিট দিয়ে ঠিক করা, জিমসা স্টেন প্রয়োগ করা এবং স্যালাইন দ্রবণ দিয়ে ধোয়া অন্তর্ভুক্ত। স্টেনিংয়ের পরে, নমুনাগুলি বিশ্লেষণের জন্য একটি মাইক্রোস্কোপের নীচে পর্যবেক্ষণ করা হয়।
পরজীবী সংক্রমণ, লিউকেমিয়া এবং অটোইমিউন রোগের মতো বিভিন্ন রোগ সনাক্তকরণের জন্য অ্যানাটমিক প্যাথলজি ল্যাবরেটরিতে জিমসা স্টেইনিং ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। এই কৌশলটি কোষীয় কাঠামোর বিশদ বিশ্লেষণের অনুমতি দেয়, যা ক্লিনিকাল রোগ নির্ণয় এবং চিকিৎসা পর্যবেক্ষণকে সহজতর করে।
বিভিন্ন রোগ নির্ণয় এবং চিকিৎসার জন্য এর ব্যবহার অপরিহার্য, যা এটিকে স্বাস্থ্যসেবা পেশাদারদের জন্য একটি অপরিহার্য কৌশল করে তোলে।
রক্তের দাগ দাগানোর জন্য ব্যবহৃত রঞ্জক পদার্থের শনাক্তকরণ।
রক্তের স্মিয়ারে বিভিন্ন ধরণের রক্তকণিকা পর্যবেক্ষণের জন্য জিমসা স্টেইনিং একটি সাধারণ পদ্ধতি। এই প্রক্রিয়ায় ব্যবহৃত প্রধান রঞ্জক পদার্থ হল জিমসার দাগ, যা মিথিলিন নীল, ইওসিন এবং আকাশী বি এর মিশ্রণ। এই রঞ্জকটি কোষের নিউক্লিয়াস, ক্রোমোজোম এবং সাইটোপ্লাজমিক অন্তর্ভুক্তির মতো কাঠামোর রঙ পরিবর্তনে বিশেষভাবে কার্যকর।
জিমসা দাগ: ভিত্তি, উপকরণ, কৌশল এবং ব্যবহার
O জিমসার দাগ এটি ক্লিনিকাল নমুনার জন্য এক ধরণের স্টেনিং, যা অ্যাসিডিক এবং মৌলিক রঙের মিশ্রণের উপর ভিত্তি করে তৈরি করা হয়। এর সৃষ্টি রোমানোস্কির কাজ দ্বারা অনুপ্রাণিত হয়েছিল, যেখানে জার্মান রসায়নবিদ এবং ব্যাকটেরিওলজিস্ট গুস্তাভ গিমসা যৌগগুলিকে স্থিতিশীল করার জন্য গ্লিসারল যোগ করে এটিকে নিখুঁত করেছিলেন।
রোমানোস্কির মূল কৌশলে করা পরিবর্তনগুলি আমাদেরকে আণুবীক্ষণিক পর্যবেক্ষণের উল্লেখযোগ্য উন্নতি করতে সাহায্য করেছিল; তাই, এই কৌশলটির নামকরণ করা হয়েছিল জিমসা স্টেনিং।
যেহেতু এটি একটি সহজ, অত্যন্ত কার্যকরী এবং সাশ্রয়ী কৌশল, এটি বর্তমানে ক্লিনিকাল ল্যাবরেটরিতে হেমাটোলজিক্যাল স্মিয়ার, অস্থি মজ্জার নমুনা এবং টিস্যু বিভাগের জন্য ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়।
জিমসা স্টেইনিং কৌশলটি সাইটোলজিক্যাল স্টাডির জন্য খুবই কার্যকর, কারণ এটি নির্দিষ্ট কোষীয় কাঠামো পর্যবেক্ষণের সুযোগ করে দেয়। এই কৌশলটি কোষের সাইটোপ্লাজম, নিউক্লিয়াস, নিউক্লিওলি, ভ্যাকুওল এবং গ্রানুলগুলিকে দাগ দেয়, ক্রোমাটিনের সূক্ষ্ম চিহ্নগুলিকে আলাদা করতে সক্ষম হয়।
