De term "MIO Medium" verwijst naar een kweekmedium dat bekend staat als Minimal Mineral Medium, dat gebaseerd is op de samenstelling van essentiële voedingsstoffen voor de groei van micro-organismen in het laboratorium. Dit medium is ontwikkeld om ideale omstandigheden te creëren voor de groei en ontwikkeling van bacteriën, schimmels en andere micro-organismen in wetenschappelijke studies. In dit artikel bespreken we de basis, bereiding en belangrijkste toepassingen van MIO Medium in de microbiologie.
Waarvoor wordt Mio medium gebruikt bij het koken en bereiden van dranken?
Mio medium is een veelzijdig ingrediënt dat op verschillende manieren gebruikt kan worden bij het koken en bereiden van dranken. Mio medium, in 2011 ontwikkeld door Kraft Foods, is een vloeibaar concentraat dat smaak en kleur toevoegt aan gerechten en dranken.
Miosaus kan in de keuken worden gebruikt om marinades, sauzen, soepen en zelfs desserts een speciaal tintje te geven. Door zijn praktische toepasbaarheid en veelzijdigheid is het een onmisbaar item in de keuken van chef-koks en fijnproevers.
Bij de bereiding van dranken wordt Mio veel gebruikt om water, sappen, thee en zelfs alcoholische dranken op smaak te brengen. Met slechts een paar druppels tover je een simpel drankje om tot een unieke zintuiglijke ervaring.
Mio kan ook gebruikt worden om creatieve en heerlijke desserts te maken, zoals ijs, gelatines en mousses. De verscheidenheid aan smaken stelt je in staat om verschillende combinaties te experimenteren en je smaakpapillen te verrassen.
Kortom, Mio is een bondgenoot voor chefs en bartenders bij het creëren van heerlijke en creatieve gerechten en drankjes. De praktische en veelzijdige eigenschappen maken het een onmisbaar ingrediënt in elke keuken of bar. Probeer het en ontdek de eindeloze mogelijkheden die Mio te bieden heeft!
Gebruik van de indooltest bij de identificatie van bacteriën: procedure en belang in de microbiologie.
De indooltest is een methode om bacteriën te identificeren op basis van de productie van het enzym indool. Dit enzym kan tryptofaan omzetten in indool, azijnzuur en ammoniak. De techniek wordt uitgevoerd in een specifiek kweekmedium, zoals indool, ornithine en motiliteitsmedium (MIO), dat wordt gebruikt om gramnegatieve bacteriën, zoals E. coli, te onderscheiden van andere soorten.
Om de indooltest uit te voeren, wordt een bacteriecultuur geënt in MIO-medium en geïncubeerd bij een geschikte temperatuur. Na incubatie wordt Kovacs-reagens toegevoegd, dat reageert met het door de bacteriën geproduceerde indool en een roze complex vormt. Deze kleur duidt op de indoolproductie en daarmee op de aanwezigheid van het enzym dat verantwoordelijk is voor de productie ervan.
De indooltest is cruciaal in de microbiologie omdat deze de identificatie van bacteriën mogelijk maakt op basis van hun biochemische kenmerken. Bovendien is het een snelle en effectieve methode om bacteriesoorten te differentiëren, wat helpt bij de diagnose van infecties en de keuze van een geschikte behandeling.
Stapsgewijze handleiding voor het effectief en nauwkeurig uitvoeren van de indooltest.
Om de indooltest effectief en nauwkeurig uit te voeren, volgt u deze stappen:
Stap 1: Bereid het MIO-medium voor volgens de instructies van de fabrikant. Zorg ervoor dat u de juiste verhoudingen en sterilisatieomstandigheden aanhoudt.
Stap 2: Nadat u het MIO-medium hebt bereid, voegt u het te testen monster toe aan de reageerbuis. Zorg ervoor dat het monster goed gemengd is.
Stap 3: Broed de reageerbuis onder optimale temperatuur- en tijdcondities zoals aanbevolen door de fabrikant van het MIO-medium.
