Mikroskopie stěru je laboratorní postup používaný k analýze buněk a mikroorganismů přítomných v biologickém vzorku. Stěr se obvykle provádí ze vzorku krve, moči, vaginálního sekretu nebo jiného materiálu, který se nanese na podložní sklíčko a obarví pro snadné prohlížení pod mikroskopem.
Tato metoda se široce používá ve zdravotnictví k diagnostice různých onemocnění, jako jsou bakteriální, plísňové a virové infekce, a také k pomoci při monitorování léčby a sledování zdravotního stavu.
Existují různé typy mikroskopie stěru, jako je mikroskopie krevního stěru, která identifikuje krevní buňky a možné abnormality, a mikroskopie vaginálního stěru, používaná například k detekci gynekologických infekcí. Každý typ stěru vyžaduje specifickou přípravu vzorku a vhodnou barvicí techniku pro mikroskopickou vizualizaci.
Podrobný návod, jak správně a efektivně provést odběr vzorku.
Pro správné a efektivní provedení stěru je důležité dodržet několik jednoduchých kroků. Stěr je technika používaná v mikroskopii k přípravě vzorků buněk nebo tkání k mikroskopickému vyšetření. Níže naleznete podrobný postup provedení stěru:
Krok 1: Nejprve očistěte skleněnou čepel 70% alkoholem a nechte ji zcela uschnout. Ujistěte se, že na čepeli není prach ani žádné zbytky.
Krok 2: Dále vezměte vzorek, který chcete analyzovat, a umístěte malé množství na podložní sklíčko. Vzorek rovnoměrně rozetřete a vytvořte tenkou vrstvu.
Krok 3: S pomocí dalšího podložního sklíčka připravte nátěr. Sklíčko umístěte pod úhlem přibližně 45 stupňů a plynulými, rovnoměrnými pohyby jej posouvejte po vzorku.
Krok 4: Nechte nátěr několik minut schnout na vzduchu. Nefoukejte na sklíčko ani ho nezahřívejte, mohlo by dojít ke změně jeho vlastností.
Krok 5: Nakonec nátěr zafixujte methylalkoholem nebo jiným fixačním prostředkem. Před pozorováním pod mikroskopem nechte nátěr zcela zaschnout.
Dodržováním těchto jednoduchých kroků budete schopni správně provést roztěr a získat přesné výsledky mikroskopické analýzy vzorku. Nezapomeňte na důležitost správné techniky pro zajištění kvality získaných výsledků.
Jak by měl vypadat ideální nátěr?
Mikroskopie stěru je ve zdravotnictví široce používaný postup k analýze buněk přítomných v různých typech biologických vzorků. Aby byla analýza přesná, je nezbytné, aby stěr měl ideální vzhled se specifickými vlastnostmi, které usnadňují vizualizaci a identifikaci přítomných buněk.
Ideální nátěr by měl mít dobře rozložené a rovnoměrně rozmístěné buňky po celém sklíčku. Buňky by měly být neporušené, bez známek degenerace nebo ruptury. Barva nátěru by navíc měla být homogenní, aby umožňovala lepší vizualizaci buněčných struktur.
Buňky přítomné v nátěru musí být dobře konzervované a zachovat si své morfologické charakteristiky. To znamená, že buňky si musí zachovat svůj původní tvar a nesmí vykazovat významné změny, které by mohly bránit správné identifikaci.
Je důležité zdůraznit, že kvalita nátěru je nezbytná pro přesnou a spolehlivou analýzu. Proto je zásadní správně dodržovat postup přípravy nátěru a zajistit, aby všechny kroky byly provedeny správně.
Dodržováním těchto pokynů je možné získat přesnější a spolehlivější výsledky při mikroskopické analýze biologických vzorků.
Jak důležitý je stěr?
Nátěr je základní postup v mikroskopii. Zahrnuje přípravu vzorku k analýze pod mikroskopem, což umožňuje detailní vizualizaci buněk, mikroorganismů a dalších struktur. Význam nátěru spočívá právě v tom, že umožňuje pozorování prvků, které by pouhým okem nebyly viditelné.
Pro provedení nátěru musí být vzorek rovnoměrně a jemně rozetřen na podložní sklíčko, aby se zajistilo rovnoměrné rozložení buněk. Materiál se poté fixuje a obarví, aby se usnadnila identifikace struktur pod mikroskopem. Existují různé typy nátěrů, jako jsou krevní nátěry, nátěry sekretů a nátěry kultivačních vzorků.
Mikroskopie stěru lze mimo jiné použít k diagnostice různých onemocnění, identifikaci infekčních agens, posouzení kvality krevních buněk a monitorování léčby. Proto je mikroskopie stěru klíčovým krokem při provádění laboratorních testů a získávání důležitých informací o zdraví pacienta.
Bez nátěru by nebylo možné získat mnoho cenných informací, což by ohrozilo přesnost a účinnost laboratorních testů.
