מיקרוסקופיית מריחה היא הליך מעבדתי המשמש לניתוח תאים ומיקרואורגניזמים הנמצאים בדגימה ביולוגית. בדרך כלל, מריחה נעשית מדגימת דם, שתן, הפרשה נרתיקית או חומר אחר, אשר נמרחת על גבי זכוכית וצבועה לצפייה קלה תחת מיקרוסקופ.
שיטה זו נמצאת בשימוש נרחב בתחום הבריאות לאבחון מחלות שונות, כגון זיהומים חיידקיים, פטרייתיים ווירוסים, וכן לסיוע בניטור טיפולים ובמעקב אחר מצבים בריאותיים.
ישנם סוגים שונים של מיקרוסקופיית משטחים, כגון מיקרוסקופיית משטח דם, המזהה תאי דם וחריגות אפשריות, ומיקרוסקופיית משטחים נרתיקית, המשמשת לגילוי זיהומים גינקולוגיים, למשל. כל סוג של משטח דורש הכנת דגימה ספציפית וטכניקת צביעה מתאימה להדמיה מיקרוסקופית.
מדריך שלב אחר שלב לביצוע המריחה בצורה נכונה ויעילה.
כדי לבצע כתם בצורה נכונה ויעילה, חשוב לבצע מספר צעדים פשוטים. כתם היא טכניקה המשמשת במיקרוסקופיה להכנת דגימות תאים או רקמות לבדיקה מיקרוסקופית. ראה את התהליך שלב אחר שלב לביצוע כתם להלן:
שלב 1: ראשית, נקו את להב הזכוכית עם אלכוהול 70% ותנו לו להתייבש לחלוטין. ודאו שהלהב נקי מאבק או מכל שאריות.
שלב 2: לאחר מכן, קחו את הדגימה שברצונכם לנתח והניחו כמות קטנה על גבי שקופית הזכוכית. פזרו את הדגימה באופן שווה, וצרו שכבה דקה.
שלב 3: בעזרת זכוכית נוספת, הכינו את המריחה. הניחו את הגלאי בזווית של כ-45 מעלות והחלקו את הגלאי מעל הדגימה בתנועות חלקות ואחידות.
שלב 4: אפשרו למריחה להתייבש באוויר במשך מספר דקות. הימנעו מנפיחה או חימום של השקופית, שכן הדבר עלול לשנות את הדגימה.
שלב 5: לבסוף, יש לקבע את המריחה בעזרת מתיל אלכוהול או חומר מקבע אחר. יש לאפשר לה להתייבש לחלוטין לפני התבוננות בה תחת מיקרוסקופ.
על ידי ביצוע השלבים הפשוטים הללו, תוכלו לבצע את המריחה בצורה נכונה ולקבל תוצאות מדויקות בניתוח המיקרוסקופי של הדגימה. זכרו את חשיבות הטכניקה הנכונה כדי להבטיח את איכות התוצאות המתקבלות.
איך אמורה להיראות המריחה האידיאלית?
מיקרוסקופיית מריחה היא הליך נפוץ בתחום הבריאות לניתוח תאים הקיימים בסוגים שונים של דגימות ביולוגיות. כדי שהניתוח יהיה מדויק, חיוני שהמריחה תהיה בעלת מראה אידיאלי, עם מאפיינים ספציפיים המאפשרים את הדמיית התאים הקיימים וזיהוים.
משטח אידיאלי צריך להכיל תאים מפוזרים היטב ובמרווחים שווים על פני השקופית. התאים צריכים להיות שלמים, ללא סימני ניוון או קרע. יתר על כן, צבע המשטח צריך להיות הומוגני, מה שיאפשר ויזואליזציה טובה יותר של מבנים תאיים.
התאים הקיימים במריחה חייבים להישמר היטב ולשמור על מאפייניהם המורפולוגיים. משמעות הדבר היא שהתאים חייבים לשמור על צורתם המקורית ולא להציג שינויים משמעותיים שעלולים להפריע לזיהוי נכון.
חשוב להדגיש כי איכות המריחה חיונית לניתוח מדויק ואמין. לכן, חיוני לעקוב אחר הליך הכנת המריחה בצורה נכונה ולוודא שכל השלבים מבוצעים כהלכה.