Stap 4: Voeg na de incubatieperiode een paar druppels indoolreagens toe aan de reageerbuis. Let goed op eventuele kleurveranderingen of ringvorming op het oppervlak van het medium.
Stap 5: Vergelijk de verkregen resultaten met een interpretatietabel voor indooltestresultaten. Noteer de resultaten nauwkeurig en gedetailleerd.
De indooltest wordt veel gebruikt in de microbiologie om bacteriën te identificeren die indool kunnen produceren uit het aminozuur tryptofaan. Het is een effectieve en nauwkeurige methode om verschillende soorten bacteriën te onderscheiden op basis van hun metabolische kenmerken.
Indool in de microbiologie: definitie en belang bij het identificeren van bacteriën.
Indool in de microbiologie: is een organische verbinding die door sommige bacteriën kan worden geproduceerd tijdens het aminozuurmetabolisme. Het vermogen van een bacterie om indool te produceren, kan een belangrijk criterium zijn bij de identificatie en classificatie ervan.
Belang bij het identificeren van bacteriën: De productie van indool door bacteriën kan worden gedetecteerd met behulp van specifieke biochemische tests, zoals de Kovacs-test. De aanwezigheid of afwezigheid van indool kan helpen bij het onderscheiden van verschillende bacteriegeslachten en -soorten, wat bijdraagt aan de microbiologische identificatie en classificatie.
MIO-medium: basis, voorbereiding en toepassingen.
O Een halve miljoen (Indool-ornithine medium) is een kweekmedium dat gebruikt wordt om de indoolproductie en het vermogen van bacteriën om ornithine te metaboliseren te detecteren. Dit medium bevat specifieke voedingsstoffen die de groei van indoolpositieve bacteriën bevorderen.
Bereiding van MIO-medium: De bereiding van het MIO-medium omvat het combineren van ingrediënten zoals pepton, natriumchloride, gistextract, agar en andere componenten die de voedingsstoffen leveren die nodig zijn voor bacteriegroei. Het medium wordt vervolgens gesteriliseerd en gestold in petrischaaltjes voor gebruik in bacteriële identificatietests.
Toepassingen van het MIO-medium: MIO Medium wordt veel gebruikt in microbiologische laboratoria om bacteriën te identificeren op basis van hun indoolproductie en ornithinemetabolisme. Door de resultaten van tests met MIO Medium te bekijken, kunnen microbiologen bacteriën classificeren en differentiëren op basis van hun biochemische kenmerken.
MIO-medium: basis, voorbereiding en toepassingen
O een halve miljoen is een biochemische test die gebruikt wordt om bacteriesoorten te identificeren die behoren tot de familie Enterobacteriaceae. Het is zeer voedzaam en bestaat uit glucose, gistextract, pepton, tripteïne, L-ornithinehydrochloride, broomcresolpaars en agar.
De betekenis van de afkorting (MIO) beschrijft elk van de parameters die in dit medium kunnen worden waargenomen: beweeglijkheid, indool en ornithine. Beweeglijkheid is het vermogen van het micro-organisme om zich te verplaatsen door de aanwezigheid van flagellen. Om deze eigenschap waar te nemen, moet de consistentie van het medium halfvast zijn, zodat het preparaat minder agar bevat.
De productie van indool toont de aanwezigheid aan van het enzym tryptofanase, dat inwerkt op het aminozuur tryptofaan. Om de productie van indool zichtbaar te maken, is het gebruik van een onthullend reagens noodzakelijk.
Ten slotte bepaalt ornithine of de bacterie in staat is het aminozuur te decarboxyleren, dat wil zeggen of de bacterie het enzym ornithinedecarboxylase heeft.
Fundaço
Pepton, gistextract en tryptine
Deze elementen dragen bij aan de voedingswaarde van dit medium. Ze dienen als bron van voedingsstoffen en essentiële aminozuren voor bacteriegroei.
Bovendien is tripteïne een bron van tryptofaan, wat wijst op de aanwezigheid van het enzym tryptofanase. Tryptofaan wordt afgebroken door reductieve deaminering, waarbij indool, pyrodruivenzuur, ammoniak en energie vrijkomen.