অধিকন্তু, নিউক্লিয়াসের আকার, আকৃতি বা রঙের উল্লেখযোগ্য পরিবর্তন সনাক্ত করা যেতে পারে, যেখানে নিউক্লিয়াস-সাইটোপ্লাজম সম্পর্কের ক্ষতি কল্পনা করা সম্ভব।
অন্যদিকে, এটি অস্থি মজ্জা এবং পেরিফেরাল রক্তে অপরিণত কোষ সনাক্তকরণের অনুমতি দেয়, যা লিউকেমিয়ার মতো গুরুতর রোগ নির্ণয়ের জন্য গুরুত্বপূর্ণ। এটি হিমোপ্যারাসাইট, বহির্কোষীয় এবং অন্তঃকোষীয় ব্যাকটেরিয়া, ছত্রাক এবং অন্যান্য রোগজীবাণু সনাক্তকরণেরও অনুমতি দেয়।
সাইটোজেনেটিক্সে, এটি ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়, কারণ এটি কোষের মাইটোসিস অধ্যয়ন করা সম্ভব।
জিমসা স্টেন ফাউন্ডেশন
রোমানোস্কি-ধরণের দাগগুলি যথাক্রমে মৌলিক এবং অ্যাসিডিক কাঠামোতে দাগ দেওয়ার জন্য অ্যাসিডিক এবং মৌলিক রঙের মধ্যে একটি বৈসাদৃশ্য ব্যবহার করে। দেখা যাচ্ছে, অ্যাসিডিক রঙগুলির মৌলিক কাঠামোতে দাগ দেওয়ার জন্য একটি আকর্ষণ রয়েছে এবং তদ্বিপরীত।
ব্যবহৃত মৌলিক রঞ্জক পদার্থ হল মিথিলিন নীল এবং এর জারিত ডেরিভেটিভস (আজোর এ এবং আজোর বি), অন্যদিকে অ্যাসিডিক রঞ্জক পদার্থ হল ইওসিন।
কোষগুলির অম্লীয় গঠন হল নিউক্লিক অ্যাসিড, খণ্ডিত বেসোফিল গ্রানুল ইত্যাদি, তাই এগুলি মিথিলিন নীল দিয়ে রঞ্জিত।
একই অর্থে, কোষের মৌলিক কাঠামো হল হিমোগ্লোবিন এবং কিছু দানা, যেমন খণ্ডিত ইওসিনোফিলের মধ্যে থাকা দানা, অন্যান্যদের মধ্যে; এগুলি ইওসিন দিয়ে রঙ করা হবে।
অন্যদিকে, যেহেতু মিথিলিন নীল এবং আকাশী নীলকে মেটাক্রোমেটিক রঞ্জক হিসেবে চিহ্নিত করা হয়, তাই তারা তাদের ধারণকৃত পলিয়ানিয়ন চার্জ অনুসারে বিভিন্ন কাঠামোতে একটি পরিবর্তনশীল স্বর প্রদান করতে পারে।
এইভাবে মৌলিক এবং অ্যাসিডিক রঞ্জকগুলির কৌশলগত সংমিশ্রণ প্রতিটি কাঠামোর জৈব রাসায়নিক বৈশিষ্ট্য অনুসারে রঙের বিস্তৃত বর্ণালী তৈরি করতে পারে, যার মধ্যে রয়েছে অ্যাসিডিক কাঠামোর ক্ষেত্রে ফ্যাকাশে নীল, গাঢ় নীল, লিলাক এবং বেগুনি রঙের ছায়া।
ইওসিনের রঙ আরও স্থিতিশীল হলেও, এটি লালচে কমলা এবং স্যামনের মধ্যে রঙ তৈরি করে।
উপকরণ
স্টক দ্রবণ প্রস্তুত করার জন্য উপকরণ
স্টক দ্রবণ প্রস্তুত করার জন্য ৬০০ মিলিগ্রাম জিমসা পাউডার স্টেন, ৫০০ মিলি অ্যাসিটোন-মুক্ত মিথাইল অ্যালকোহল এবং ৫০ মিলি নিউট্রাল গ্লিসারিন ওজনের প্রয়োজন হয়।
স্টক দ্রবণ প্রস্তুত করার পদ্ধতি
