Sivelymikroskooppi on laboratoriomenetelmä, jota käytetään biologisessa näytteessä olevien solujen ja mikro-organismien analysointiin. Yleensä sivelynäyte tehdään veri-, virtsa-, emättimen erite- tai muusta materiaalista otetusta näytteestä, joka levitetään lasilevylle ja värjätään mikroskoopilla helppoa tarkastelua varten.
Tätä menetelmää käytetään laajalti terveydenhuollon alalla erilaisten sairauksien, kuten bakteeri-, sieni- ja virusinfektioiden, diagnosointiin sekä hoitojen ja terveydentilan seurannan apuna.
On olemassa erityyppisiä irtosolumikroskopioita, kuten verimikroskooppi, jolla tunnistetaan verisoluja ja mahdollisia poikkeavuuksia, ja emättimen irtosolumikroskopia, jota käytetään esimerkiksi gynekologisten infektioiden havaitsemiseen. Jokainen irtosolutyyppi vaatii tietynlaisen näytteenvalmistuksen ja sopivan värjäystekniikan mikroskooppista visualisointia varten.
Vaiheittainen opas näytteenoton suorittamiseen oikein ja tehokkaasti.
Jotta näytteenotto voidaan suorittaa oikein ja tehokkaasti, on tärkeää noudattaa muutamia yksinkertaisia ohjeita. Näytteenotto on mikroskopiassa käytetty tekniikka, jolla solu- tai kudosnäytteitä valmistellaan mikroskooppista tutkimusta varten. Katso vaiheittainen prosessi näytteenoton suorittamiseksi alta:
Vaihe 1: Puhdista ensin lasiterä 70-prosenttisella alkoholilla ja anna sen kuivua kokonaan. Varmista, että terässä ei ole pölyä tai jäämiä.
Vaihe 2: Ota seuraavaksi analysoitava näyte ja aseta pieni määrä lasilevylle. Levitä näyte tasaisesti ohueksi kerrokseksi.
Vaihe 3: Tee tahra toisen lasilevyn avulla. Aseta lasilevy noin 45 asteen kulmaan ja liu'uta sitä näytteen yli tasaisin, pehmein liikkein.
Vaihe 4: Anna näytteen kuivua ilmassa muutaman minuutin ajan. Vältä puhaltamista tai lämmittämistä, sillä se voi muuttaa näytettä.
Vaihe 5: Lopuksi kiinnitä tahra metanolilla tai muulla kiinnitysaineella. Anna sen kuivua kokonaan ennen kuin tutkit sitä mikroskoopilla.
Noudattamalla näitä yksinkertaisia ohjeita pystyt suorittamaan sivelynäytteen oikein ja saamaan tarkkoja tuloksia näytteen mikroskooppisessa analyysissä. Muista oikean tekniikan merkitys tulosten laadun varmistamiseksi.
Miltä ihanteellinen tahranpoistoaine tulisi näyttää?
Sivelynäytteiden mikroskopia on laajalti käytetty menetelmä terveydenhuollossa erityyppisissä biologisissa näytteissä olevien solujen analysoimiseksi. Jotta analyysi olisi tarkka, on tärkeää, että sivelynäytteellä on ihanteellinen ulkonäkö ja erityisominaisuudet, jotka helpottavat läsnä olevien solujen visualisointia ja tunnistamista.
Ihanteellisessa preparaattinäytteessä solujen tulisi olla tasaisesti jakautuneita ja jakautuneita objektilasin pinnalle. Solujen tulisi olla ehjiä, ilman rappeutumisen tai repeämisen merkkejä. Lisäksi preparaatin värin tulisi olla tasainen, mikä mahdollistaa solurakenteiden paremman visualisoinnin.
Kastenäytteessä olevien solujen on oltava hyvin säilyneitä ja niiden on säilytettävä morfologiset ominaisuutensa. Tämä tarkoittaa, että solujen on säilytettävä alkuperäinen muotonsa eikä niissä saa olla merkittäviä muutoksia, jotka voisivat estää oikean tunnistamisen.
On tärkeää korostaa, että näytteen laatu on olennaista tarkan ja luotettavan analyysin kannalta. Siksi on ratkaisevan tärkeää noudattaa näytteen valmistusohjeita oikein ja varmistaa, että kaikki vaiheet suoritetaan oikein.
Näitä ohjeita noudattamalla on mahdollista saada tarkempia ja luotettavampia tuloksia biologisten näytteiden mikroskooppisessa analyysissä.