K čemu je jemný stěr a jak důležitý je pro zdraví žen?
Mikroskopické vyšetření stěru je důležitý postup v oblasti ženského zdraví, nezbytný pro diagnostiku různých onemocnění. Jedním z nejznámějších testů je tenký stěr, který zahrnuje odběr buněk z děložního čípku pro laboratorní analýzu.
Tenký stěr se používá především k detekci změn v buňkách děložního čípku, jako jsou prekancerózní a rakovinné léze. Tyto změny mohou být způsobeny lidským papilomavirem (HPV), jedním z hlavních rizikových faktorů pro rozvoj rakoviny děložního čípku.
Je důležité zdůraznit, že tenký stěr je preventivní vyšetření, které umožňuje identifikovat buněčné změny v jejich raných stádiích, což umožňuje efektivnější léčbu a zvyšuje šance na vyléčení. Vyšetření je navíc zásadní i pro sledování žen, u kterých již byly diagnostikovány cervikální léze.
Proto je nezbytné, aby ženy pravidelně podstupovaly tenký stěr z děložního čípku dle doporučení svého lékaře. Test je jednoduchý, bezbolestný a může zachránit životy, jelikož je základním nástrojem v prevenci rakoviny děložního čípku.
Mikroskopie stěru: postup, účel a typy
Krevní nátěr je diagnostický nástroj pro aktivní plicní tuberkulózu. Jedná se o laboratorní techniku, která umožňuje detekci a měření acidorezistentních bacilů, jako je Mycobacterium tuberculosis . Je to celosvětově nejrozšířenější metoda pro diagnostiku aktivní plicní tuberkulózy v komunitě a hodnocení přínosů léčby.
Plicní tuberkulóza je nakažlivé onemocnění způsobené bakterií Mycobacterium tuberculosis , které postihuje plíce, ale může postihnout i jiné orgány a systémy. Celosvětově trpí plicní tuberkulózou (TBC) více než 6 milionů lidí.
Mycobacterium tuberculosis a další netuberkulózní druhy Mycobacterium mají na buněčné stěně lipidový povlak bohatý na kyselinu mykolovou, který je po barvení bazickými barvivy odolný vůči změně barvy kyselým alkoholem.
Proto se používají speciální metody barvení, jako je Ziehl-Neelsenova metoda. Tyto jednoduché a levné metody umožňují buněčné stěně zadržet barvivo promytím vzorku kyselým roztokem a buněčná stěna Mycobacterium získá červené zbarvení na rozdíl od modré barvy jiných bakterií.
Pro odběr vzorku je nutné odebrat vzorek sputa, nejlépe ráno po probuzení. Lze použít i vzorky tkání nebo tělních tekutin.
proces
Vzorky určené k vyšetření stěrem jsou vzorky sputa, vzorky tkáně nebo vzorky tělních tekutin. Vzorky tkáně lze odebrat bronchoskopií nebo biopsií lymfatických uzlin či jiných tkání.
Protože tuberkulóza může postihnout jakýkoli orgán nebo systém, vzorky mohou být velmi rozmanité, mezi nimiž lze vyšetřit: vzorky moči, mozkomíšního moku, pleurální tekutiny, ascitické tekutiny, krve, hnisu z otevřených dutin, biopsií atd.
Vzorky z extrapulmonálních lézí by měly být také kultivovány. Vzorky sputa se odebírají ráno po výstupu.
Více vzorků lze odebrat postupně nebo v po sobě jdoucích dnech. Vzorky by měly být označeny v uzavřených nádobách se širokým hrdlem. Měly by obsahovat informace o pacientovi, typ vzorku a datum odběru.
Technický postup
Jakmile je vzorek získán, lze jej centrifugovat pro zakoncentrování nebo použít přímo. Prvním postupem je nanést několik kapek vzorku a rozetřít je na podložní sklíčko.
– Vzorek se pokryje filtrovaným fuchsinem (roztok barviva).
– Pak se zahřívá, dokud se neuvolní asi tři bělavé výpary.
– Počkejte pět minut, než vzorek vychladne, a pak jej promyjte vodou.
– Zakryjte bělicím roztokem (kyselý alkohol) po dobu 2 minut.
– Znovu se promyje vodou.
– Vzorek se pokryje methylenovou modří a nechá se jednu minutu stát.
– Omyje se vodou.
– Nechte uschnout na vzduchu a poté pokračujte v pozorování pod mikroskopem.
Tento postup je rychlý, jednoduchý, levný a umožňuje buňkám Mycobacterium tuberculosis obarvit se do červena . Tato technika se nazývá Ziehl-Neelsenova barvicí technika.
Mikroskopické pozorování spočívá v identifikaci přítomnosti acidorezistentních bacilů a jejich kvantifikaci v terénu.