ওজন করা জিমসা পাউডারটি একটি মর্টারে রাখুন। যদি কোনও পিণ্ড থাকে, তবে সেগুলি গুঁড়ো করে নিতে হবে। তারপর, পরিমাণমতো গ্লিসারিন যোগ করুন এবং পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রিত করুন। ফলে তৈরি মিশ্রণটি একটি খুব পরিষ্কার অ্যাম্বার বোতলে ঢেলে দিন।
বাকি গ্লিসারিন মর্টারটিতে যোগ করা হয়। মর্টারের দেয়ালে লেগে থাকা বাকি রঞ্জক পদার্থ অপসারণের জন্য আবার মেশান এবং তারপর একই বোতলে ঢেলে দিন।
বোতলটি ঢেকে ৫৫ ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় ২ ঘন্টা জল স্নানে রাখা হয় এবং পরিবহন করা হয়। জল স্নানে থাকাকালীন, প্রতি আধ ঘন্টা অন্তর মিশ্রণটি হালকাভাবে নাড়ুন।
তারপর মিশ্রণটিকে ঠান্ডা হতে দেওয়া হয় এবং তারপর অ্যালকোহল যোগ করা হয়। পরিমাপ করা অ্যালকোহলের একটি অংশ প্রথমে মর্টারে যোগ করা হয় যাতে অবশিষ্ট রঞ্জক পদার্থ ধুয়ে ফেলা যায়, তারপর অবশিষ্ট অ্যালকোহলের সাথে মিশ্রণটিতে যোগ করা হয়।
এই প্রস্তুতিটি কমপক্ষে ২ সপ্তাহের জন্য পরিপক্ক হওয়ার জন্য রেখে দেওয়া উচিত। মাদার লিকারে ব্যবহৃত অংশটি ফিল্টার করা উচিত।
প্রস্তুতির দূষণ এড়াতে, ক্রমাগত ব্যবহারের জন্য থাকা অংশটি একটি ছোট অ্যাম্বার বোতলে ড্রপার সহ স্থানান্তর করার পরামর্শ দেওয়া হয়। প্রতিবার রিএজেন্ট শেষ হয়ে গেলে পুনরায় পূরণ করুন।
বাফার দ্রবণ প্রস্তুত করার জন্য উপকরণ
অন্যদিকে, pH 7,2 এ একটি বাফার দ্রবণ নিম্নরূপ প্রস্তুত করা হয়:
৬.৭৭ গ্রাম সোডিয়াম ফসফেট (অ্যানহাইড্রাস) (ওজন করা হয়েছে NaHPO 4 ), ২.৫৯ গ্রাম পটাসিয়াম ডাইহাইড্রোজেন ফসফেট (KH) 2 PO 4 ), এবং ১০০০ মিলি পর্যন্ত পাতিত জল।
চূড়ান্ত রঞ্জক প্রস্তুতি
চূড়ান্ত স্টেনিং দ্রবণ প্রস্তুত করতে, ফিল্টার করা স্টক দ্রবণের 2 মিলি পরিমাপ করুন এবং এটি 6 মিলি বাফার দ্রবণের সাথে মিশিয়ে নিন। মিশ্রণটি ঝাঁকানো হয়।
একটি প্রাসঙ্গিক তথ্য যা বিবেচনায় রাখা উচিত তা হল, বাণিজ্যিক ইনস্টলেশনের উপর নির্ভর করে রঞ্জক প্রস্তুতির কৌশল পরিবর্তিত হতে পারে।
রঙ করার জন্য প্রয়োজনীয় অতিরিক্ত উপকরণ
বর্ণিত উপকরণ ছাড়াও, রঙিন ব্রিজ, জলযুক্ত টি-শার্ট বা কাপড় ধোয়ার জন্য একটি ট্যাম্পন, জিনিসপত্র বা কভারযুক্ত চাদর, রঙ করার সময় এবং কাগজ ব্লট করার সময় নিয়ন্ত্রণ করার জন্য একটি টাইমার বা শুকানোর জন্য ব্যবহৃত কিছু উপাদান (গজ বা তুলা) থাকতে হবে।
প্রযুক্তি
রঙ করার প্রক্রিয়া
১) দাগ দেওয়ার আগে, নমুনাটি একটি পরিষ্কার স্লাইডে ছড়িয়ে দিতে হবে।
