Istilah "MIO Medium" merujuk kepada medium kultur yang dikenali sebagai Minimal Mineral Medium, yang berasaskan komposisi nutrien penting untuk pertumbuhan mikroorganisma di dalam makmal. Medium ini dibangunkan untuk menyediakan keadaan yang ideal untuk pertumbuhan dan perkembangan bakteria, kulat, dan mikroorganisma lain dalam kajian saintifik. Dalam artikel ini, kita akan membincangkan asas, penyediaan dan kegunaan utama Medium MIO dalam mikrobiologi.
Apakah kegunaan medium Mio dalam memasak dan menyediakan minuman?
Mio medium adalah bahan serba boleh yang boleh digunakan dalam pelbagai cara dalam memasak dan penyediaan minuman. Dicipta pada tahun 2011 oleh Kraft Foods, medium Mio ialah pekat cecair yang menambah rasa dan warna pada hidangan dan minuman.
Dalam masakan, sos Mio boleh digunakan untuk menambah sentuhan istimewa pada perapan, sos, sup dan juga pencuci mulut. Kepraktisan dan serba boleh menjadikannya item yang sangat diperlukan di dapur tukang masak dan pencinta makanan.
Dalam penyediaan minuman, Mio digunakan secara meluas untuk menyedapkan air, jus, teh, dan juga minuman beralkohol. Dengan hanya beberapa titisan, anda boleh mengubah minuman ringkas menjadi pengalaman deria yang unik.
Mio juga boleh digunakan untuk mencipta pencuci mulut yang kreatif dan lazat, seperti ais krim, gelatin dan mousses. Pelbagai perisanya membolehkan anda meneroka kombinasi yang berbeza dan mengejutkan selera anda.
Pendek kata, Mio adalah sekutu untuk chef dan pelayan bar dalam mencipta hidangan dan minuman yang lazat dan kreatif. Kepraktisan dan serba boleh menjadikannya bahan yang sangat diperlukan di mana-mana dapur atau bar. Cubalah dan temui kemungkinan tidak berkesudahan yang Mio boleh tawarkan!
Penggunaan ujian indole dalam mengenal pasti bakteria: prosedur dan kepentingan dalam mikrobiologi.
Ujian indole ialah kaedah yang digunakan untuk mengenal pasti bakteria berdasarkan penghasilan enzim indole. Enzim ini mampu memetabolismekan triptofan kepada indole, asid asetik, dan ammonia. Teknik ini dilakukan dalam medium kultur tertentu, seperti Indole, Ornithine, dan Motility Medium (MIO), yang digunakan untuk membezakan bakteria Gram-negatif, seperti E. coli, daripada spesies lain.
Untuk melakukan ujian indole, kultur bakteria diinokulasi ke dalam medium MIO dan diinkubasi pada suhu yang sesuai. Selepas pengeraman, reagen Kovacs ditambah, yang bertindak balas dengan indole yang dihasilkan oleh bakteria, membentuk kompleks merah jambu. Kehadiran warna ini menunjukkan pengeluaran indole dan, akibatnya, kehadiran enzim yang bertanggungjawab untuk pengeluarannya.
Ujian indole adalah penting dalam mikrobiologi kerana ia membolehkan pengecaman bakteria berdasarkan ciri biokimianya. Tambahan pula, ia adalah kaedah yang cepat dan berkesan untuk membezakan spesies bakteria, membantu dalam diagnosis jangkitan dan pemilihan rawatan yang sesuai.
Panduan langkah demi langkah untuk melaksanakan ujian indole dengan berkesan dan tepat.
Untuk melaksanakan ujian indole dengan berkesan dan tepat, ikuti langkah berikut:
Langkah 1: Sediakan medium MIO mengikut arahan pengeluar. Pastikan anda mengikuti perkadaran dan keadaan pensterilan dengan betul.
Langkah 2: Selepas menyediakan medium MIO, tambahkan sampel yang anda ingin uji ke dalam tabung uji. Pastikan sampel bercampur dengan baik.
Langkah 3: Inkubasi tabung uji di bawah keadaan suhu dan masa yang optimum seperti yang disyorkan oleh pengilang medium MIO.
