Az MRS agar egy szelektív és differenciáló táptalaj, amelyet a Lactobacillus csoportba tartozó tejsavbaktériumok izolálására és tenyésztésére használnak. De Man, Rogosa és Sharpe fejlesztette ki 1960-ban, és egy specifikus tápanyagbázisból áll, amely elősegíti ezen baktériumok növekedését más mikroorganizmusokkal szemben. Elkészítése magában foglalja a por desztillált vízben való feloldását és autoklávozással történő sterilizálását. Az MRS agart széles körben használják az élelmiszer-mikrobiológiában, a tejiparban, a fermentációban és a biokémiában ipari és klinikai jelentőségű tejsavbaktériumok azonosítására és mennyiségi meghatározására.
Keltse fel Mrs. Merck figyelmét ezekkel a gyors és hatékony tippekkel.
Ha fel szeretnéd kelteni Mrs. Merck figyelmét, jó helyen jársz. Ezekkel a gyors és hatékony tippekkel hatékonyan felkeltheted a figyelmét. Ennek egyik módja a MRS Agar használata, egy hatékony eszköz, amely segíthet kitűnni a tömegből.
MRS Agar: Alapozás, Elkészítés és Felhasználás
Az MRS agar egy szelektív táptalaj, amelyet a Lactobacillus csoportba tartozó tejsavbaktériumok izolálására és tenyésztésére használnak. De Man, Rogosa és Sharpe fejlesztette ki 1960-ban, és azóta széles körben használják a mikrobiológiai laboratóriumokban.
Az MRS agar elkészítéséhez néhány egyszerű lépést kell követnie. Először adja a megfelelő mennyiségű MRS agar port desztillált vízhez, és melegítse addig, amíg teljesen fel nem oldódik. Ezután sterilizálja a táptalajt autoklávban, és öntse Petri-csészékbe, hogy megszilárduljon.
Az MRS agar széles körben felhasználható, beleértve a tejsavbaktériumok kimutatását és izolálását tejtermékekben, például sajtban és joghurtban. Használható a bélmikrobiota és annak az emberi egészségre gyakorolt hatásainak vizsgálatára is.
Most, hogy többet tud az MRS Agarról és annak használatáról, készen áll arra, hogy felkeltse Mrs. Merck figyelmét. Ne felejtse el követni a fenti tippeket, és biztosan sikerrel jár.
MRS agar táptalaj Lactobacillus mikrobiológiai tenyésztéséhez.
Az MRS agar táptalaj egy szelektív táptalaj, amelyet a Lactobacillus nemzetségbe tartozó baktériumok mikrobiológiában történő tenyésztésére használnak. De Man, Rogosa és Sharpe fejlesztette ki 1960-ban, innen ered az MRS rövidítés. Ez a táptalaj számos összetevőből áll, amelyek biztosítják a kívánt baktériumok növekedéséhez szükséges tápanyagokat.
Az MRS agar táptalaj elkészítéséhez oldja fel az összetevőket desztillált vízben, és agar-agar hozzáadásával szilárdítsa meg a táptalajt. Sterilizálás után a táptalaj beoltható Lactobacillus kultúrával, és a baktériumok növekedéséhez megfelelő hőmérsékleten inkubálható.
Az MRS agar szelektív táptalaj, mivel olyan anyagokat tartalmaz, amelyek gátolják a nemkívánatos baktériumok növekedését, lehetővé téve, hogy csak a Lactobacillus nemzetségbe tartozó baktériumok növekedjenek. Ez megkönnyíti ezen baktériumok izolálását és azonosítását vegyes mintában.
Az MRS agar táptalaj széles körben felhasználható, és széles körben alkalmazzák az élelmiszer-mikrobiológiában, a probiotikumokban és a bélrendszeri egészségügyi vizsgálatokban. A Lactobacillus szelektív növekedésének elősegítésére való képessége miatt ez a táptalaj elengedhetetlen az ezekkel a baktériumokkal kapcsolatos kutatásokhoz és laboratóriumi vizsgálatokhoz.
MRS táptalaj: alapjai és alkalmazásai a mikrobiológiában és a biotechnológiában.
Az MRS táptalaj egy szelektív és differenciáló táptalaj, amelyet a mikrobiológiában és a biotechnológiában használnak tejsavbaktériumok, különösen a Lactobacillus nemzetségbe tartozók tenyésztésére. Az MRS betűszó a "de Man, Rogosa és Sharpe" rövidítése, tisztelettel azokra a kutatókra, akik az 1960-as évek elején kifejlesztették ezt a táptalajt.
