A kenetmikroszkópia egy laboratóriumi eljárás, amelyet biológiai mintákban jelenlévő sejtek és mikroorganizmusok elemzésére használnak. A kenetet jellemzően vér-, vizelet-, hüvelyváladék- vagy más anyagmintából készítik, amelyet egy üveg tárgylemezre kennek, és megfestik, hogy mikroszkóp alatt könnyen látható legyen.
Ezt a módszert széles körben alkalmazzák az egészségügyben különféle betegségek, például bakteriális, gombás és vírusfertőzések diagnosztizálására, valamint a kezelések és az egészségügyi állapotok monitorozásának elősegítésére.
Különböző típusú kenetmikroszkópiák léteznek, például a vérkenet-mikroszkópia, amely a vérsejteket és az esetleges rendellenességeket azonosítja, valamint a hüvelyi kenetmikroszkópia, amelyet például nőgyógyászati fertőzések kimutatására használnak. Minden kenettípus speciális minta-előkészítést és megfelelő festési technikát igényel a mikroszkópos megjelenítéshez.
Lépésről lépésre útmutató a kenet helyes és hatékony elvégzéséhez.
A kenetvizsgálat helyes és hatékony elvégzéséhez fontos néhány egyszerű lépést követni. A kenetvizsgálat a mikroszkópiában alkalmazott technika, amely sejt- vagy szövetminták előkészítésére szolgál mikroszkópos vizsgálatra. Az alábbiakban lépésről lépésre bemutatjuk a kenetvizsgálat elvégzésének folyamatát:
1. lépés: Először tisztítsa meg az üvegpengét 70%-os alkohollal, és hagyja teljesen megszáradni. Győződjön meg arról, hogy a penge por- és egyéb maradványoktól mentes.
2. lépés: Ezután vegye ki az elemezni kívánt mintát, és helyezzen egy kis mennyiséget az üveg tárgylemezre. Egyenletesen terítse el a mintát, vékony réteget képezve.
3. lépés: Egy másik üveglemez segítségével készítse el a kenetet. Helyezze a lemezt körülbelül 45 fokos szögben, és egyenletes, sima mozdulatokkal csúsztassa a mintán.
4. lépés: Hagyja a kenetet néhány percig levegőn megszáradni. Kerülje a tárgylemezre fújást vagy melegítést, mert ez megváltoztathatja a mintát.
5. lépés: Végül fixálja a kenetet metil-alkohollal vagy más fixálószerrel. Hagyja teljesen megszáradni, mielőtt mikroszkóp alatt megvizsgálja.
Ezeket az egyszerű lépéseket követve helyesen elvégezheti a kenetvizsgálatot, és pontos eredményeket kaphat a minta mikroszkópos elemzése során. Ne feledje a megfelelő technika fontosságát a kapott eredmények minőségének biztosítása érdekében.
Hogyan kellene kinéznie az ideális kenetnek?
A kenetmikroszkópia széles körben alkalmazott eljárás az egészségügyben a különböző típusú biológiai mintákban jelenlévő sejtek elemzésére. Ahhoz, hogy az elemzés pontos legyen, elengedhetetlen, hogy a kenet ideális megjelenésű legyen, olyan specifikus jellemzőkkel, amelyek megkönnyítik a jelenlévő sejtek vizualizálását és azonosítását.
Egy ideális kenetben a sejteknek jól eloszlanak és egyenletesen helyezkednek el a tárgylemezen. A sejteknek épeknek kell lenniük, degeneráció vagy repedés jelei nélkül. Továbbá a kenet színének homogénnek kell lennie, hogy a sejtszerkezetek jobban láthatóvá váljanak.
A kenetben található sejteknek jól konzerváltnak kell lenniük, és meg kell őrizniük morfológiai jellemzőiket. Ez azt jelenti, hogy a sejteknek meg kell őrizniük eredeti alakjukat, és nem mutathatnak olyan jelentős elváltozásokat, amelyek akadályozhatják a helyes azonosítást.
Fontos hangsúlyozni, hogy a kenet minősége elengedhetetlen a pontos és megbízható elemzéshez. Ezért kulcsfontosságú a kenetkészítési eljárás helyes követése és az összes lépés helyes végrehajtása.