Langkah 4: Selepas tempoh inkubasi, tambahkan beberapa titis reagen indole ke dalam tabung uji. Perhatikan dengan teliti sebarang perubahan warna atau pembentukan cincin pada permukaan medium.
Langkah 5: Bandingkan keputusan yang diperolehi dengan carta tafsiran keputusan ujian indole. Catatkan keputusan dengan tepat dan terperinci.
Ujian indole digunakan secara meluas dalam mikrobiologi untuk mengenal pasti bakteria yang mampu menghasilkan indole daripada asid amino triptofan. Ia adalah kaedah yang berkesan dan tepat untuk membezakan pelbagai jenis bakteria berdasarkan ciri metaboliknya.
Indole dalam mikrobiologi: definisi dan kepentingan dalam mengenal pasti bakteria.
Indole dalam mikrobiologi: ialah sebatian organik yang boleh dihasilkan oleh sesetengah bakteria semasa metabolisme asid amino. Keupayaan bakteria untuk menghasilkan indole boleh menjadi kriteria penting dalam pengenalpastian dan pengelasannya.
Kepentingan dalam mengenal pasti bakteria: Pengeluaran indol oleh bakteria boleh dikesan melalui ujian biokimia tertentu, seperti ujian Kovacs. Kehadiran atau ketiadaan indole boleh membantu membezakan genera dan spesies bakteria yang berbeza, sekali gus membantu dalam pengenalpastian dan pengelasan mikrobiologi.
Medium MIO: asas, penyediaan dan kegunaan.
O Separuh MIO (Indole-Ornithine Medium) ialah medium kultur yang digunakan untuk mengesan pengeluaran indole dan keupayaan bakteria untuk memetabolismekan ornithine. Medium ini mengandungi nutrien khusus yang menggalakkan pertumbuhan bakteria indole-positif.
Penyediaan Medium MIO: Penyediaan MIO Medium melibatkan gabungan bahan-bahan seperti pepton, natrium klorida, ekstrak yis, agar-agar, dan komponen lain yang menyediakan nutrien yang diperlukan untuk pertumbuhan bakteria. Medium itu kemudiannya disterilkan dan dipadatkan dalam piring Petri untuk digunakan dalam ujian pengenalan bakteria.
Kegunaan Medium MIO: MIO Medium biasanya digunakan dalam makmal mikrobiologi untuk mengenal pasti bakteria berdasarkan pengeluaran indole dan metabolisme ornitin. Dengan memerhatikan keputusan ujian yang dilakukan dengan MIO Medium, ahli mikrobiologi boleh mengelas dan membezakan bakteria berdasarkan ciri biokimianya.
Medium MIO: asas, penyediaan dan kegunaan
O separuh MIO ialah ujian biokimia yang digunakan untuk membantu mengenal pasti spesies bakteria yang tergolong dalam keluarga Enterobacteriaceae. Ia sangat berkhasiat dan terdiri daripada glukosa, ekstrak yis, pepton, triptein, L-ornithine hydrochloride, bromocresol purple, dan agar.
Maksud akronimnya (MIO) menerangkan setiap parameter yang boleh diperhatikan dalam medium ini: motilitas, indole, dan ornithine. Motilitas ialah keupayaan mikroorganisma untuk bergerak melalui kehadiran flagella. Untuk sifat ini diperhatikan, konsistensi medium mestilah separa pepejal, supaya penyediaan mengandungi lebih sedikit agar.
Pengeluaran indole menunjukkan kehadiran enzim tryptophanase, yang bertindak ke atas asid amino triptofan. Ia adalah perlu untuk menggunakan reagen mendedahkan untuk membuat pengeluaran indole kelihatan.
Akhir sekali, ornithine menentukan sama ada bakteria mampu menyahkarboksilasi asid amino, iaitu sama ada ia mempunyai enzim ornithine decarboxylase.
Asas
Pepton, ekstrak yis dan triptin
Unsur-unsur ini menyumbang kepada nilai pemakanan medium ini. Ia berfungsi sebagai sumber nutrien dan asid amino penting untuk pertumbuhan bakteria.
Tambahan pula, triptein adalah sumber tryptophan untuk menunjukkan kehadiran enzim tryptophanase, yang merendahkan triptofan melalui deaminasi reduktif yang membebaskan indole, asid piruvik, ammonia dan tenaga.