Indool is kleurloos en de aanwezigheid ervan wordt vastgesteld door vijf druppels Ehrlich- of Kovacs-reagens toe te voegen. Beide bevatten p-dimethylaminobenzaldehyde.
De aldehydegroep van deze verbinding reageert met indool, waardoor een fuchsia-rode, ringvormige stof op het oppervlak van de agar ontstaat.
Elk spoor van kleur moet als een positieve test worden beschouwd. De test moet onmiddellijk worden afgelezen; na verloop van tijd vervaagt de kleur.
Deze test zou daarentegen pas bekend moeten worden nadat de resultaten van de beweeglijkheid en de decarboxylering van ornithine zijn vastgelegd.
Interpretatie
Positieve test: Vorming van een fuchsia-rode ring door toevoeging van druppels Kovacs-reagens.
Negatieve test: er is geen vorming van ringen.
beweeglijkheid
Het vermogen van bacteriën om zich te verplaatsen, blijkt uit een troebele omgeving of als er een dikke groeilijn rondom de eerste inoculatie zichtbaar is.
Bij een negatieve motiliteitstest is er sprake van een dunne groeilijn en is alles eromheen groeiloos.
Het is belangrijk dat de beweeglijkheid wordt gemeten vóór de ontwikkeling van het indool, omdat het reagensaggregaat het hele medium vertroebelt.
Bij beweeglijke maar langzaam groeiende bacteriën is het moeilijk om hun beweeglijkheid met dit medium aan te tonen. In dat geval wordt het gebruik van andere testen of methoden, zoals het beweeglijkheidsmedium of de druppelhangermethode, aanbevolen.
Glucose
Glucose is een fermenteerbare koolhydraat die, naast het leveren van energie, het milieu verzuurt, een noodzakelijke voorwaarde voor de decarboxylering van het aminozuur ornithine.
Glucosefermentatie moet altijd plaatsvinden, gebaseerd op het principe dat alle bacteriën die behoren tot de familie Enterobacteriaceae glucose fermenteren.
L-Ornithine
Als de bacteriën het enzym ornithinedecarboxylase produceren, kan dit enzym in actie komen zodra het medium door glucosefermentatie wordt verzuurd.
Het enzym ornithinedecarboxylase werkt in op de carboxylgroep van het aminozuur en produceert een amine genaamd putresine, dat het medium weer alkaliseert.
Deze test moet na 24 uur incubatie worden afgelezen. Als u dit eerder doet, bestaat de kans dat de test verkeerd wordt geïnterpreteerd en dat de uitslag vals negatief is.
Houd er rekening mee dat de eerste reactie die plaatsvindt glucosefermentatie is, waardoor het medium aanvankelijk geel kleurt (de eerste 10 tot 12 uur). Als er later ornithinedecarboxylering plaatsvindt, kleurt het medium paars.
Het is belangrijk om de ornithine-decarboxylatietest te interpreteren voordat het indool wordt gedetecteerd, omdat het Kovacs-reagensaggregaat de kleur van het medium verandert.
Interpretatie
Negatieve test: gele of middelgele achtergrond.
Positieve test: half helemaal paars.
pH-indicator
In dit geval wordt broomcresolpaars gebruikt; dit is verantwoordelijk voor het detecteren van pH-veranderingen in het medium. Bij verzuring kleurt de indicator geel, en bij alkaliniteit paars.
Zaai- en ontwikkelingstechniek
Om het MIO-medium te enten, wordt een naald of een rechte lus gebruikt en wordt een deel van de te onderzoeken kolonie hiermee verzameld.
Een diepe punctie wordt in een rechte lijn in de middelste vena cava anterior inferior uitgevoerd. Het is niet raadzaam om een dubbele punctie uit te voeren, omdat dit een verkeerde indruk van de beweeglijkheid kan geven als de puncties niet op dezelfde locatie worden uitgevoerd.
Incubeer 24 tot 48 uur aeroob bij 37 °C. Bekijk de resultaten in deze volgorde: beweeglijkheid, ornithinedecarboxylering en uiteindelijk indoolonthulling.