নমুনাগুলি রক্ত, অস্থি মজ্জা, হিস্টোলজিক্যাল টিস্যু বিভাগ, অথবা সার্ভিকাল-যোনি নমুনা হতে পারে। দাগ দেওয়ার আগে পেস্টগুলি পাতলা করে ১ থেকে ২ ঘন্টা শুকানোর পরামর্শ দেওয়া হয়।
২) একটি রঙিন সেতুতে, সমস্ত রঙিন পাতা স্থাপন করা হয়। এটি সর্বদা একই ক্রমে কাজ করে এবং প্রতিটি পাতা স্পষ্টভাবে লেবেলযুক্ত থাকে।
৩) স্মিয়ারের উপর কয়েক ফোঁটা ১০০% মিথাইল অ্যালকোহল (মিথানল) লাগান এবং নমুনাটি ঠিক করার এবং ডিহাইড্রেট করার জন্য ৩ থেকে ৫ মিনিট রেখে দিন।
৪) পাতায় উপস্থিত মিথানল ফেলে দিন এবং বাতাসে শুকাতে দিন।
৫) শুকিয়ে গেলে, ড্রপার দিয়ে শেষ রঙ করার দ্রবণটি যোগ করুন যতক্ষণ না পুরো পাতাটি ঢেকে যায়। এটি ১৫ মিনিটের জন্য রেখে দিন। কিছু লেখক ২৫ মিনিট পর্যন্ত সুপারিশ করেন। এটি দোকানের উপর নির্ভর করে।
৬) দাগটি ঝরিয়ে নিন এবং 6 এ পাতিত জল বা বাফার দ্রবণ দিয়ে স্মিয়ারটি ধুয়ে ফেলুন।
৭) শোষক কাগজে, পাতাগুলিকে বাতাসে শুকাতে দিন, একটি সাপোর্টের সাহায্যে উল্লম্বভাবে সাজিয়ে রাখুন।
৮) যেকোনো রঞ্জক পদার্থ অপসারণের জন্য অ্যালকোহলে ডুবানো গজ প্যাড বা তুলো দিয়ে স্লাইডের পিছনের অংশটি মুছুন।
ইউটিলিটারিওস
জিমসা স্টেনিং কৌশলটি বিভিন্ন ক্ষেত্রে ব্যবহৃত হয়, যার মধ্যে রয়েছে: হেমাটোলজি, মাইকোলজি, ব্যাকটিরিওলজি, প্যারাসিটোলজি, সাইটোলজি এবং সাইটোজেনেটিক্স।
হেম্যাটোলজি
এই দাগের জন্য এটি সবচেয়ে সাধারণ ব্যবহার। এটির সাহায্যে, অস্থি মজ্জা বা পেরিফেরাল রক্তের নমুনায় উপস্থিত প্রতিটি কোষ সনাক্ত করা যেতে পারে। প্রতিটি সিরিজের কোষের সংখ্যা অনুমান করার পাশাপাশি, এটি লিউকোসাইটোসিস বা লিউকোপেনিয়া, থ্রম্বোসাইটোপেনিয়া ইত্যাদি সনাক্ত করতে পারে।
যেহেতু এটি অপরিণত কোষ সনাক্তকরণে সংবেদনশীল, তাই এটি তীব্র বা দীর্ঘস্থায়ী লিউকেমিয়া নির্ণয়ে কার্যকর। এটি সিকেল সেল রোগের মতো রক্তাল্পতাও নির্ণয় করতে পারে।
মাইকোলজি
এই এলাকায়, এটি ব্যবহার করা সাধারণ হিস্টোপ্লাজমা ক্যাপসুল্যাটাম (অন্তঃকোষীয় দ্বিরূপী ছত্রাক) টিস্যু নমুনায়।
ব্যাকটেরিওলজি
জিমসা দিয়ে দাগযুক্ত হেমাটোলজিক স্মিয়ারে, এটি সনাক্ত করা সম্ভব বোরেলিয়াস স্প রিল্যাপসিং ফিভার নামক রোগের রোগীদের ক্ষেত্রে। জ্বরের শীর্ষে সংগৃহীত নমুনায় লোহিত রক্তকণিকার মধ্যে প্রচুর পরিমাণে স্পাইরোকেট দেখা যায়।