על ידי ביצוע הנחיות אלה, ניתן להשיג תוצאות מדויקות ואמינות יותר בניתוח מיקרוסקופי של דגימות ביולוגיות.
כמה חשובה המריחה?
המריחה היא הליך בסיסי במיקרוסקופיה. היא כרוכה בהכנת דגימה לניתוח תחת מיקרוסקופ, המאפשרת ויזואליזציה מפורטת של תאים, מיקרואורגניזמים ומבנים אחרים. חשיבותה של המריחה טמונה דווקא בכך שהיא מאפשרת צפייה באלמנטים שלא יהיו גלויים לעין בלתי מזוינת.
כדי לבצע מריחה, יש לפזר את הדגימה באופן שווה ובעדינות על גבי זכוכית, תוך הקפדה על פיזור שווה של התאים. לאחר מכן החומר מקובע ונצבע כדי להקל על זיהוי המבנים תחת מיקרוסקופ. ישנם סוגים שונים של מריחה, כגון מריחות דם, מריחות הפרשה וממריחות תרבית.
מיקרוסקופיית מריחה יכולה לשמש לאבחון מחלות שונות, זיהוי גורמים זיהומיים, הערכת איכות תאי דם ומעקב אחר טיפולים, בין היתר. לכן, מיקרוסקופיית מריחה היא שלב מכריע בביצוע בדיקות מעבדה וקבלת מידע חשוב על בריאותו של המטופל.
ללא המריחה, לא ניתן היה להשיג מידע רב ערך, דבר שיפגע בדיוק וביעילות של בדיקות המעבדה.
למה מיועדת מריחה דקה וכמה היא חשובה לבריאות האישה?
מיקרוסקופיית משטחים היא הליך חשוב בבריאות האישה, חיוני לאבחון מחלות שונות. אחת הבדיקות הידועות ביותר היא משטח דק, הכולל איסוף תאים מצוואר הרחם לצורך ניתוח מעבדה.
משטח דק משמש בעיקר לגילוי שינויים בתאי צוואר הרחם, כגון נגעים טרום סרטניים וסרטניים. שינויים אלה יכולים להיגרם על ידי נגיף הפפילומה האנושי (HPV), אחד מגורמי הסיכון העיקריים להתפתחות סרטן צוואר הרחם.
חשוב להדגיש כי משטח דק הוא בדיקה מונעת המאפשרת זיהוי שינויים תאיים בשלבים מוקדמים, מה שמאפשר טיפול יעיל יותר ומגדיל את סיכויי הריפוי. יתר על כן, הבדיקה חיונית גם למעקב אחר נשים שכבר אובחנו עם נגעים בצוואר הרחם.
לכן, חיוני שנשים יעברו באופן קבוע בדיקת משטח דק , בהתאם להמלצת הרופא. הבדיקה פשוטה, אינה כואבת ויכולה להציל חיים, בהיותה כלי בסיסי במניעת סרטן צוואר הרחם.
מיקרוסקופיית מריחה: הליך, מטרה וסוגים
משטח דם הוא כלי אבחון לשחפת ריאתית פעילה. זוהי טכניקת מעבדה המאפשרת גילוי ומדידה של חיידקים חומציים, כגון Mycobacterium tuberculosis . זוהי השיטה הנפוצה ביותר בעולם לאבחון שחפת ריאתית פעילה בקהילה ולהערכת יתרונות הטיפול.
שחפת ריאתית היא מחלה מדבקת הנגרמת על ידי Mycobacterium tuberculosis , אשר מדביקה את הריאות, אך עלולה להשפיע על איברים ומערכות אחרים. ברחבי העולם, יותר מ-6 מיליון בני אדם סובלים משחפת ריאתית (TB).
ל-Mycobacterium tuberculosis ולמיני Mycobacterium אחרים שאינם נגועים בשחפת יש ציפוי ליפידי על דופן התא שלהם עשיר בחומצה מיקולית, העמיד בפני שינוי צבע עם אלכוהול חומצי לאחר צביעה בצבעים בסיסיים.
