El terme "medi MIO" fa referència a un medi de cultiu conegut com a medi mineral mínim, que es basa en la composició de nutrients essencials per al creixement de microorganismes al laboratori. Aquest medi es va desenvolupar per proporcionar condicions ideals per al creixement i desenvolupament de bacteris, fongs i altres microorganismes en estudis científics. En aquest article, parlarem dels fonaments, la preparació i els principals usos del medi MIO en microbiologia.
Quin és l'ús del mitjà Mio per cuinar i preparar begudes?
El Mio medium és un ingredient versàtil que es pot utilitzar de diverses maneres en la cuina i la preparació de begudes. Creat el 2011 per Kraft Foods, el Mio medium és un concentrat líquid que afegeix sabor i color als plats i begudes.
A la cuina, la salsa Mio es pot utilitzar per donar un toc especial a marinades, salses, sopes i fins i tot postres. La seva practicitat i versatilitat la converteixen en un element indispensable a la cuina de xefs i amants del menjar.
En la preparació de begudes, Mio s'utilitza àmpliament per aromatitzar aigua, sucs, tes i fins i tot begudes alcohòliques. Amb només unes gotes, podeu transformar una simple beguda en una experiència sensorial única.
Mio també es pot utilitzar per crear postres creatives i delicioses, com ara gelats, gelatines i mousses. La seva varietat de sabors permet explorar diferents combinacions i sorprendre el paladar.
En resum, Mio és un aliat per a xefs i cambrers a l'hora de crear plats i begudes deliciosos i creatius. La seva practicitat i versatilitat el converteixen en un ingredient indispensable a qualsevol cuina o bar. Prova-ho i descobreix les infinites possibilitats que Mio t'ofereix!
Ús de la prova d'indol en la identificació de bacteris: procediment i importància en microbiologia.
La prova de l'indol és un mètode utilitzat per identificar bacteris basat en la producció de l'enzim indol. Aquest enzim és capaç de metabolitzar el triptòfan en indol, àcid acètic i amoníac. La tècnica es realitza en un medi de cultiu específic, com ara el medi d'indol, ornitina i motilitat (MIO), que s'utilitza per diferenciar els bacteris gramnegatius, com ara E. coli, d'altres espècies.
Per realitzar la prova d'indol, s'inocula un cultiu bacterià en medi MIO i s'incuba a una temperatura adequada. Després de la incubació, s'afegeix el reactiu de Kovacs, que reacciona amb l'indol produït pels bacteris, formant un complex rosat. La presència d'aquest color indica la producció d'indol i, en conseqüència, la presència de l'enzim responsable de la seva producció.
La prova d'indol és crucial en microbiologia perquè permet la identificació de bacteris basant-se en les seves característiques bioquímiques. A més, és un mètode ràpid i eficaç per diferenciar espècies bacterianes, cosa que ajuda en el diagnòstic d'infeccions i la selecció del tractament adequat.
Guia pas a pas per realitzar la prova d'indol de manera eficaç i precisa.
Per realitzar la prova d'indol de manera eficaç i precisa, seguiu aquests passos:
Pas 1: Prepareu el medi MIO segons les instruccions del fabricant. Assegureu-vos de seguir correctament les proporcions i les condicions d'esterilització.
Pas 2: Després de preparar el medi MIO, afegiu la mostra que voleu analitzar al tub d'assaig. Assegureu-vos que la mostra estigui ben barrejada.
Pas 3: Incubeu el tub d'assaig en condicions òptimes de temperatura i temps, tal com recomana el fabricant del medi MIO.
Pas 4: Després del període d'incubació, afegiu unes gotes de reactiu d'indol al tub d'assaig. Observeu atentament qualsevol canvi de color o formació d'anell a la superfície del medi.
Pas 5: Compareu els resultats obtinguts amb una taula d'interpretació dels resultats de la prova d'indol. Anoteu els resultats amb precisió i detall.
La prova de l'indol s'utilitza àmpliament en microbiologia per identificar bacteris capaços de produir indol a partir de l'aminoàcid triptòfan. És un mètode eficaç i precís per diferenciar diferents tipus de bacteris en funció de les seves característiques metabòliques.
Indol en microbiologia: definició i importància en la identificació de bacteris.
Indol en microbiologia: és un compost orgànic que pot ser produït per alguns bacteris durant el metabolisme dels aminoàcids. La capacitat d'un bacteri per produir indol pot ser un criteri important en la seva identificació i classificació.
Importància en la identificació de bacteris: La producció d'indol per part dels bacteris es pot detectar mitjançant proves bioquímiques específiques, com ara la prova de Kovacs. La presència o absència d'indol pot ajudar a diferenciar diferents gèneres i espècies bacterianes, cosa que ajuda a la identificació i classificació microbiològica.
Medi MIO: fonamentació, preparació i usos.