অন্তঃকোষীয় ব্যাকটেরিয়াকে এইভাবে কল্পনা করাও সম্ভব রিকেটসিয়া স্প e ক্ল্যামিডিয়া ট্রেকোমিটিস সংক্রামিত কোষে।
পরজীবীবিদ্যা
পরজীবীবিদ্যার ক্ষেত্রে, জিমসা স্টেইনিং ম্যালেরিয়া, চাগাস রোগ এবং লেইশম্যানিয়াসিসের মতো পরজীবী রোগ নির্ণয়ের অনুমতি দিয়েছে।
প্রথম দুটি পরজীবীতে, প্লাজমোডিয়াম এসপি e ট্রাইপানোসোমা ক্রুজি, যথাক্রমে, সংক্রামিত রোগীদের পেরিফেরাল রক্তে দেখা যায় এবং রোগের পর্যায়ের উপর নির্ভর করে বিভিন্ন পর্যায়ে পাওয়া যায়।
রক্তে পরজীবী অনুসন্ধান উন্নত করার জন্য, মে-গ্রুনওয়াল্ড দাগের সাথে মিশ্রিত জিমসা দাগ ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়।
একইভাবে, যেখানে পরজীবী পাওয়া যায়, সেখানে জিমসা-দাগযুক্ত ত্বকের বায়োপসি নমুনা মূল্যায়ন করে ত্বকের লেইশম্যানিয়াসিস নির্ণয় করা যেতে পারে।
সিটোলজিয়া
এন্ডোসার্ভিকাল নমুনার সাইটোলজিক্যাল অধ্যয়নের জন্যও জিমসা স্টেনিং ব্যবহার করা হয়, যদিও এটি এই উদ্দেশ্যে সর্বাধিক ব্যবহৃত কৌশল নয়।
তবে, সম্পদের অভাবের ক্ষেত্রে, এটি ব্যবহার করা যেতে পারে, যা প্যাপ স্মিয়ারের মতো কার্যকারিতা প্রদান করে এবং কম খরচে। তবে, এর জন্য পরীক্ষকের কাছ থেকে দক্ষতার প্রয়োজন।
সাইটোজেনেটিক্স
জিমসা স্টেইনিংয়ের একটি প্রধান বৈশিষ্ট্য হল অ্যাডেনিন এবং থাইমিন সমৃদ্ধ ডিএনএ অঞ্চলের সাথে দৃঢ়ভাবে আবদ্ধ হওয়ার ক্ষমতা। এটি কোষের মাইটোসিসের সময় ঘনীভবনের বিভিন্ন অবস্থায় ডিএনএকে কল্পনা করার অনুমতি দেয়।
ক্রোমোজোমের বিভিন্ন অঞ্চলের অনুলিপি, মুছে ফেলা বা স্থানান্তরের মতো বর্ণগত বিকৃতি সনাক্ত করার জন্য এই অধ্যয়নগুলি প্রয়োজনীয়।
জিমসা স্টেনিংয়ের কার্যকারিতা প্রদর্শনকারী গবেষণা
ক্যানোভা এট আল (২০১৬) ত্বকের লেইশম্যানিয়াসিস নির্ণয়ের জন্য তিনটি স্টেনিং কৌশল তুলনা করেছেন।
এই উদ্দেশ্যে, একটি পরীক্ষামূলক প্রাণী থেকে প্রাপ্ত নমুনা ব্যবহার করা হয়েছিল ( মেসোক্রিসেটাস অরাটাস) পরীক্ষামূলকভাবে লেইশম্যানিয়াসের টিকা দেওয়া হয়েছে।
লেখকরা দেখিয়েছেন যে জিমসা স্টেইনিং প্যাপ-মার্ট® এবং গ্যাফনি স্টেইনিংয়ের চেয়ে উন্নত। অতএব, তারা জিমসা স্টেইনিংকে ত্বকের লেইশম্যানিয়াসিস নির্ণয়ের জন্য আদর্শ বলে মনে করেছিলেন।
লেখকদের দ্বারা প্রাপ্ত চমৎকার ফলাফলের কারণ হল জিমসা মিশ্রণ তৈরি করে এমন রঞ্জক পদার্থের সংমিশ্রণে একটি অনুকূল বৈসাদৃশ্য তৈরি করার জন্য প্রয়োজনীয় শর্ত রয়েছে, যার ফলে অ্যামাস্টিগোটগুলির গঠন স্পষ্টভাবে আলাদা করা সম্ভব হয়, কোষের অভ্যন্তরে এবং কোষের বাইরে উভয় দিক থেকেই।