Indole tidak berwarna, jadi kehadirannya didedahkan dengan penambahan lima titik reagen Ehrlich atau Kovacs, kedua-duanya mengandungi p-dimethylaminobenzaldehyde.
Kumpulan aldehid bagi sebatian ini bertindak balas dengan indole, menghasilkan produk berbentuk cincin merah fuchsia pada permukaan agar.
Sebarang kesan warna harus dianggap sebagai ujian positif. Ujian hendaklah dibaca dengan segera; masa berlalu, warna pudar.
Sebaliknya, ujian ini perlu didedahkan selepas merekodkan keputusan motilitas dan dekarboksilasi ornitin.
Tafsiran
Ujian positif: pembentukan cincin merah fuchsia dengan menambahkan titisan reagen Kovacs.
Ujian negatif: tiada pembentukan cincin.
Motiliti
Keupayaan bakteria untuk bergerak akan dibuktikan jika persekitaran mendung diperhatikan atau jika terdapat garis pertumbuhan tebal yang mengembang di sekitar inokulasi awal.
Ujian motilitas negatif akan dibuktikan dengan pemerhatian garis pertumbuhan nipis, dan segala-galanya di sekelilingnya akan menjadi tanpa pertumbuhan.
Adalah penting bahawa motilitas dibaca sebelum membangunkan indole, kerana agregat reagen mengaburkan keseluruhan medium.
Dalam bakteria motil tetapi tumbuh perlahan, sukar untuk menunjukkan motilitas mereka dengan medium ini. Dalam kes ini, penggunaan ujian atau kaedah lain, seperti medium motilitas atau kaedah loket jatuh, adalah disyorkan.
Glukosa
Glukosa ialah karbohidrat yang boleh ditapai yang, selain membekalkan tenaga, mengasidkan medium, syarat yang diperlukan untuk penyahkarboksilasi asid amino ornithine.
Penapaian glukosa mesti sentiasa berlaku, berdasarkan prinsip bahawa semua bakteria kepunyaan keluarga Enterobacteriaceae menapai glukosa.
L-Ornitin
Jika bakteria menghasilkan enzim ornithine decarboxylase, ia boleh bertindak sebaik sahaja medium diasidkan oleh penapaian glukosa.
Enzim ornithine decarboxylase bertindak ke atas kumpulan karboksil asid amino, menghasilkan amina yang dipanggil putresine, yang mengalkalikan medium semula.
Ujian ini perlu dibaca selepas 24 jam pengeraman, kerana jika anda cuba membacanya sebelum ini, anda mungkin tersalah tafsir ujian dengan negatif palsu.
Ingat bahawa tindak balas pertama yang berlaku ialah penapaian glukosa, jadi medium menjadi kuning pada mulanya (10 hingga 12 jam pertama). Jika dekarboksilasi ornitin berlaku kemudian, medium akan bertukar menjadi ungu.
Adalah penting untuk mentafsir ujian dekarboksilasi ornithine sebelum mendedahkan indole, kerana agregat reagen Kovacs mengubah warna medium.
Tafsiran
Ujian negatif: latar belakang kuning atau kuning sederhana.
Ujian positif: separuh sepenuhnya ungu.
penunjuk pH
Dalam kes ini, bromocresol ungu digunakan; ia bertanggungjawab untuk mengesan perubahan dalam pH medium. Apabila berasid, penunjuk menjadi kuning, dan apabila dialkalikan, ia menjadi ungu.
Teknik pembenihan dan pembangunan
Untuk menyemai medium MIO, jarum atau gelung lurus digunakan dan sebahagian daripada koloni yang akan dikaji dikumpulkan bersamanya.
Tusukan dalam dibuat pada vena kava inferior anterior tengah dalam garis lurus. Tusukan berganda tidak digalakkan, kerana ia boleh memberi gambaran palsu tentang motilitas jika tusukan tidak dilakukan di lokasi yang sama.
Inkubasi selama 24 hingga 48 jam pada suhu 37°C secara aerobik. Perhatikan keputusan dalam susunan ini: motilitas, dekarboksilasi ornithine, dan akhirnya indole mendedahkan.