לכן, נעשה שימוש בשיטות צביעה מיוחדות, כגון שיטת זיהל-נילסן. שיטות פשוטות וזולות אלו מאפשרות לדופן התא לשמור על הצביעה על ידי שטיפת הדגימה בתמיסה חומצית, ודופן התא של Mycobacterium מקבלת צבע אדום בניגוד לצבע הכחול של חיידקים אחרים.
דגימת מקלון דורשת דגימת כיח, רצוי לאסוף בבוקר עם היקיצה. ניתן גם להשתמש בדגימות רקמות או נוזלי גוף.
תהליך
הדגימות שיעברו עיבוד למיקרוסקופיה של משטח הן דגימות כיח, דגימות רקמה או דגימות נוזלי גוף. ניתן לקחת דגימות רקמה באמצעות ברונכוסקופיה או באמצעות ביופסיה של בלוטות לימפה או רקמות אחרות.
מכיוון ששחפת יכולה להשפיע על כל איבר או מערכת, הדגימות יכולות להיות מגוונות מאוד, ביניהן ניתן לבדוק: דגימות שתן, נוזל מוחי שדרתי, נוזל פלאורלי, נוזל מיימת, דם, מוגלה מחללים פתוחים, ביופסיות וכו'.
יש לעבד גם דגימות מנגעים חוץ-ריאתיים לצורך תרבית. דגימות כיח נאספות בבוקר לאחר העלייה.
ניתן לאסוף מספר דגימות ברצף או בימים רצופים. יש לתייג את הדגימות במיכלים סגורים ורחבי פתח. עליהם לכלול את פרטי המטופל, סוג הדגימה ותאריך האיסוף.
הליך טכני
לאחר קבלת הדגימה, ניתן לצנטריפוגה לריכוזה או להשתמש בה ישירות. ההליך הראשוני הוא להטמיע כמה טיפות מהדגימה ולפרוס אותן על גבי שקופית.
– הדגימה מכוסה בפוקסין מסונן (תמיסת צבע).
– לאחר מכן הוא מחומם עד שהוא מייצר כשלוש פליטות אדים לבנבנות.
– המתינו חמש דקות עד שהדגימה תתקרר ושטפו במים.
– כסו בתמיסת הלבנה (אלכוהול חומצי) למשך 2 דקות.
– הוא נשטף שוב במים.
– הדגימה מכוסה בכחול מתילן ומניחה לעמוד למשך דקה אחת.
– הוא נשטף במים.
– הניחו לו להתייבש באוויר והמשיכו לתצפית תחת המיקרוסקופ.
הליך זה מהיר, פשוט, זול, ומאפשר לתאי Mycobacterium tuberculosis לצבוע באדום . טכניקה זו נקראת טכניקת צביעת Ziehl-Neelsen.
תצפית מיקרוסקופית מורכבת מזיהוי נוכחותם של חיידקים עמידים לחומצה וכימותם לפי שדה.
תאי Mycobacterium tuberculosis מופיעים כמוטות אדומים, גרגיריים ומעוקלים על רקע כחול. הם יכולים להיות מבודדים, מזווגים או מקובצים. יש לבצע את התצפית לפי שדה, ולבדוק לפחות 100 שדות עבור כל משטח.
התוצאה נחשבת חיובית כאשר ישנם יותר מ-10 תאים של M. tuberculosis בכל שדה . זה מקביל ל-5000 עד 100,00 חיידקים למיליליטר של דגימה.
במקרים אלה, התוצאה נחשבת חיובית ל- Mycobacterium tuberculosis , מכיוון של-Mycobacterium שאינו שחפתי או לחיידקים עמידים אחרים לחומצה יש צורות שונות והערך הנצפה לשדה הוא בדרך כלל פחות מ-10.
על האדם שבודק את הדגימה להיות בעל ניסיון או ידע בגילוי וזיהוי מיקרואורגניזמים אלה, מכיוון שייתכנו תוצאות שליליות או חיוביות שגויות בתוצאות.
ישנן טכניקות פלואורוסקופיות אחרות שהן רגישות יותר אך יקרות הרבה יותר. טכניקה אחת כזו משתמשת בצביעת אורמין-O כדי להשיג פלואורסצנציה ירוקה, או צביעת אורמין O/רודמין B כדי לצפות בפלואורסצנציה צהובה/כתומה.