Ezen irányelvek betartásával pontosabb és megbízhatóbb eredményeket lehet elérni a biológiai minták mikroszkópos elemzése során.
Mennyire fontos a kenet?
A kenetvizsgálat alapvető eljárás a mikroszkópiában. Magában foglalja a minta előkészítését mikroszkópos elemzésre, lehetővé téve a sejtek, mikroorganizmusok és más struktúrák részletes vizualizálását. A kenetvizsgálat jelentősége éppen abban rejlik, hogy lehetővé teszi olyan elemek megfigyelését, amelyek szabad szemmel nem lennének láthatók.
Kenetvizsgálat elvégzéséhez a mintát egyenletesen és óvatosan kell elteríteni egy üveg tárgylemezen, ügyelve arra, hogy a sejtek egyenletesen oszoljanak el. Az anyagot ezután fixálják és festik, hogy megkönnyítsék a struktúrák mikroszkóp alatti azonosítását. Különböző típusú kenetvizsgálatok léteznek, például vérkenet, váladékkenet és tenyésztő kenet.
A kenetmikroszkópia számos betegség diagnosztizálására, fertőző ágensek azonosítására, vérsejtek minőségének felmérésére és a kezelések monitorozására használható, többek között. Ezért a kenetmikroszkópia kulcsfontosságú lépés a laboratóriumi vizsgálatok elvégzésében és a beteg egészségi állapotáról szóló fontos információk megszerzésében.
A kenet nélkül sok értékes információt nem lehetett volna megszerezni, ami veszélyeztette volna a laboratóriumi vizsgálatok pontosságát és hatékonyságát.
Mire jó a finom kenet, és mennyire fontos a nők egészsége szempontjából?
A kenetmikroszkópia fontos vizsgálat a női egészségügyben, elengedhetetlen a különféle betegségek diagnosztizálásához. Az egyik legismertebb vizsgálat a vékonyréteg-vizsgálat, amelynek során sejteket gyűjtenek a méhnyakból laboratóriumi elemzés céljából.
A vékony kenet elsősorban a méhnyaksejtekben bekövetkező változások, például a rákmegelőző és rákos elváltozások kimutatására szolgál. Ezeket az elváltozásokat a humán papillomavírus (HPV) okozhatja, amely a méhnyakrák kialakulásának egyik fő kockázati tényezője.
Fontos hangsúlyozni, hogy a vékonyréteg-vizsgálat egy megelőző vizsgálat, amely lehetővé teszi a sejtes elváltozások korai stádiumban történő azonosítását, lehetővé téve a hatékonyabb kezelést és növelve a gyógyulás esélyét. Továbbá a vizsgálat alapvető fontosságú a már diagnosztizált méhnyakelváltozásokkal rendelkező nők monitorozásában is.
Ezért elengedhetetlen, hogy a nők rendszeresen vékonyréteg-vizsgálaton vegyenek részt , az orvosuk ajánlása szerint. A vizsgálat egyszerű, fájdalommentes, és életet menthet, mivel alapvető eszköz a méhnyakrák megelőzésében.
Kenetmikroszkópia: eljárás, cél és típusok
A vérkenet a tüdőtuberkulózis aktív diagnózisának egyik eszköze. Ez egy laboratóriumi technika, amely lehetővé teszi a saválló baktériumok, például a Mycobacterium tuberculosis kimutatását és mérését . Ez a világon a legszélesebb körben használt módszer az aktív tüdőtuberkulózis diagnosztizálására a közösségben és a kezelés előnyeinek értékelésére.
A tüdőtuberkulózis egy Mycobacterium tuberculosis által okozott fertőző betegség , amely a tüdőt fertőzi meg, de más szerveket és rendszereket is érinthet. Világszerte több mint 6 millió ember szenved tüdőtuberkulózisban (TBC).
A Mycobacterium tuberculosis és más nem tuberkulózisos Mycobacterium fajok sejtfalán mikolsavban gazdag lipidbevonat található, amely bázikus festékekkel történő festés után ellenáll a savas alkohollal történő elszíneződésnek.
