Bromofenol biru adalah pewarna sintetis yang banyak digunakan di laboratorium untuk mendeteksi asam nukleat dan protein. Pewarna ini berwarna biru dan larut dalam air dan alkohol. Pembuatannya melibatkan reaksi antara 2,4-dibromofenilhidrazida dan asam sulfat pekat.
Selain digunakan di laboratorium, bromofenol biru juga digunakan dalam industri makanan sebagai indikator pH dalam larutan asam dan basa. Namun, perlu diperhatikan bahwa pewarna ini memiliki sifat toksik dan harus ditangani dengan hati-hati, hindari kontak langsung dengan kulit dan selaput lendir.
Oleh karena itu, penting untuk mematuhi peraturan keselamatan saat menggunakan bromofenol biru dan membuang limbah yang terkontaminasi dengan benar. Toksisitasnya dapat menyebabkan iritasi pada kulit, mata, dan saluran pernapasan, sehingga APD yang tepat sangat penting saat menanganinya.
Panduan langkah demi langkah untuk menyiapkan larutan bromofenol biru dengan cara yang sederhana.
Bromofenol biru adalah indikator asam-basa yang banyak digunakan di laboratorium. Bromofenol biru merupakan senyawa kimia organik yang berubah warna tergantung pada pH larutan tempat bromofenol biru berada. Dalam artikel ini, kita akan membahas karakteristik bromofenol biru, cara menyiapkan larutan, kegunaannya, dan toksisitasnya.
Karakteristik bromofenol biru:
Bromofenol biru adalah pewarna yang warnanya berkisar dari kuning hingga biru, tergantung pada pH medium tempat zat tersebut ditemukan. Zat ini larut dalam air dan umumnya digunakan di laboratorium untuk menentukan pH suatu larutan.
Persiapan larutan bromofenol biru:
Untuk menyiapkan larutan bromofenol biru, ikuti langkah-langkah berikut:
1. Timbang 0,1 g bromofenol biru ke dalam labu ukur.
2. Tambahkan air suling hingga labu mencapai 100 mL.
3. Kocok larutan dengan baik untuk memastikan homogenitas.
Kegunaan bromofenol biru:
Bromofenol biru banyak digunakan di laboratorium sebagai indikator pH dalam larutan berair. Bromofenol biru dapat digunakan untuk mengidentifikasi apakah suatu larutan bersifat asam, basa, atau netral, tergantung pada warnanya.
Toksisitas bromofenol biru:
Bromofenol biru tidak dianggap sangat beracun, tetapi penting untuk menanganinya dengan hati-hati dan mengikuti semua tindakan pencegahan keselamatan saat menggunakannya di laboratorium. Jika terkena kulit atau mata, segera bilas dengan banyak air.
Singkatnya, bromofenol biru adalah indikator asam-basa serbaguna yang mudah disiapkan dan banyak digunakan di laboratorium. Penting untuk mengetahui karakteristik, metode penyiapan, penggunaan, dan langkah-langkah keamanannya saat menangani senyawa kimia ini.
Bromophenol blue: karakteristik, persiapan, penggunaan, toksisitas
O bromofenol biru Ini adalah zat kimia organik alami, dan karena tingkat kepatuhannya yang rendah terhadap nilai pH tertentu, ia digunakan untuk mengukur zat kimia. Dengan kata lain, ia berguna sebagai indikator pH.
Zat ini juga diklasifikasikan sebagai pewarna trifenilmetana. Senyawa trifenilmetana dan turunannya umumnya digunakan sebagai pewarna dalam industri makanan, farmasi, tekstil, dan percetakan, antara lain.
Indikator pH ini berwarna kuning pada pH ≤ 3 dan ungu-ungu pada pH ≥ 4,6. Oleh karena itu, rentang transisi visualnya berada di antara 3 dan 4,6.
Zat ini juga dikenal sebagai tetrabromophenol blue, tetapi nama ilmiahnya adalah 3,3,5,5-tetrabromophenol sulfonaphthalein; dan rumus kimianya, C 19 H 10 Br 4 O 5 S.
Indikator pH bromofenol biru memiliki toksisitas rendah terhadap kulit dan selaput lendir serta telah terbukti non-mutagenik. Saat ini, indikator ini digunakan dalam teknik pemisahan protein menggunakan elektroforesis gel poliakrilamid dan elektroforesis dua dimensi.
Ini digambarkan sebagai pewarna yang baik untuk digunakan in vivo dalam operasi terapeutik untuk mengekstraksi vitreus dan struktur kristal lainnya dari mata manusia. Teknik ini akan memfasilitasi visualisasi struktur-struktur ini selama operasi, memastikan ekstraksi yang tepat.
Características
Bromofenol biru adalah bubuk kristal berwarna jingga kecokelatan atau ungu kemerahan. Titik didihnya 279°C dan berat molekul 669,96 mol/L. Titik leburnya berkisar antara 270 hingga 273°C.
Persiapan
Biasanya, indikator pH ini digunakan pada konsentrasi 0,1%, dengan pelarut etil alkohol 20%, karena sedikit larut dalam air.
Namun, ada zat lain yang berfungsi sebagai pelarut, seperti asam asetat, metil alkohol, benzena, dan larutan alkali tertentu.