অন্যান্য কৌশলগুলি (প্যাপ-মার্ট® এবং গ্যাফনি)ও এটি করেছে, কিন্তু দুর্বল উপায়ে এবং তাই কল্পনা করা আরও কঠিন। এই কারণেই লেইশম্যানিয়াসিসের পরজীবী রোগ নির্ণয়ের জন্য জিমসা স্টেইনিং সুপারিশ করা হয়।
একইভাবে, রামিরেজ এট আল (১৯৯৪) এর একটি গবেষণায় কনজাংটিভাল স্মিয়ারে জিমসা এবং লেন্ড্রাম দাগের বৈধতা মূল্যায়ন করা হয়েছে যা সনাক্তকরণের জন্য ক্ল্যামিডিয়া ট্র্যাকোমাটিস।
লেখকরা নির্ধারণ করেছেন যে জিমসা এবং লেড্রাম দাগের একই বৈশিষ্ট্য রয়েছে, কিন্তু জিমসা আরও সংবেদনশীল বলে প্রমাণিত হয়েছে।
এটি ব্যাখ্যা করে যে কেন জিমসা স্টেইনিং বর্তমানে ক্ল্যামিডিয়াল সংক্রমণ নির্ণয়ের জন্য সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত হয়, বিশেষ করে সম্পদের অভাবযুক্ত পরিবেশে।
ভালো রঙের জন্য সুপারিশ
পাতা খুব তাড়াতাড়ি শুকানো উচিত নয়। বাতাসে শুকানোর জন্য উপযুক্ত সময় অপেক্ষা করা উচিত। প্রায় ২ ঘন্টা।
সেরা ফলাফলের জন্য ২ ঘন্টা পরেই রঙ করুন।
দাগগুলো যাতে ভালোভাবে জমে এবং মিশে যায়, তার জন্য নমুনাটি পুরো শীট জুড়ে একটি পাতলা, সমান স্তরে ছড়িয়ে দিতে হবে।
পছন্দের রক্তের নমুনা হল কৈশিক, কারণ স্মিয়ারটি সরাসরি রক্তের ফোঁটা থেকে নেওয়া হয় এবং তাই, নমুনায় কোনও সংযোজন থাকে না, যা কোষীয় কাঠামোর রক্ষণাবেক্ষণের পক্ষে।
তবে, যদি শিরাস্থ রক্ত ব্যবহার করা হয়, তাহলে EDTA হেপারিন নয় বরং অ্যান্টিকোয়াগুল্যান্ট হিসেবে ব্যবহার করা উচিত, কারণ হেপারিন সাধারণত কোষগুলিকে বিকৃত করে।
জিমসা রঙ করার ক্ষেত্রে সাধারণ ভুল
এই রঙ করার কৌশলটি ব্যবহার করার সময়, ভুল হতে পারে। কাঠামোর রঙের আকস্মিক পরিবর্তনের মাধ্যমে এর প্রমাণ পাওয়া যায়।
অত্যন্ত নীল রঙ
এর কারণ হতে পারে:
- খুব ঘন দাগ।
- রঙ করার সময় অতিক্রম করা
- পর্যাপ্ত পরিমাণে ধোয়া না।
- নিরপেক্ষ (ক্ষারীয়) pH এর অনেক উপরে বিকারক ব্যবহার।
এই পরিস্থিতিতে, নিম্নলিখিত কাঠামোর রঙ বিকৃত হয়, যার ফলে লাল রক্তকণিকা, স্যামন-গোলাপী রঙের পরিবর্তে, সবুজ হয়ে যাবে, ইওসিনোফিল দানা, যা ইট-লাল রঙে রঙ করা উচিত, নীলাভ বা ধূসর হয়ে যাবে, ইত্যাদি। স্বাভাবিক ছায়া থেকে বিচ্যুতি।
অত্যধিক গোলাপী রঙ
এর কারণ হতে পারে:
- রঙ করার সময় অপর্যাপ্ত।