מקרים חיוביים בדרך כלל עוברים תרבית ואנטיביוגרם מבוצע כדי לאשר את האבחנה ובחירת הטיפול המתאים.
למה מיועדת בצילוסקופיה?
שחפת היא מחלה זיהומית הפוגעת בריאות ובאיברים ומערכות איברים אחרות בגוף. זוהי מחלה מדבקת הגורמת נזק חמור למערכת הנשימה, שאם לא מטופלת כראוי, עלולה להוביל למוות.
שחפת מועברת כמעט אך ורק דרך כיח הנישא באוויר מחולה נגוע בשחפת ריאתית. טיפות זעירות אלו יכולות להישאר באוויר ולהדביק את האדם ששואף אותן.
זיהום דורש מגע ממושך עם חולה נגוע שמייח באופן מתמיד חיידקים בסביבה מאווררת בצורה גרועה. אנשים עם ליקויים חיסוניים נוטים יותר לזיהום.
חולי HIV נוטים יותר לפתח זיהומים חמורים בדרכי הנשימה, כולל שחפת ריאתית, בהשוואה לאוכלוסייה הכללית. מכאן חשיבותה של מיקרוסקופיית משטחים כשיטת אבחון מהירה וזולה לשחפת.
מיקרוסקופיית משטחים מאפשרת אבחון בקטריולוגי של שחפת; עם זאת, יש לאשר תוצאה חיובית באמצעות מחקרים אחרים.
מחקרים המאשרים את אבחנת השחפת כוללים בדיקות רדיולוגיות המציגות תמונות אופייניות באונות העליונות של הריאה, בדיקות טוברקולין חיוביות ותרביות דגימה חיוביות.
מיקרוסקופיית מריחה שלילית
משטח שלילי אינו בהכרח שולל אבחנה של שחפת, שכן חיידקי הגידול אינם מוסרים באופן עקבי, במיוחד כאשר הדגימה היא כיח. לכן, במקרים אלה, כאשר קיים חשד לאבחנה, נדרשות דגימות סדרתיות.
בצילוסקופיה חיובית
מיקרוסקופיה חיובית של משטח כיח מעידה על שחפת ויש לאשר זאת באמצעות בדיקות משלימות אחרות. בכל פעם שהתוצאה חיובית, יש לבצע תרבית ובדיקת אנטיביוגרם.
לאחר קביעת הטיפול, ירידה מתמשכת בסולם החיוביות של בדיקת המריחה עד לקבלת תוצאות שליליות מאפשרת ניטור יתרונות הטיפול.
הפניות
- עזיז, MA (2002). הערכת איכות חיצונית עבור מיקרוסקופיית AFB.
- דסיקן, פ. (2013). מיקרוסקופיית כיח בשחפת: האם זה עדיין רלוונטי? כתב העת ההודי למחקר רפואי , 137 (3), 442.
- Fauci, A.S., Kasper, D.L., Hauser, S.L., Jameson, J.L., & Loscalzo, J. (2012). עקרונות הרפואה הפנימית של הריסון (כרך 2012). ד.ל. לונגו (עורך). ניו יורק: מקגרו-היל.
- Ngabonziza, J.C.S., Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M., … and Muvunyi, C.M. (2016). ביצוע אבחון של מיקרוסקופ מריחות ותשואה מצטברת של Xpert בגילוי שחפת ריאתית ברואנדה. מחלות זיהומיות של BMC , 16 (1), 660.
- Sardiñas, M., García, G., Rosários, MM, Díaz, R. and Mederos, LM (2016). חשיבות בקרת האיכות של בקילוסקופיה במעבדות המבצעות אבחון שחפת. כתב העת הצ'יליאני למחלות זיהומיות: כתב העת הרשמי של האגודה הצ'יליאנית למחלות זיהומיות , 33 (3), 282-286.
- Sequeira de Latini, MD, & Barrera, L. (2008). מדריך לאבחון בקטריולוגי של שחפת: סטנדרטים ומדריך טכני: חלק 1 של בקילוסקופיה. מס' מדריך לאבחון בקטריולוגי של שחפת: סטנדרטים ומדריך טכני: חלק 1 מיקרוסקופיית משטח כיח (עמ '64-64).