Untuk teknik elektroforesis digunakan konsentrasi (0,001%).
penggunaan
indikator pH
Ini adalah salah satu indikator pH yang paling sering digunakan di laboratorium kimia untuk titrasi asam-basa.
Pewarnaan dalam teknik elektroforesis
Bromotimol biru digunakan sebagai pewarna 0,001% dalam pemisahan protein menggunakan elektroforesis gel poliakrilamid (SDS-PAGE). Metodologi ini berguna untuk mengendalikan agregasi berbagai bahan baku protein dalam beberapa makanan olahan, seperti sosis.
0,05% bromofenol biru juga digunakan dalam teknik elektroforesis dua dimensi.
Kegunaan ini dimungkinkan karena pewarna bromofenol biru bermuatan dan bergerak dengan mudah di dalam gel, meninggalkan warna biru-ungu yang terlihat jelas. Lebih lanjut, zat ini bergerak jauh lebih cepat daripada protein dan molekul DNA.
Oleh karena itu, bromofenol biru sangat baik untuk menandai bagian depan, sehingga elektroforesis dapat dihentikan pada waktu yang tepat, tanpa risiko molekul yang ditemui dalam proses meninggalkan gel.
toksisitas
Toksisitas kontak langsung
Dalam hal ini, NFPA (National Fire Protection Association) mengklasifikasikan zat ini sebagai zat yang memiliki risiko kesehatan (1), mudah terbakar (0), dan reaktivitas (0). Artinya, zat ini memiliki risiko kesehatan yang rendah, dan bahkan tidak ada risiko pada dua aspek terakhir.
Ini merupakan iritasi kulit ringan. Jika terkena langsung, segera lepaskan pakaian yang terkontaminasi dan cuci dengan banyak air. Jika terkena selaput lendir, segera bilas. Jika orang yang terkena memakai lensa kontak, segera lepaskan dan cari pertolongan medis.
Jika terhirup, pertolongan pertama harus diberikan, seperti pernapasan buatan dan perhatian medis segera.
Jika tertelan secara tidak sengaja, usahakan untuk muntah dan berikan 200 ml air. Selanjutnya, korban harus dibawa ke pusat medis terdekat.
Studi genotoksisitas
Studi toksisitas genetik bromofenol biru dilakukan dengan berbagai metodologi, seperti teknik Ames Salmonella/mikrosom, uji limfoma tikus L5178Y TK+/-, uji mikronukleus tikus, dan uji rekombinasi mitosis dengan strain ragi. Saccharomyces cerevisiae D5 .
Penelitian telah mengungkapkan bahwa bromofenol biru tidak memiliki efek genotoksik. Dengan kata lain, pengujian menunjukkan tidak ada mutasi genetik, tidak ada aberasi kromosom, dan tidak ada kerusakan DNA primer.
Studi genotoksisitas diperlukan karena senyawa-senyawa yang secara struktural serupa telah menunjukkan efek mutagenik. Namun, kini diketahui bahwa efek-efek ini disebabkan oleh keberadaan pengotor mutagenik, dan bukan oleh senyawa itu sendiri.
Studi toksisitas histologis
Di sisi lain, Haritoglou et al. melakukan investigasi di mana mereka mengevaluasi efek pewarna vital baru in vivo jangka pendek untuk operasi intraokular. Salah satu pewarna yang diuji adalah bromofenol biru. Pewarna tersebut dilarutkan dalam larutan garam seimbang.
Para peneliti melakukan vitrektomi (pengambilan vitreous mata) pada 10 mata babi in vivo Mereka kemudian menyuntikkan pewarna ke dalam rongga dan membiarkannya selama 1 menit, lalu membilasnya dengan larutan garam. Mereka juga mewarnai kapsul lensa mata yang sama. Mata tersebut kemudian dipelajari menggunakan mikroskop cahaya dan elektron.
Dari semua pewarna yang dievaluasi, bromofenol biru menunjukkan respons terbaik, pewarnaan pada 2%, 1% dan 0,2% dan pada saat yang sama tanpa menyebabkan perubahan histologis yang menunjukkan toksisitas.
Oleh karena itu, ia muncul sebagai kandidat terbaik untuk digunakan pada manusia selama operasi retinovitreal, memfasilitasi visualisasi vitreous, membran epiretinal, dan membran pembatas internal.
Referensi
- "Bromofenol biru." Wikipedia, ensiklopedia bebas . 9 Mei 2019, 09:12 UTC. 24 Mei 2019, 20:57. Wikipedia.
- López L, Greco B, Ronayne P, Valencia E. ALAN [Internet]. September 2006 [dikutip 2019 Mei 24]; 56 (3): 282–287. Tersedia di: scielo.org.
- Echeverri N, Ortiz, Blanca L dan Caminos J. (2010). Analisis protein pada kultur tiroid primer.Jurnal Kimia Kolombia , 39 (3), 343-358. Diperoleh pada 24 Mei 2019, dari scielo.org.
- Lin GH, DJ Brusick. Studi mutagenisitas pada dua pewarna trifenilmetana, bromofenol biru dan tetrabromofenol biru. J Appl Toxicol. 1992 Agustus;12(4):267-74.
- Haritoglou C, Tadayoni R, May CA, Gass CA, Freyer W, Priglinger SG, Kampik A. Evaluasi jangka pendek in vivo pewarna vital baru untuk operasi intraokular. Retina 2006 Juli-Agustus;26(6):673-8.