Ezért speciális festési módszereket alkalmaznak, például a Ziehl-Neelsen módszert. Ezek az egyszerű és olcsó módszerek lehetővé teszik, hogy a sejtfal megtartsa a festéket a minta savas oldattal történő mosásával, és a Mycobacterium sejtfala vörös színt kap, szemben a többi baktérium kék színével.
A kenetmintához köpetminta szükséges, amelyet lehetőleg reggel, ébredés után kell levenni. Szövet- vagy testnedvminták is használhatók.
folyamat
A kenetmikroszkópiához feldolgozandó minták köpetminták, szövetminták vagy testnedvminták. A szövetmintákat bronchoszkópiával vagy nyirokcsomók vagy más szövetek biopsziájával lehet eltávolítani.
Mivel a tuberkulózis bármely szervet vagy rendszert érinthet, a minták nagyon változatosak lehetnek, többek között a következők vizsgálhatók: vizeletminták, agy-gerincvelői folyadék, pleurális folyadék, ascites folyadék, vér, genny nyílt üregekből, biopsziák stb.
Az extrapulmonális elváltozásokból származó mintákat szintén fel kell dolgozni tenyésztéshez. A köpetmintákat a felszállás utáni reggelen kell gyűjteni.
Több minta is gyűjthető egymás után vagy egymást követő napokon. A mintákat zárt, széles szájú tartályokban kell címkézni. A címkéken fel kell tüntetni a beteg adatait, a minta típusát és a gyűjtés dátumát.
Műszaki eljárás
Miután a mintát megkaptuk, centrifugálható koncentrálás céljából, vagy közvetlenül felhasználható. A kezdeti eljárás az, hogy néhány csepp mintát helyezünk a tárgylemezre, és szétterítjük.
– A mintát szűrt fukszinnal (festékoldattal) vonják be.
– Ezután addig melegítik, amíg körülbelül három fehéres gőzkibocsátást nem produkál.
– Várjon öt percet, amíg a minta lehűl, majd mossa le vízzel.
– Fedje be fehérítő oldattal (savas alkohollal) 2 percig.
– Újra vízzel lemossák.
– A mintát metilénkékkel bevonják, és egy percig állni hagyják.
– Vízzel lemossák.
– Hagyja levegőn megszáradni, majd vizsgálja meg mikroszkóp alatt.
Ez az eljárás gyors, egyszerű, olcsó, és lehetővé teszi a Mycobacterium tuberculosis sejtek vörösre festődését . Ezt a technikát Ziehl-Neelsen festési technikának nevezik.
A mikroszkópos megfigyelés a saválló bacilusok jelenlétének azonosításából és mennyiségi meghatározásából áll.
A Mycobacterium tuberculosis sejtek kék háttér előtt vörös, szemcsés, görbe rudakként jelennek meg . Lehetnek izoláltak, párosak vagy csoportosultak. A megfigyelést mezőnként kell elvégezni, és kenetenként legalább 100 mezőt kell megvizsgálni.
Az eredményt pozitívnak tekintjük, ha minden mezőben több mint 10 M. tuberculosis sejt található . Ez milliliterenként 5000-100 000 bacilusnak felel meg.
Ezekben az esetekben a Mycobacterium tuberculosis pozitívnak tekinthető , mivel a nem tuberkulózisos Mycobacteriumok vagy más savrezisztens baktériumok eltérő formájúak, és a mezőnként megfigyelt érték általában kevesebb, mint 10.
A mintát vizsgáló személynek tapasztalattal vagy tudással kell rendelkeznie ezen mikroorganizmusok kimutatásában és felismerésében, mivel az eredményekben álnegatív vagy álpozitív eredmények is lehetnek.
Léteznek más, érzékenyebb, de sokkal drágább fluoroszkópiai technikák is. Az egyik ilyen technika az auramin-O festést használja a zöld fluoreszcencia eléréséhez, vagy az auramin-O/rodamin B festést a sárga/narancssárga fluoreszcencia megfigyeléséhez.