Kuinka tärkeä tahranpoisto on?
Sivelynäytteen ottaminen on mikroskopian perusmenetelmä. Se sisältää näytteen valmistelun mikroskoopilla tehtävää analyysiä varten, mikä mahdollistaa solujen, mikro-organismien ja muiden rakenteiden yksityiskohtaisen visualisoinnin. Sivelynäytteen merkitys piilee juuri siinä, että se mahdollistaa sellaisten elementtien havaitsemisen, jotka eivät olisi näkyvissä paljaalla silmällä.
Sivelynäytteen suorittamiseksi näyte on levitettävä tasaisesti ja varovasti lasilevylle varmistaen, että solut jakautuvat tasaisesti. Sitten materiaali kiinnitetään ja värjätään, jotta rakenteet voidaan tunnistaa mikroskoopilla. Sivelynäytteitä on erityyppisiä, kuten verinäytteitä, eritenäytteitä ja viljelynäytteitä.
Sivelymikroskooppia voidaan käyttää erilaisten sairauksien diagnosointiin, tartuntatautien tunnistamiseen, verisolujen laadun arviointiin ja hoitojen seurantaan muiden sovellusten ohella. Siksi sivelymikroskopia on ratkaiseva vaihe laboratoriokokeiden suorittamisessa ja tärkeiden tietojen saamisessa potilaan terveydestä.
Ilman tahranäytettä ei voitaisi saada paljon arvokasta tietoa, mikä vaarantaisi laboratoriokokeiden tarkkuuden ja tehokkuuden.
Mihin hieno tahra on tarkoitettu ja kuinka tärkeä se on naisten terveydelle?
Kohdunkaulan solujen mikroskopia on tärkeä toimenpide naisten terveydessä ja välttämätön erilaisten sairauksien diagnosoinnissa. Yksi tunnetuimmista testeistä on ohut sivelynäytteen ottaminen, jossa soluja kerätään kohdunkaulasta laboratorioanalyysiä varten.
Ohutkoenäytteellä havaitaan ensisijaisesti kohdunkaulan solujen muutoksia, kuten syöpää edeltäviä ja syöpäisiä muutoksia. Nämä muutokset voivat johtua ihmisen papilloomaviruksesta (HPV), joka on yksi kohdunkaulan syövän kehittymisen tärkeimmistä riskitekijöistä.
On tärkeää korostaa, että ohut limakalvonäyte on ennaltaehkäisevä tutkimus, jonka avulla voidaan tunnistaa solumuutokset niiden varhaisessa vaiheessa, mikä mahdollistaa tehokkaamman hoidon ja lisää paranemismahdollisuuksia. Lisäksi tutkimus on olennainen myös seurattaessa naisia, joilla on jo diagnosoitu kohdunkaulan leesioita.
Siksi on tärkeää, että naiset käyvät säännöllisesti ohutnäytteessä lääkärin ohjeiden mukaisesti. Testi on yksinkertainen, kivuton ja voi pelastaa ihmishenkiä, koska se on keskeinen työkalu kohdunkaulan syövän ehkäisyssä.
Smear-mikroskopia: menettely, tarkoitus ja tyypit
Verinäytteestä tehdään diagnostinen työ aktiivisen keuhkotuberkuloosin havaitsemiseksi. Se on laboratoriotekniikka , jonka avulla voidaan havaita ja mitata haponkestäviä basilleja, kuten Mycobacterium tuberculosis . Se on maailman käytetyin menetelmä aktiivisen keuhkotuberkuloosin diagnosointiin yhteisössä ja hoidon hyötyjen arviointiin.
Keuhkotuberkuloosi on Mycobacterium tuberculosis -bakteerin aiheuttama tarttuva tauti , joka tarttuu keuhkoihin, mutta voi vaikuttaa myös muihin elimiin ja järjestelmiin. Maailmanlaajuisesti yli 6 miljoonaa ihmistä sairastaa keuhkotuberkuloosia (TB).
Mycobacterium tuberculosis -bakteerilla ja muilla ei-tuberkuloosisilla Mycobacterium- lajeilla on soluseinässä lipidipinnoite, joka on runsaasti mykolihappoa sisältävä ja kestää värjäytymistä happamalla alkoholilla emäksisillä väriaineilla värjäyksen jälkeen.