Buňky Mycobacterium tuberculosis se jeví jako červené, zrnité, zakřivené tyčinky na modrém pozadí. Mohou být izolované, párové nebo shlukované. Pozorování by mělo být prováděno po jednotlivých polích a pro každý nátěr by mělo být vyšetřeno alespoň 100 polí.
Výsledek je považován za pozitivní, pokud je v každém poli více než 10 buněk M. tuberculosis . To odpovídá 5 000 až 100 000 bacilům na mililitr vzorku.
V těchto případech se výsledek považuje za pozitivní na Mycobacterium tuberculosis , protože netuberkulózní Mycobacterium nebo jiné kyselinovzdorné bakterie mají různé tvary a pozorovaná hodnota na políčko je obvykle menší než 10.
Osoba zkoumající vzorek musí mít zkušenosti nebo znalosti s detekcí a rozpoznáváním těchto mikroorganismů, protože výsledky mohou být falešně negativní nebo falešně pozitivní.
Existují i jiné fluoroskopické techniky, které jsou citlivější, ale mnohem dražší. Jedna taková technika využívá barvení auraminem-O k získání zelené fluorescence nebo barvení auraminem O/rhodaminem B k pozorování žluté/oranžové fluorescence.
Pozitivní případy se obvykle kultivují a provádí se antibiogram k potvrzení diagnózy a výběru vhodné léčby.
K čemu je baciloskopie?
Tuberkulóza je infekční onemocnění, které postihuje plíce a další orgány a orgánové soustavy těla. Je to nakažlivé onemocnění, které způsobuje vážné poškození dýchacího systému, a pokud není řádně léčeno, může vést k úmrtí.
Tuberkulóza se přenáší téměř výhradně vzduchem přenášeným sputem od pacienta nakaženého plicní tuberkulózou. Tyto drobné kapičky mohou přetrvávat ve vzduchu a nakazit osobu, která je vdechne.
K infekci je nutný dlouhodobý kontakt s nakaženým pacientem, který neustále vykašlává bacily ve špatně větraném prostředí. Lidé s imunodeficiencí jsou k infekci náchylnější.
Pacienti s HIV mají oproti běžné populaci vyšší pravděpodobnost rozvoje závažných respiračních infekcí, včetně plicní tuberkulózy. Proto je mikroskopie stěru důležitá jako rychlá a levná diagnostická metoda tuberkulózy.
Mikroskopické vyšetření stěru umožňuje bakteriologickou diagnózu tuberkulózy; pozitivní výsledek však musí být potvrzen dalšími vyšetřeními.
Mezi studie, které potvrzují diagnózu tuberkulózy, patří radiologická vyšetření, která ukazují charakteristické obrazy v horních lalocích plic, pozitivní tuberkulinové testy a pozitivní kultivační testy vzorků.
Negativní mikroskopie stěru
Negativní stěr nemusí nutně vyloučit diagnózu tuberkulózy, protože bacily nejsou odstraňovány konzistentně, zejména pokud je vzorkem sputum. Proto jsou v těchto případech, kdy existuje podezření na diagnózu, nutné sériové odběry vzorků.
Pozitivní baciloskopie
Pozitivní mikroskopický nález stěru sputa svědčí o tuberkulóze a měl by být potvrzen dalšími doplňkovými vyšetřeními. V případě pozitivního výsledku by měla být provedena kultivace a antibiogram.
Jakmile je léčba zavedena, umožňuje trvalý pokles stupnice pozitivity stěru až do negativních výsledků sledování přínosů léčby.
Odkazy
- Aziz, MA (2002). Externí hodnocení kvality mikroskopie AFB.
- Desikan, P. (2013). Mikroskopie sputa u tuberkulózy: je stále relevantní? Indický časopis lékařského výzkumu , 137 (3), 442.
- Fauci, A.S., Kasper, D.L., Hauser, S.L., Jameson, J.L., & Loscalzo, J. (2012). Harrisonovy principy interního lékařství (Sv. 2012). DL Longo (ed.). New York: McGraw-Hill.
- Ngabonziza, J.C.S., Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M., … a Muvunyi, C.M. (2016). Diagnostický výkon stěrové mikroskopie a přírůstkový výtěžek Xpert při detekci plicní tuberkulózy ve Rwandě. Infekční nemoci BMC , 16 (1), 660.
- Sardiñas, M., García, G., Rosários, MM, Díaz, R. a Mederos, LM (2016). Význam kontroly kvality baciloskopie v laboratořích provádějících diagnostiku tuberkulózy. Chilský časopis infekčních nemocí: oficiální časopis Chilské společnosti pro infekční nemoci , 33 (3), 282-286.
- Sequeira de Latini, MD, a Barrera, L. (2008). Manuál pro bakteriologickou diagnostiku tuberkulózy: standardy a technický průvodce: část 1 baciloskopie. č. Manuál pro bakteriologickou diagnostiku tuberkulózy: standardy a technická příručka: část 1, mikroskopie stěru sputa (pp. 64-64).