O Mig MIO (Indol-Ornithine Medium) és un medi de cultiu utilitzat per detectar la producció d'indol i la capacitat d'un bacteri per metabolitzar l'ornitina. Aquest medi conté nutrients específics que promouen el creixement de bacteris indol-positius.
Preparació del medi MIO: La preparació del medi MIO consisteix a combinar ingredients com ara peptona, clorur de sodi, extracte de llevat, agar-agar i altres components que proporcionen els nutrients necessaris per al creixement bacterià. A continuació, el medi s'esterilitza i se solidifica en plaques de Petri per al seu ús en proves d'identificació bacteriana.
Usos del medi MIO: El medi MIO s'utilitza habitualment en laboratoris de microbiologia per identificar bacteris en funció de la seva producció d'indol i del metabolisme de l'ornitina. Observant els resultats de les proves realitzades amb el medi MIO, els microbiòlegs poden classificar i diferenciar els bacteris en funció de les seves característiques bioquímiques.
Medi MIO: fonamentació, preparació i usos
O mig MIO és una prova bioquímica que s'utilitza per ajudar a identificar espècies bacterianes que pertanyen a la família Enterobacteriaceae. És altament nutritiva i consisteix en glucosa, extracte de llevat, peptona, tripteïna, clorhidrat de L-ornitina, porpra de bromocresol i agar.
El significat del seu acrònim (MIO) descriu cadascun dels paràmetres que es poden observar en aquest medi: motilitat, indol i ornitina. La motilitat és la capacitat del microorganisme per moure's per la presència de flagels. Perquè s'observi aquesta propietat, la consistència del medi ha de ser semisòlida, de manera que la preparació contingui menys agar.
La producció d'indol demostra la presència de l'enzim triptofanasa, que actua sobre l'aminoàcid triptòfan. Cal utilitzar un reactiu revelador per fer visible la producció d'indol.
Finalment, l'ornitina determina si el bacteri és capaç de descarboxilar l'aminoàcid, és a dir, si té l'enzim ornitina descarboxilasa.
Fundació
Peptona, extracte de llevat i triptina
Aquests elements contribueixen al valor nutricional d'aquest medi. Serveixen com a font de nutrients i aminoàcids essencials per al creixement bacterià.
A més, la tripteïna és una font de triptòfan per mostrar la presència de l'enzim triptofanasa, que degrada el triptòfan mitjançant una desaminació reductiva que allibera indol, àcid pirúvic, amoníac i energia.
L'indol és incolor, per la qual cosa la seva presència es revela mitjançant l'addició de cinc gotes de reactiu d'Ehrlich o de Kovacs, tots dos contenen p-dimetilaminobenzaldehid.
El grup aldehid d'aquest compost reacciona amb l'indol, generant un producte en forma d'anell de color vermell fúcsia a la superfície de l'agar.
Qualsevol rastre de color s'ha de considerar una prova positiva. La prova s'ha de llegir immediatament; a mesura que passa el temps, el color s'esvaeix.
D'altra banda, aquesta prova s'ha de revelar després de registrar els resultats de la motilitat i la descarboxilació de l'ornitina.
Interpretació
Prova positiva: formació d'un anell vermell fúcsia afegint gotes de reactiu de Kovacs.
Prova negativa: no hi ha formació d'anells.
Motilitat
La capacitat dels bacteris per moure's s'evidenciarà si s'observa un ambient ennuvolat o si hi ha una línia de creixement gruixuda que s'expandeix al voltant de la inoculació inicial.
Una prova de motilitat negativa s'evidenciarà per l'observació d'una fina línia de creixement, i tot el que l'envolta estarà sense creixement.
És important llegir la motilitat abans de revelar l'indol, ja que l'agregat de reactius desdibuixa tot el medi.
En bacteris mòbils però de creixement lent, és difícil demostrar la seva motilitat amb aquest medi. En aquest cas, es recomana l'ús d'altres proves o mètodes, com ara el medi de motilitat o el mètode de gota penjant.
Glucosa
La glucosa és el carbohidrat fermentable que, a més de proporcionar energia, acidifica el medi, una condició necessària per a la descarboxilació de l'aminoàcid ornitina.
La fermentació de la glucosa ha de produir-se sempre, basant-se en el principi que tots els bacteris que pertanyen a la família Enterobacteriaceae fermenten la glucosa.
L-Ornitina
Si els bacteris produeixen l'enzim ornitina descarboxilasa, aquest pot actuar tan bon punt el medi s'acidifica per la fermentació de la glucosa.
L'enzim ornitina descarboxilasa actua sobre el grup carboxil de l'aminoàcid, produint una amina anomenada putresina, que alcalinitza el medi de nou.
Aquesta prova s'ha de llegir després de 24 hores d'incubació, ja que si intenteu llegir-la abans, podeu malinterpretar la prova amb un fals negatiu.
Recordeu que la primera reacció que es produeix és la fermentació de la glucosa, de manera que el medi es torna groc inicialment (primeres 10 a 12 hores). Si la descarboxilació de l'ornitina es produeix més tard, el medi es tornarà porpra.