Siksi käytetään erityisiä värjäysmenetelmiä, kuten Ziehl-Neelsen-menetelmää. Nämä yksinkertaiset ja edulliset menetelmät mahdollistavat värjäyksen säilyttämisen soluseinässä pesemällä näytteen happamalla liuoksella, jolloin Mycobacterium- soluseinä saa punaisen värin, toisin kuin muiden bakteerien sininen väri.
Näytepuikko vaatii yskösnäytteen, joka on mieluiten kerättävä aamulla heräämisen jälkeen. Myös kudos- tai ruumiinnestenäytteitä voidaan käyttää.
prosessi
Sivelymikroskooppia varten käsiteltävät näytteet ovat yskösnäytteitä, kudosnäytteitä tai ruumiinnestenäytteitä. Kudosnäytteitä voidaan ottaa bronkoskopialla tai imusolmukkeiden tai muiden kudosten biopsialla.
Koska tuberkuloosi voi vaikuttaa mihin tahansa elimeen tai järjestelmään, näytteet voivat olla hyvin erilaisia. Tutkittavia näytteitä ovat esimerkiksi virtsanäytteet, aivo-selkäydinneste, pleuraneste, askitesneste, veri, avoonteloiden märkä, koepalat jne.
Myös keuhkojen ulkopuolisista leesioista otetut näytteet tulee käsitellä viljelyä varten. Yskösnäytteet kerätään nousun jälkeisenä aamuna.
Useita näytteitä voidaan kerätä peräkkäin tai peräkkäisinä päivinä. Näytteet tulee merkitä suljettaviin, leveäsuisiin astioihin. Niissä tulee olla potilastiedot, näytetyyppi ja keräyspäivämäärä.
Tekninen menettely
Kun näyte on saatu, se voidaan sentrifugoida väkevöimiseksi tai käyttää suoraan. Ensimmäinen toimenpide on laittaa muutama tippa näytettä ja levittää ne lasilevylle.
– Näyte peitetään suodatetulla fuksiinilla (väriliuoksella).
– Sitten sitä kuumennetaan, kunnes se tuottaa noin kolme valkoista höyrypäästöä.
– Odota viisi minuuttia, että näyte jäähtyy, ja pese vedellä.
– Peitä valkaisuliuoksella (hapan alkoholi) kahden minuutin ajan.
– Se pestään uudelleen vedellä.
– Näyte peitetään metyleenisinillä ja annetaan seistä minuutin ajan.
– Se pestään vedellä.
– Anna sen kuivua ilmassa ja jatka mikroskoopilla tarkastelua.
Tämä menetelmä on nopea, yksinkertainen ja edullinen, ja sen avulla Mycobacterium tuberculosis -solut värjäytyvät punaiseksi . Tätä tekniikkaa kutsutaan Ziehl-Neelsen-värjäystekniikaksi.
Mikroskooppinen havainnointi koostuu haponkestävien basillien läsnäolon tunnistamisesta ja niiden kvantifioinnista kenttäkohtaisesti.
Mycobacterium tuberculosis -solut näkyvät punaisina, rakeisina, kaarevina sauvoina sinisellä taustalla. Ne voivat olla yksittäisiä, pareittain tai ryppäinä. Havainnointi on tehtävä kentillä, ja jokaista irtosolunäytettä varten on tutkittava vähintään 100 kenttää.
Tulosta pidetään positiivisena, kun kussakin kentässä on yli 10 M. tuberculosis -solua . Tämä vastaa 5 000–100 000 basillia millilitraa näytettä kohden.
Näissä tapauksissa sitä pidetään positiivisena Mycobacterium tuberculosis -bakteerin suhteen , koska ei-tuberkuloottisilla Mycobacterium-bakteereilla tai muilla happoresistenteillä bakteereilla on erilainen muoto ja kenttäkohtainen havaittu arvo on yleensä alle 10.
Näytettä tutkivalla henkilöllä on oltava kokemusta tai tietoa näiden mikro-organismien havaitsemisesta ja tunnistamisesta, koska tuloksissa voi olla vääriä negatiivisia tai positiivisia.
On olemassa muitakin fluoroskooppisia tekniikoita, jotka ovat herkempiä mutta paljon kalliimpia. Yksi tällainen tekniikka käyttää auramiini-O-värjäystä vihreän fluoresenssin saamiseksi tai auramiini-O/rodamiini B -värjäystä keltaisen/oranssin fluoresenssin havaitsemiseksi.