Het is raadzaam om op aseptische wijze 2 ml van het medium te verwijderen, dit over te brengen naar een steriele buis en de indooltest uit te voeren. Als de test negatief is, kan het restant van de originele buis nog eens 24 uur worden geïncubeerd om de indooltest opnieuw aan te tonen.
De indoolontwikkeling verloopt als volgt: voeg 3 tot 5 druppels Kovacs-reagens toe aan het MIO-medium en schud krachtig. Kijk of er een fuchsia-rode ring verschijnt.
Voorbereiding
De helft van mij
Weeg 31 gram MIO-medium af en los het op in één liter gedestilleerd water.
Verwarm het mengsel een minuut lang tot het kookt, onder voortdurend roeren tot de agar volledig is opgelost. Giet 4 ml medium in reageerbuisjes van 13/100 met wattenstaafjes.
Steriliseer 121 minuten in een autoclaaf op 15 °C. Haal uit de autoclaaf en laat rusten op een rek tot een halfvast blok.
Bewaar in de koelkast bij 2-8°C. Laat afkoelen voordat u de bacteriestam ent.
De kleur van het gedehydrateerde medium is beige en de kleur van het bereide medium is licht opaalpaars.
De uiteindelijke pH van het bereide medium is 6,5 ± 0,2
Het medium kleurt geel bij een zure pH en paars bij een basische pH.
Kovacs-reagens (ontwikkelaar van indooltesten)
Dit reagens wordt als volgt bereid:
Er wordt 150 ml amyl-, isoamyl- of butylalcohol (naar keuze) afgemeten. 10 g p-dimethylaminobenzaldehyde wordt opgelost. Vervolgens wordt langzaam 50 ml geconcentreerd zoutzuur toegevoegd.
Het bereide reagens is kleurloos of lichtgeel. Het moet in een amberkleurige fles gekoeld bewaard worden. Een donkerbruine kleur duidt op bederf.
Kovacs' reagens kan ook worden vervangen door Ehrlichs reagens. Dit laatste is gevoeliger en heeft de voorkeur voor het detecteren van indool in bacteriën die het in minimale hoeveelheden produceren, zoals sommige niet-fermentatieve gramnegatieve bacteriën en sommige anaerobe bacteriën.
Gebruik
Dit medium is een test die een aanvulling vormt op een reeks biochemische testen voor de identificatie van bacteriën die behoren tot de familie Enterobacteriaceae.
Gegevens over de decarboxylering van ornithine dienen ter differentiatie Shigella sonnei, wat positief is, van Shigella boydii, Shigella flexneri en S. dysenterieae, die negatief zijn.
Het maakt ook onderscheid tussen het geslacht Klebsiella, dat negatief is, en het geslacht Enterobacter, waarvan de meeste soorten positief zijn.
Kwaliteitscontrole
Elke keer dat een batch MIO-media wordt bereid, kan een controletest worden uitgevoerd. Hiervoor worden bekende of gecertificeerde stammen gebruikt om het gedrag van het medium te observeren.
De stammen die gebruikt kunnen worden zijn: Escherichia coli, Morganella morganii, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter aerogenes e Proteus mirabilis.
De verwachte resultaten zijn E. coli en M. morganii. Ze geven M: +, I: + en O: +.
Klebsiella pneumoniae alles is negatief (M: -, I: -, O :-). Proteus mirabilis e Enterobacter aerogenes geef M: + I: – en O: +.
Referências
- Mac Faddin J. (2003). Biochemische tests voor de identificatie van bacteriën van klinisch belang. 3e editie. Panamericana Publishing House. Buenos Aires, Argentinië.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott's Microbiologische Diagnose. 12e druk. Editorial Panamericana SA Argentinië.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiologische diagnose 5e druk. Editorial Panamericana SA Argentinië.
- British Laboratories. MIO Medio 2015. Beschikbaar op: britanialab.com
- BD Laboratories BBL Motility Indole Ornithine (MIO) Medium. 2007. Beschikbaar op: bd.com
- Valtek Laboratories MIO medium Motility, Indole, Ornithine. 2010. Beschikbaar op: andinamedica.com