Az MRS táptalaj olyan tápanyagok kombinációjából áll, amelyek elősegítik a tejsavbaktériumok növekedését, mint például a pepton, az élesztőkivonat, az ammónium-citrát, a magnézium-szulfát és a kálium-foszfát. Ezenkívül a táptalaj egy pH-indikátort is tartalmaz, általában fenolvöröst, amely lehetővé teszi számunkra, hogy megkülönböztessük a szénhidrátokat erjesztő és az azt nem erjesztő baktériumokat.
Az MRS táptalaj elkészítése magában foglalja a komponensek desztillált vízben való feloldását, a pH körülbelül 6,5-6,8-ra állítását, majd autoklávozással történő sterilizálást. A sterilizálás után agar-agar hozzáadásával megszilárdítják a táptalajt, így MRS agar táptalajjá válik.
Az MRS agart széles körben használják mikrobiológiai laboratóriumokban tejsavbaktériumok izolálására és azonosítására különféle erjesztett termékekben, például joghurtokban, sajtokban és húskészítményekben. Ezenkívül az MRS táptalajt biotechnológiai vizsgálatokban is használják, enzimek, szerves savak és más, ipari szempontból érdekes vegyületek előállítására.
MRS Mikrobiológia: Mikrobiológiai elemzés szakértői a biztonság és a minőség biztosítása érdekében.
Az MRS Microbiologia mikrobiológiai elemzésre specializálódott, biztosítva a termékbiztonságot és -minőséget. Magasan képzett szakembereivel és korszerű berendezéseivel az MRS Microbiologia kiváló minőségű szolgáltatásokat kínál a különböző ipari szektorok számára.
Az MRS mikrobiológiában az egyik legszélesebb körben használt táptalaj az MRS agar. Ezt a táptalajt De Man, Rogosa és Sharpe fejlesztette ki az 1960-as években, és széles körben használják tejsavbaktériumok, különösen a Lactobacillus nemzetségbe tartozók izolálására és tenyésztésére.
Az MRS agar elkészítése viszonylag egyszerű, a port desztillált vízben kell feloldani, majd autoklávozással sterilizálni. Miután a táptalaj megszilárdul, készen áll a minták elemzésére.
Az MRS agart különféle mikrobiológiai vizsgálatokban használják, például tejsavbaktériumok számának meghatározására tejtermékekben, fermentációk minőségének értékelésére és probiotikus baktériumok azonosítására. Speciális összetétele kedvez a kívánt baktériumok növekedésének, így szelektív és differenciáló táptalajjá teszi.
Röviden, az MRS Agar nélkülözhetetlen eszköz az MRS Microbiologia mikrobiológiai szakemberei számára, biztosítva ügyfeleik számára a pontos és megbízható elemzéseket. Szilárd alapjaival, egyszerű elkészítésével és sokoldalú felhasználási lehetőségeivel az MRS Agar nélkülözhetetlen szövetséges a mikrobiológiai termékek minőségellenőrzésében.
MRS Agar: Alapozás, Elkészítés és Felhasználás
O MRS agar egy szelektív szilárd táptalajtú kultúra, amelyet tejsavbaktériumok, különösen a Lactobacillus nemzetség izolálására és számlálására használnak. Ezt az agar-agart 1960-ban Man, Rogosa és Sharpe alkotta meg, ugyanazon a néven, de összetettsége miatt gyakran az MRS rövidítést használják.
Fehérjepeptonból, húskivonatból, élesztőkivonatból, glükózból, szorbitán-monoleátból, dikálium-foszfátból, nátrium-acetátból, ammónium-citrátból, magnézium-szulfátból, mangán-szulfátból és agar-agarból áll.
Ez az összetétel lehetővé teszi a tejsavbaktériumok megfelelő fejlődését olyan klinikai mintákban, mint a széklet, a hüvelyváladék, a szájüregi minták és az anyatej, valamint a tejtermékek és a húsok.
Klinikai laboratóriumokban nem alkalmazzák rutinszerűen, mivel a tejsavbaktériumok ritkán vesznek részt kóros folyamatokban. Az élelmiszer-mikrobiológia területén azonban az MRS agart gyakrabban használják.
Másrészt ezt a közeget néhány kutatóközpont használja, amelyek célja a tejsavbaktériumok vizsgálata.
Fundacao
Az ember-, rogosa- és Sharpe-agar meglehetősen összetett összetételű. Az egyes összetevők funkciójának lebontásával megmagyarázható a működésének logikája.