Positiiviset tapaukset viljelytetään yleensä ja tehdään antibioottikuvaus diagnoosin ja asianmukaisen hoidon valinnan varmistamiseksi.
Mihin bacilloskopiaa käytetään?
Tuberkuloosi on tartuntatauti, joka vaikuttaa keuhkoihin ja muihin elimiin ja elinjärjestelmiin. Se on tarttuva tauti, joka aiheuttaa vakavia vaurioita hengityselimille ja voi hoitamattomana johtaa kuolemaan.
Tuberkuloosi tarttuu lähes yksinomaan keuhkotuberkuloosiin sairastuneelta potilaalta ilmateitse tarttuvan ysköksen välityksellä. Nämä pienet pisarat voivat jäädä ilmaan ja tartuttaa niitä hengittävän henkilön.
Infektio edellyttää pitkäaikaista kontaktia tartunnan saaneen potilaan kanssa, joka jatkuvasti yskii basilleja huonosti ilmastoidussa tilassa. Immuunipuutteiset ihmiset ovat alttiimpia infektioille.
HIV-potilailla on suurempi todennäköisyys sairastua vakaviin hengitystieinfektioihin, mukaan lukien keuhkotuberkuloosi, kuin väestöllä yleensä. Tästä syystä sivelymikroskooppi on tärkeä nopeana ja edullisena tuberkuloosin diagnostiikkamenetelmänä.
Sivelymikroskooppi mahdollistaa tuberkuloosin bakteriologisen diagnoosin; positiivinen tulos on kuitenkin varmistettava muilla tutkimuksilla.
Tuberkuloosidiagnoosia vahvistavia tutkimuksia ovat radiologiset tutkimukset, joissa näkyy tyypillisiä kuvia keuhkojen ylälohkoissa, positiiviset tuberkuliinitestit ja positiiviset näyteviljelyt.
Negatiivinen tahmamikroskopia
Negatiivinen limakalvonäyte ei välttämättä sulje pois tuberkuloosidiagnoosia, koska basilleja ei poisteta johdonmukaisesti, varsinkaan jos näyte on ysköstä. Siksi näissä tapauksissa, joissa diagnoosia epäillään, tarvitaan sarjanäytteitä.
Positiivinen bakilloskopia
Positiivinen ysköksen sivelynäytteen mikroskopiatulos viittaa tuberkuloosiin ja se tulee varmistaa muilla täydentävillä tutkimuksilla. Aina kun tulos on positiivinen, on tehtävä viljely ja antibioottikuvaus.
Kun hoito on vakiintunut, sivelykoe-positiivisuusasteikon pysyvä lasku, kunnes tulokset ovat negatiivisia, mahdollistaa hoidon hyötyjen seurannan.
Viitteet
- Aziz, MA (2002). AFB-mikroskopian ulkoinen laadunarviointi.
- Desikan, P. (2013). Onko ysköksen mikroskopia tuberkuloosissa edelleen ajankohtainen? Intialainen lääketieteellisen tutkimuksen aikakauslehti , 137 (3), 442.
- Fauci, A.S., Kasper, D.L., Hauser, S.L., Jameson, J.L. ja Loscalzo, J. (2012). Harrisonin sisätautien periaatteet (Vuosikerta 2012). DL Longo (toim.). New York: McGraw-Hill.
- Ngabonziza, J.C.S., Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M., … ja Muvunyi, C.M. (2016). Imunäytteen mikroskopia diagnostinen suorituskyky ja Xpertin lisäsaanto keuhkotuberkuloosin havaitsemisessa Ruandassa. BMC-tartuntataudit , 16 (1), 660.
- Sardiñas, M., García, G., Rosários, MM, Díaz, R. ja Mederos, LM (2016). Bacilloskopian laadunvalvonnan merkitys tuberkuloosidiagnostiikkaa suorittavissa laboratorioissa. Chilen tartuntatautien aikakauslehti: Chilen tartuntatautiyhdistyksen virallinen aikakauslehti , 33 (3), 282-286.
- Sequeira de Latini, MD, & Barrera, L. (2008). Tuberkuloosin bakteriologisen diagnostiikan käsikirja: standardit ja tekninen opas: osa 1, bakilloskopia. Nro. Tuberkuloosin bakteriologisen diagnostiikan käsikirja: standardit ja tekninen opas: osa 1 ysköksen sivelynäytteen mikroskopia (s. 64-64).