És important interpretar la prova de descarboxilació de l'ornitina abans de revelar l'indol, ja que l'agregat del reactiu de Kovacs canvia el color del medi.
Interpretació
Prova negativa: fons groc o groc mitjà.
Prova positiva: mig completament porpra.
indicador de pH
En aquest cas, s'utilitza el porpra de bromocresol; és l'encarregat de detectar canvis en el pH del medi. Quan s'acidifica, l'indicador es torna groc i, quan s'alcalina, es torna porpra.
Tècnica de sembra i desenvolupament
Per sembrar el medi MIO, s'utilitza una agulla o una nansa recta i es recull amb ella una porció de la colònia a estudiar.
Es fa una punció profunda a la vena cava anterior inferior mitjana en línia recta. No és recomanable realitzar una doble punció, ja que pot donar una falsa impressió de motilitat si les puncions no es realitzen al mateix lloc.
Incubar durant 24 a 48 hores a 37 °C aeròbicament. Observar els resultats en aquest ordre: motilitat, descarboxilació d'ornitina i finalment revelació d'indol.
És recomanable extreure asèpticament 2 ml del medi, transferir-lo a un tub estèril i realitzar la prova d'indol, de manera que si és negativa, la resta del tub original es pugui incubar durant 24 hores més, per revelar de nou l'indol.
El desenvolupament d'indol es realitza de la següent manera: s'afegeixen de 3 a 5 gotes de reactiu de Kovacs al medi MIO i s'agita vigorosament. Observeu si apareix o no un anell vermell fúcsia.
Preparació
La meitat del meu
Pesar 31 g de medi MIO i dissoldre'l en un litre d'aigua destil·lada.
Escalfeu fins que la mescla bulli durant un minut, remenant constantment fins que l'agar-agar es dissolgui completament. Dispensar 4 ml del medi en tubs d'assaig de 13/100 amb taps de cotó.
Esterilitzar en un autoclau a 121 °C durant 15 minuts. Treure de l'autoclau i deixar reposar sobre una reixeta per formar un bloc semisòlid.
Conservar a la nevera a 2-8 °C. Deixar refredar abans de sembrar la soca bacteriana.
El color del medi deshidratat és beix i el color del medi preparat és porpra lleugerament opalescent.
El pH final del medi preparat és de 6,5 ± 0,2
El medi es torna groc a pH àcid i porpra a pH alcalí.
Reactiu de Kovacs (revelador de la prova d'indol)
Aquest reactiu es prepara de la següent manera:
Es mesuren 150 ml d'alcohol amil, isoamil o butílic (qualsevol dels tres). Es dissolen 10 g de p-dimetilaminobenzaldehid. Posteriorment, s'afegeixen lentament 50 ml d'àcid clorhídric concentrat.
El reactiu preparat és incolor o groc clar. S'ha de guardar en una ampolla de color ambre i mantenir-se refrigerat. Un color marró fosc indica deteriorament.
El reactiu de Kovacs també es pot substituir pel reactiu d'Ehrlich. Aquest últim, en ser més sensible, es prefereix per detectar indol en bacteris que el produeixen en quantitats mínimes, com ara alguns bacils gramnegatius no fermentatius i alguns anaerobis.
Ús
Aquest medi és una prova que complementa una bateria de proves bioquímiques per a la identificació de bacteris pertanyents a la família Enterobacteriaceae.
Les dades de descarboxilació d'ornitina serveixen per diferenciar Shigella sonnei, que és positiu, de Shigella boydii, Shigella flexneri i S. dysenterieae, que són negatius.
També diferencia el gènere Klebsiella, que és negatiu, del gènere Enterobacter, on la majoria de les seves espècies són positives.
Control de qualitat
Cada vegada que es prepara un lot de medis MIO, es pot realitzar una prova de control. Per fer-ho, s'utilitzen soques conegudes o certificades per observar el comportament del medi.
Les soques que es poden utilitzar són Escherichia coli, Morganella morganii, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter aerogenes e Proteus mirabilis.
Els resultats esperats són E. coli i M. morganii. Donen M: +, I: + i O: +.
Klebsiella pneumoniae tot és negatiu (M: -, I: -, O :-). Proteus mirabilis e Enterobacter aerogens proporcioneu M: + I: – i O: +.
Referències
- Mac Faddin J. (2003). Proves bioquímiques per a la identificació de bacteris d'importància clínica. 3a ed. Editorial Panamericana. Buenos Aires, Argentina
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnòstic microbiològic de Bailey i Scott. 12a ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnòstic microbiològic 5a ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
- Laboratoris Britànics. MIO Medio 2015. Disponible a: britanialab.com
- Medi de motilitat indol ornitina (MIO) BBL de BD Laboratories. 2007. Disponible a: bd.com
- Medi MIO de Valtek Laboratories. Motilitat, indol, ornitina. 2010. Disponible a: andinamedica.com