A fehérjepepton, a húskivonat, az élesztőkivonat és a glükóz olyan tápanyagok, amelyek biztosítják a baktériumok növekedéséhez szükséges szenet, nitrogént, vitaminokat és ásványi anyagokat. Továbbá a glükóz az univerzális energiaforrás, amelyet a legtöbb táptalajban használnak.
Másrészt a tejsavbaktériumok növekedésének elősegítéséhez elengedhetetlen a Lactobacillus és rokon baktériumok anyagcseréjében esszenciális kofaktorok (kationok) jelenléte; ezek a vegyületek nátrium-, magnézium- és mangánsók.
Hasonlóképpen, a szorbitán-monoleát vagy poliszorbát 80 fontos zsírsavforrás, amikor tápanyagként felszívódik.
Továbbá a szorbitán-monooleát és az ammónium-citrát a kapcsolódó flóra, különösen a Gram-negatív baktériumok fejlődésének gátlásával fejti ki hatását, biztosítva az agar szelektív jellegét.
Végül az agar-agar adja a táptalaj szilárd állagát.
A Man Rogosa Sharpe agarnak más változatai is léteznek; az egyik ciszteinnel kiegészített (MRSc), amely nagyon hasznos a bifidobaktériumok és más mikroorganizmusok izolálására. Másrészt létezik egy neomicinnel, paromomicinnel, nalidixsavval és lítium-kloriddal kiegészített MRS táptalaj, amely különösen a tejtermékekben található bifidobaktériumok szelektív számlálására szolgál.
Készítmény
Mérjünk ki 68,25 grammot a dehidratált táptalajból, és oldjuk fel egy liter desztillált vízben. Hagyjuk állni 5 percig. A teljes feloldódáshoz közepes lángon, folyamatos keverés mellett melegítsük, és forraljuk 1-2 percig. Sterilizáljuk autoklávban 121°C-on 15 percig.
Az autoklávból kivéve hagyjuk pihenni néhány percig, majd még melegen osszuk szét steril Petri-csészékbe.
Hagyjuk megszilárdulni, majd fordítsuk meg a lemezeket, rendezzük el a vérlemezkéket, és felhasználásig tároljuk hűtőszekrényben. Használat előtt hagyjuk a lemezeket szobahőmérsékletűre melegedni.
A táptalaj pH-értékének 6,4 ± 0,2-nek kell lennie. Egyes kereskedelmi forgalomban kapható készítmények 5,5 és 5,9 közötti pH-értéket javasolnak.
A dehidratált táptalaj bézs, az elkészített táptalaj sötét borostyánszínű.
A dehidratált táptalajt és az előkészített lemezeket 2–8 °C-on kell tárolni.
alkalmazások
Az MRS agarlemezek felületileg is beolthatók (deplecióval vagy Drigalski-spatulával). Mélyen is beolthatók. A lemezeket 37°C-on, mikroaerofil környezetben (4% O 2 és 5-10% COXNUMX 2 ) 24-72 órán át.
A vetési módszert a kívánt célnak (izolálás vagy számlálás) megfelelően választják ki.
Telep jellemzői
A feltételezett Lactobacillus telepek fehéresen nőnek, és nyálkás vagy krémes megjelenésűek ezen az agaron. Később azonosítani kell őket.
Tejsavbaktériumok izolálása
Erre a célra felszíni vetést alkalmaznak. A bevetendő mintákhoz előzetes eljárás szükséges.
Anyatejminták esetében ajánlott 1 ml mintát 14.000 10 fordulat/perc sebességgel 900 percig centrifugálni a zsíros réteg eltávolítása érdekében. 100 µl-t el kell dobni, a fennmaradó XNUMX µl-t pedig az üledékben szuszpendálni és az MRS agar felületére önteni, ahol egyenletesen el kell osztani Drigalski-spatulával.
Székletminták esetén egy (1) gramm székletet kell lemérni és 9 ml steril 0,1%-os peptonos vízben homogenizálni, ami 1/10 hígításnak felel meg. Ezután sorozathígításokat kell készíteni, amíg megszerezhető végső hígítás 10 -4 .
Végül a 100 hígításból 10 μl-t -2 , 10 -3 e 10 -4 összegyűjtjük, és minden hígítást MRS agarra szélesztünk, egyenletesen elosztva Drigalski spatulával.
Tejsavbaktériumok száma
Ebben az esetben a vetést mélységben végzik.