A pozitív eseteket általában tenyésztéssel és antibiotikum-vizsgálattal erősítik meg a diagnózist és a megfelelő kezelés kiválasztását.
Mire jó a bacilloszkópia?
A tuberkulózis egy fertőző betegség, amely a tüdőt és a test más szerveit és szervrendszereit érinti. Ez egy ragályos betegség, amely súlyos károsodást okoz a légzőrendszerben, és megfelelő kezelés hiányában halálhoz vezethet.
A tuberkulózis szinte kizárólag tüdőtuberkulózissal fertőzött beteg levegőben szálló köpetével terjed. Ezek az apró cseppek a levegőben maradhatnak, és megfertőzhetik a belélegző személyt.
A fertőzéshez hosszan tartó kapcsolat szükséges egy fertőzött beteggel, aki folyamatosan köpködi a baktériumokat rosszul szellőző környezetben. Az immunhiányos emberek hajlamosabbak a fertőzésre.
A HIV-fertőzött betegeknél nagyobb valószínűséggel alakulnak ki súlyos légúti fertőzések, beleértve a tüdőtuberkulózist is, mint az átlagnépességnél. Ezért fontos a kenetmikroszkópia, mint a tuberkulózis gyors és olcsó diagnosztikai módszere.
A kenetmikroszkópia lehetővé teszi a tuberkulózis bakteriológiai diagnózisának felállítását; a pozitív eredményt azonban más vizsgálatokkal kell megerősíteni.
A tuberkulózis diagnózisát megerősítő vizsgálatok közé tartoznak a tüdő felső lebenyében jellegzetes képeket mutató radiológiai vizsgálatok, pozitív tuberkulin tesztek és pozitív mintakultúrák.
Negatív kenetmikroszkópia
A negatív kenet nem feltétlenül zárja ki a tuberkulózis diagnózisát, mivel a bacilusokat nem távolítják el következetesen, különösen akkor, ha a minta köpet. Ezért ezekben az esetekben, amikor a diagnózis gyanúja merül fel, sorozatos mintákra van szükség.
Pozitív bacilloszkópia
A pozitív köpetmikroszkópos vizsgálat tuberkulózisra utal, és más kiegészítő vizsgálatokkal kell megerősíteni. Pozitív eredmény esetén tenyésztési és antibiotikum-vizsgálatot kell végezni.
A kezelés megkezdése után a kenetpozitivitási skála tartós csökkenése a negatív eredmények eléréséig lehetővé teszi a kezelés előnyeinek monitorozását.
Hivatkozások
- Aziz, MA (2002). Külső minőségértékelés az AFB mikroszkópiához.
- Desikan, P. (2013). A köpetmikroszkópia tuberkulózisban: még mindig releváns? Az Indiai Orvosi Kutatófolyóirat , 137 (3), 442.
- Fauci, A.S., Kasper, D.L., Hauser, S.L., Jameson, J.L. és Loscalzo, J. (2012). Harrison belgyógyászati alapelvei (2012. évfolyam). DL Longo (szerk.). New York: McGraw-Hill.
- Ngabonziza, J.C.S., Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M., … és Muvunyi, C.M. (2016). A kenetmikroszkópia diagnosztikai teljesítménye és az Xpert növekményes hozama a tüdőtuberkulózis kimutatásában Ruandában. BMC fertőző betegségek , 16 (1), 660.
- Sardiñas, M., García, G., Rosários, MM, Díaz, R. és Mederos, LM (2016). A bacilloszkópia minőségellenőrzésének fontossága a tuberkulózis diagnózisát végző laboratóriumokban. Chilei Fertőző Betegségek Lapja: a Chilei Fertőző Betegségek Társaságának hivatalos lapja , 33 (3), 282-286.
- Sequeira de Latini, MD, és Barrera, L. (2008). Kézikönyv a tuberkulózis bakteriológiai diagnosztikájához: szabványok és műszaki útmutató: 1. rész: bacilloszkópia. sz. A tuberkulózis bakteriológiai diagnosztikájához használt kézikönyv: szabványok és műszaki útmutató: 1. rész, köpetvizsgálat mikroszkóppal (64-64).