- দীর্ঘক্ষণ বা অতিরিক্ত ধোয়া।
- খুব শুষ্ক নয়।
- অত্যন্ত অ্যাসিডিক বিকারক ব্যবহার।
এই নির্দিষ্ট ক্ষেত্রে, সাধারণত নীল রঙে রঙ করা কাঠামোগুলি খুব কমই দৃশ্যমান হবে, অন্যদিকে গোলাপী রঙ করা কাঠামোগুলির রঙগুলি খুব অতিরঞ্জিত হবে।
উদাহরণ: লোহিত রক্তকণিকা উজ্জ্বল লাল বা গাঢ় কমলা রঙের দেখাবে, নিউক্লিয়ার ক্রোমাটিন ফ্যাকাশে গোলাপী দেখাবে এবং ইওসিনোফিল গ্রানুলগুলি উজ্জ্বল লাল রঙ ধারণ করবে।
স্মিয়ারে অবক্ষেপের উপস্থিতি
কারণগুলি হতে পারে:
- নোংরা বা খারাপভাবে ধোয়া চাদর ব্যবহার করুন।
- দাগ ভালোভাবে শুকাতে দেবেন না।
- ফিক্সিং সলিউশনটি দীর্ঘ সময়ের জন্য রেখে দিন।
- রঙ করার শেষে ভুল ধোয়া।
- ব্যবহৃত রঞ্জকের অপর্যাপ্ত পরিস্রাবণ বা কোনও পরিস্রাবণ না হওয়া।
রূপগত নিদর্শনগুলির উপস্থিতি
দাগের মধ্যে রূপগত নিদর্শন দেখা দিতে পারে, যার ফলে কাঠামোগুলি কল্পনা করা এবং ব্যাখ্যা করা কঠিন হয়ে পড়ে। এর কারণ হল:
- ব্যবহৃত অ্যান্টিকোয়াগুল্যান্টের ধরণ, যেমন হেপারিন।
- নোংরা, ক্ষতিগ্রস্ত বা তৈলাক্ত পাতা ব্যবহার।
স্টোরেজ মোড
প্রস্তুত করার পর, রঞ্জক পদার্থটি ঘরের তাপমাত্রায় (১৫-২৫°C) রাখতে হবে যাতে রঞ্জক পদার্থের বৃষ্টিপাত না হয়। এটি একটি শক্তভাবে বন্ধ অ্যাম্বার রঙের পাত্রে সংরক্ষণ করা উচিত।
তথ্যসূত্র
- ক্যানোভা ডি, ব্রিটো ই এবং সাইমনস এম। ত্বকের লেইশম্যানিয়াসিস নির্ণয়ের জন্য স্টেনিং কৌশলের মূল্যায়ন। সালাস . 2016; 20 (2): 24-29।
- PanReac Applicem Reagents ITW. Giemsa staining. সংস্করণ 2: JMBJUL17 CEIVD10ES। ক্যাসেলার দেল ভালেস, স্পেন।
- ক্লার্ক জি. স্টেইনিং প্রসিডিউর (১৯৮১), ৪র্থ। উইলিয়ামস এবং উইলকিন্স।
- অ্যাপ্লাইড ক্লিনিক্যাল কেমিস্ট্রি। ডায়াগনস্টিক্সের জন্য জিমসা স্টেইন ভিট্রো . পরিবেশক: cromakit.es
- রামিরেজ আই, মেজিয়া এম, গার্সিয়া দে লা রিভা জে, হার্মিস এফ এবং গ্রাজিওসো সি। কনজাংটিভাল স্মিয়ারে জিমসা এবং লেন্ড্রাম দাগের বৈধতা সনাক্তকরণের জন্য ক্ল্যামিডিয়া ট্র্যাকোমাটিস। সানিৎ পানাম বাটি। 1994; 116 (3): 212-216।
- Casas-Rincón G. General Mycology. 1994. ২য় এড। ভেনিজুয়েলার কেন্দ্রীয় বিশ্ববিদ্যালয়, লাইব্রেরি সংস্করণ। ভেনিজুয়েলা, কারাকাস
- «গিমসা স্টেনিং।» উইকিপিডিয়া, মুক্ত বিশ্বকোষ । ১ সেপ্টেম্বর, ২০১৭, ০১:০২ UTC। ৬ ডিসেম্বর, ২০১৮, en.wikipedia.org।