Anyatejminták esetén 1 ml-t gyűjtenek és steril kúpos műanyag csőbe helyeznek. Körülbelül 40°C-on MRS agart adnak hozzá 25 ml végső térfogatban, homogén keveréket kapva. Ezután egyenletesen steril Petri-csészékbe öntik, és hagyják állni, amíg a polimerizáció meg nem történik.
Székletminták esetén a hígításokat a fent leírtak szerint készítjük el. Minden hígításból egy ml-t veszünk, és steril műanyag kúpos kémcsövekbe helyezzük. Olvadt MRS agart adunk hozzá 1 ml térfogat eléréséig.
Az egyes hígítások keverékét egyenletesen steril Petri-csészékbe öntjük. Végül hagyjuk pihenni, amíg a polimerizáció meg nem történik.
Kutatási szinten
A tejsavbaktériumok tanulmányozása napról napra egyre érdekesebbé válik; a kutatókat különösen érdekli az új törzsek feltárása és azok potenciálja starterkultúraként a tejtermelés standardizálásában, többek között.
Ebben az értelemben Alvarado és munkatársai (2007) MRS agart használtak egy olyan vizsgálathoz, amelyben izolálták, azonosították és jellemezték a hagyományos andoki füstölt venezuelai sajtban található tejsavbaktériumokat.
A sajtban Lactococcus és Lactobacillus nemzetségbe tartozó baktériumok jelenlétét találták, és arra a következtetésre jutottak, hogy az izolált törzsek keverékei alkalmasak kiindulási törzsként a pasztőrözött tejből készült sajtok gyártásához.
Másrészt Sánchez és munkatársai (2017) MRS agart használtak a tejsavbaktériumok jelenlétének vizsgálatára malacok emésztőrendszerében, hogy azokat natív probiotikumként használják az egészséges malacok termelékenységének növelésére.
Ezzel négy fajt sikerült izolálniuk: Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus brevis, Enterococcus hirae e Pediococcus pentosaceus.
Hasonlóképpen, Báez és munkatársai (2019) MRS agart használtak a probiotikus potenciállal rendelkező tejsavbaktériumok (LAB) és bifidobaktériumok vizsgálatára az anyatejben és a csecsemők székletében.
11 BAL-t és 3-at sikerült izolálniuk Bifidobacteriumok az anyatejben és 8 BAL és 2 Bifidobacteriumok ... a székleten Mindegyik megfelelt bizonyos paramétereknek, amelyek probiotikus aktivitású baktériumként minősítik őket.
A szerzők arra a következtetésre jutottak, hogy a kizárólag szoptatott csecsemők anyateje és széklete a probiotikus baktériumok természetes forrása.
Minőségellenőrzés
Az MRS agar minőségének felméréséhez kontrolltörzseket, például:
Lactobacillus fermentum ATCC 9338, Lactobacillus casei ATCC 393, Bifidobacterium bifidum ATCC 11863, Lactobacillus plantarum MKTA 8014, Lactobacillus lactis MKTA 19435, Pediococcus damnosus MKTA 29358, Escherichia cereus és Bacillus cereus .
A várt eredmény az első 6 baktérium kielégítő növekedése, míg E. coli e Bacilus teljesen le kell tiltani.
Hivatkozások
- Alvarado C, Chacón Z, Otoniel J, Guerrero B, López G. Tejsavbaktériumok izolálása, azonosítása és jellemzése egy venezuelai andoki kézműves füstölt sajtból. Használata kezdeti betakarításként. Cem (Maracaibo) 2007; 17 (3): 301-308. Elérhető: scielo.org.
- Sánchez H, Fabián F, Ochoa G, Alfaro Tejsavbaktériumok izolálása malacok emésztőrendszeréből. Veterinary Invest. Rev. Peru 2017; 28 (3): 730-736. Elérhető: scielo.org.
- Báez E, González G, Hernández G, López E, Mega M. Probiotikus potenciállal rendelkező tejsavbaktériumok és bifidobaktériumok vizsgálata anyatejben és csecsemők székletében az Acevedo településen, Miranda 2017. Alapképzési munka a bioanalitikai alapképzés megszerzéséhez a Carabobo Egyetemen, Venezuelában.
- Brit Laboratóriumi Agar MRS 2015. Elérhető: britanialab.com
- Wikipédia közreműködők. Ágar MRS Wikipédia, The Free Encyclopedia. 10. január 2018., 19:44 UTC. Elérhető: wikipedia.org Hozzáférés: 17. február 2019.
- Roy D. Táptalajok a bifidobaktériumok izolálására és számlálására tejtermékekben. Int J Food Microbiol, 200128; 69(3): 167-82.