Adalah dinasihatkan untuk mengeluarkan 2 ml medium secara aseptik, memindahkannya ke tiub steril dan melakukan ujian indole, supaya jika negatif, baki tiub asal boleh diinkubasi selama 24 jam lagi, untuk mendedahkan indole semula.
Pembangunan indol dilakukan seperti berikut: 3 hingga 5 titik reagen Kovacs ditambah ke dalam medium MIO dan digoncang dengan kuat. Perhatikan sama ada cincin merah fuchsia muncul atau tidak.
Penyediaan
Separuh daripada saya
Timbang 31 g medium MIO dan larutkan dalam satu liter air suling.
Panaskan sehingga adunan mendidih selama satu minit, kacau sentiasa sehingga agar-agar larut sepenuhnya. Tuangkan 4 ml medium ke dalam 13/100 tabung uji dengan penutup kapas.
Sterilkan dalam autoklaf pada suhu 121°C selama 15 minit. Keluarkan dari autoklaf dan biarkan berehat di atas rak untuk membentuk blok separa pepejal.
Simpan di dalam peti sejuk pada suhu 2-8°C. Biarkan sejuk sebelum menyemai terikan bakteria.
Warna medium dehidrasi adalah kuning air dan warna medium yang disediakan adalah ungu opalescent sedikit.
pH akhir medium yang disediakan ialah 6,5 ± 0,2
Medium menjadi kuning pada pH berasid dan berwarna ungu pada pH alkali.
Reagen Kovacs (pembangun ujian indole)
Reagen ini disediakan seperti berikut:
150 ml amil, isoamil atau butil alkohol (mana-mana daripada tiga) disukat. 10 g p-dimethylaminobenzaldehyde dilarutkan. Selepas itu, 50 ml asid hidroklorik pekat ditambah perlahan-lahan.
Reagen yang disediakan tidak berwarna atau kuning muda. Ia hendaklah disimpan dalam botol ambar dan disimpan di dalam peti sejuk. Warna coklat gelap menunjukkan kemerosotan.
Reagen Kovacs juga boleh digantikan dengan reagen Ehrlich. Yang terakhir, kerana lebih sensitif, lebih disukai untuk mengesan indole dalam bakteria yang menghasilkannya dalam kuantiti yang minimum, seperti beberapa basil Gram-negatif bukan fermentatif dan beberapa anaerobes.
Penggunaan
Medium ini adalah ujian yang melengkapkan bateri ujian biokimia untuk mengenal pasti bakteria kepunyaan keluarga Enterobacteriaceae.
Data dekarboksilasi ornithine berfungsi untuk membezakan Shigella sonnei, yang positif, daripada Shigella boydii, Shigella flexneri dan S. dysenterieae, yang negatif.
Ia juga membezakan genus Klebsiella, yang negatif, daripada genus Enterobacter, di mana kebanyakan spesiesnya adalah positif.
Kawalan kualiti
Setiap kali kumpulan media MIO disediakan, ujian kawalan boleh dilakukan. Untuk melakukan ini, strain yang diketahui atau diperakui digunakan untuk memerhati kelakuan medium.
Strain yang boleh digunakan ialah Escherichia coli, Morganella morganii, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter aerogenes e Proteus mirabilis.
Hasil yang diharapkan ialah E. coli dan M. morganii. Mereka memberikan M: +, I: + dan O: +.
Klebsiella pneumoniae semuanya negatif (M: -, I: -, O :-). Proteus mirabilis e Enterobacter aerogenes sediakan M: + I: – dan O: +.
Rujukan
- Mac Faddin J. (2003). Ujian biokimia untuk mengenal pasti bakteria kepentingan klinikal. ed ke-3. Rumah Penerbitan Panamericana. Buenos Aires, Argentina
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. ed ke-12 Editorial Panamericana SA Argentina.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologi ed ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.
- Makmal British. MIO Medio 2015. Boleh didapati di: britanialab.com
- BD Laboratories BBL Motility Indole Ornithine (MIO) Medium. 2007. Boleh didapati di: bd.com
- Valtek Laboratories MIO Motiliti sederhana, Indole, Ornithine. 2010. Boleh didapati di: andinamedica.com