การตรวจสเมียร์ด้วยกล้องจุลทรรศน์ (smear microscopy) เป็นขั้นตอนทางห้องปฏิบัติการที่ใช้ในการวิเคราะห์เซลล์และจุลินทรีย์ที่มีอยู่ในตัวอย่างทางชีวภาพ โดยทั่วไปแล้ว การตรวจสเมียร์จะทำจากตัวอย่างเลือด ปัสสาวะ สารคัดหลั่งจากช่องคลอด หรือวัสดุอื่นๆ ซึ่งจะถูกทาลงบนสไลด์แก้วและย้อมสีเพื่อให้มองเห็นได้ง่ายภายใต้กล้องจุลทรรศน์
วิธีการนี้ใช้กันอย่างแพร่หลายในสาขาการดูแลสุขภาพเพื่อวินิจฉัยโรคต่างๆ เช่น การติดเชื้อแบคทีเรีย เชื้อรา และไวรัส รวมถึงช่วยในการติดตามการรักษาและตรวจติดตามสภาวะสุขภาพ
มีกล้องจุลทรรศน์สเมียร์หลายประเภท เช่น กล้องจุลทรรศน์สเมียร์เลือด ซึ่งใช้ระบุเซลล์เม็ดเลือดและความผิดปกติที่อาจเกิดขึ้น และกล้องจุลทรรศน์สเมียร์ช่องคลอด ซึ่งใช้ตรวจหาการติดเชื้อทางนรีเวช เป็นต้น การตรวจสเมียร์แต่ละประเภทจำเป็นต้องมีการเตรียมตัวอย่างเฉพาะและเทคนิคการย้อมสีที่เหมาะสมสำหรับการมองเห็นด้วยกล้องจุลทรรศน์
คู่มือทีละขั้นตอนในการทำการตรวจแปปสเมียร์อย่างถูกต้องและมีประสิทธิภาพ
เพื่อทำการตรวจสเมียร์อย่างถูกต้องและมีประสิทธิภาพ สิ่งสำคัญคือต้องปฏิบัติตามขั้นตอนง่ายๆ ไม่กี่ขั้นตอน การตรวจสเมียร์เป็นเทคนิคที่ใช้ในกล้องจุลทรรศน์เพื่อเตรียมตัวอย่างเซลล์หรือเนื้อเยื่อสำหรับการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ ดูขั้นตอนการตรวจสเมียร์แบบทีละขั้นตอนด้านล่าง:
ขั้นตอนที่ 1: ขั้นแรก ทำความสะอาดใบมีดแก้วด้วยแอลกอฮอล์ 70% แล้วปล่อยให้แห้งสนิท ตรวจสอบให้แน่ใจว่าใบมีดปราศจากฝุ่นหรือคราบสกปรกใดๆ
ขั้นตอนที่ 2:ต่อไป นำตัวอย่างที่คุณต้องการวิเคราะห์มาวางบนแผ่นกระจกในปริมาณเล็กน้อย เกลี่ยตัวอย่างให้ทั่วเป็นชั้นบางๆ
ขั้นตอนที่ 3:ใช้แผ่นกระจกอีกแผ่นหนึ่งช่วยในการป้ายตัวอย่าง วางแผ่นกระจกทำมุมประมาณ 45 องศา แล้วเลื่อนแผ่นกระจกไปบนตัวอย่างด้วยการเคลื่อนไหวที่ราบเรียบและสม่ำเสมอ
ขั้นตอนที่ 4:ปล่อยให้ตัวอย่างแห้งในอากาศสักสองสามนาที หลีกเลี่ยงการเป่าลมหรือให้ความร้อนกับสไลด์ เพราะอาจทำให้ตัวอย่างเปลี่ยนแปลงได้
ขั้นตอนที่ 5:สุดท้าย ให้ใช้เมทิลแอลกอฮอล์หรือสารตรึงสภาพอื่นๆ ตรึงตัวอย่างไว้ ปล่อยให้แห้งสนิทก่อนนำไปสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์
หากทำตามขั้นตอนง่ายๆ เหล่านี้ คุณจะสามารถทำการวิเคราะห์ตัวอย่างด้วยกล้องจุลทรรศน์ได้อย่างถูกต้องและได้ผลลัพธ์ที่แม่นยำ โปรดจำไว้ว่าเทคนิคที่ถูกต้องเป็นสิ่งสำคัญเพื่อให้มั่นใจถึงคุณภาพของผลลัพธ์ที่ได้
การทาป้ายที่ถูกต้องควรมีลักษณะอย่างไร?
การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์สเมียร์เป็นขั้นตอนที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในแวดวงการดูแลสุขภาพเพื่อวิเคราะห์เซลล์ที่พบในตัวอย่างทางชีวภาพประเภทต่างๆ เพื่อให้การวิเคราะห์มีความแม่นยำ สิ่งสำคัญคือสเมียร์ต้องมีลักษณะที่สมบูรณ์แบบและมีลักษณะเฉพาะที่เอื้อต่อการมองเห็นและระบุเซลล์ที่ปรากฏ
สเมียร์ที่ดีควรมีเซลล์กระจายตัวและเว้นระยะห่างเท่าๆ กันทั่วทั้งสไลด์ เซลล์ควรอยู่ในสภาพสมบูรณ์ ไม่มีร่องรอยการเสื่อมสภาพหรือการแตก นอกจากนี้ สีของสเมียร์ควรสม่ำเสมอ เพื่อให้มองเห็นโครงสร้างเซลล์ได้ชัดเจนยิ่งขึ้น
เซลล์ที่อยู่ในสเมียร์ต้องได้รับการอนุรักษ์ไว้อย่างดีและคงไว้ซึ่งลักษณะทางสัณฐานวิทยา ซึ่งหมายความว่าเซลล์จะต้องคงรูปร่างเดิมไว้ และไม่แสดงการเปลี่ยนแปลงที่สำคัญซึ่งอาจเป็นอุปสรรคต่อการระบุเซลล์ที่ถูกต้อง
สิ่งสำคัญคือต้องเน้นย้ำว่าคุณภาพของสเมียร์เป็นสิ่งสำคัญต่อการวิเคราะห์ที่แม่นยำและเชื่อถือได้ ดังนั้น การปฏิบัติตามขั้นตอนการเตรียมสเมียร์อย่างถูกต้องและการตรวจสอบให้แน่ใจว่าทุกขั้นตอนถูกต้องจึงเป็นสิ่งสำคัญ
การปฏิบัติตามแนวทางเหล่านี้ทำให้สามารถรับผลลัพธ์ที่แม่นยำและเชื่อถือได้มากขึ้นในการวิเคราะห์ตัวอย่างทางชีวภาพด้วยกล้องจุลทรรศน์
การป้ายสีมีความสำคัญขนาดไหน?
การสเมียร์เป็นขั้นตอนพื้นฐานทางกล้องจุลทรรศน์ เกี่ยวข้องกับการเตรียมตัวอย่างเพื่อวิเคราะห์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ ซึ่งช่วยให้มองเห็นเซลล์ จุลินทรีย์ และโครงสร้างอื่นๆ ได้อย่างละเอียด ความสำคัญของการสเมียร์อยู่ที่การสังเกตองค์ประกอบต่างๆ ที่มองไม่เห็นด้วยตาเปล่า
ในการทำสเมียร์ จะต้องเกลี่ยตัวอย่างให้ทั่วและเบามือบนสไลด์แก้ว เพื่อให้แน่ใจว่าเซลล์กระจายตัวอย่างสม่ำเสมอ จากนั้นจึงตรึงตัวอย่างและย้อมสีเพื่อให้ง่ายต่อการระบุโครงสร้างภายใต้กล้องจุลทรรศน์ สเมียร์มีหลายประเภท เช่น สเมียร์เลือด สเมียร์สารคัดหลั่ง และสเมียร์เพาะเลี้ยง
การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์สเมียร์สามารถใช้ในการวินิจฉัยโรคต่างๆ ระบุเชื้อก่อโรค ประเมินคุณภาพเม็ดเลือด และติดตามผลการรักษา รวมถึงการใช้งานอื่นๆ อีกมากมาย ดังนั้น การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์สเมียร์จึงเป็นขั้นตอนสำคัญในการตรวจทางห้องปฏิบัติการและการได้รับข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับสุขภาพของผู้ป่วย
หากไม่มีการตรวจหาเชื้อ ก็จะไม่สามารถได้รับข้อมูลอันมีค่ามากมายได้ ส่งผลให้ความแม่นยำและประสิทธิภาพของการทดสอบในห้องปฏิบัติการลดลง
การตรวจแปปสเมียร์แบบละเอียดมีไว้ทำอะไร และมีความสำคัญต่อสุขภาพสตรีมากเพียงใด?
การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์สเมียร์เป็นขั้นตอนสำคัญในด้านสุขภาพสตรี ซึ่งจำเป็นต่อการวินิจฉัยโรคต่างๆ หนึ่งในการตรวจที่เป็นที่รู้จักมากที่สุดคือการตรวจสเมียร์แบบบาง ซึ่งเกี่ยวข้องกับการเก็บตัวอย่างเซลล์จากปากมดลูกเพื่อนำไปวิเคราะห์ในห้องปฏิบัติการ
การตรวจเซลล์เยื่อบุปากมดลูก ด้วยวิธีสเมียร์บางๆ นั้นส่วนใหญ่ใช้เพื่อตรวจหาการเปลี่ยนแปลงในเซลล์ปากมดลูก เช่น รอยโรคก่อนเป็นมะเร็งและมะเร็ง การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้อาจเกิดจากเชื้อไวรัสฮิวแมนแพปิลโลมา (HPV) ซึ่งเป็นหนึ่งในปัจจัยเสี่ยงหลักของการเกิดมะเร็งปากมดลูก
สิ่งสำคัญคือต้องเน้นย้ำว่า การตรวจเซลล์เยื่อบุปากมดลูก ด้วยวิธี Thin Smearเป็นการตรวจเชิงป้องกันที่ช่วยให้สามารถระบุการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ในระยะเริ่มต้น ซึ่งจะช่วยให้การรักษาได้ผลดียิ่งขึ้นและเพิ่มโอกาสในการรักษาให้หายขาด นอกจากนี้ การตรวจนี้ยังมีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับการติดตามผู้หญิงที่ได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นโรคปากมดลูกแล้วด้วย
ดังนั้น จึงเป็นสิ่งสำคัญที่ผู้หญิงควรเข้ารับการตรวจคัดกรองมะเร็งปากมดลูก เป็นประจำ ตามคำแนะนำของแพทย์ การตรวจนี้ทำได้ง่าย ไม่เจ็บปวด และสามารถช่วยชีวิตได้ เนื่องจากเป็นเครื่องมือพื้นฐานในการป้องกันมะเร็งปากมดลูก
การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบสเมียร์: ขั้นตอน วัตถุประสงค์ และประเภท
การตรวจเลือดด้วยกล้องจุลทรรศน์เป็นเครื่องมือวินิจฉัยวัณโรคปอดระยะแอคทีฟ เป็นเทคนิคทางห้องปฏิบัติการที่ช่วยในการตรวจหาและวัดปริมาณเชื้อแบคทีเรียทนกรด เช่นเชื้อไมโคแบคทีเรียม ทูเบอร์คูโลซิส เป็นวิธีการที่ใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุดในโลกสำหรับการวินิจฉัยวัณโรคปอดระยะแอคทีฟในชุมชนและการประเมินผลการรักษา
วัณโรคปอดเป็นโรคติดต่อที่เกิดจากเชื้อแบคทีเรีย Mycobacterium tuberculosisซึ่งติดเชื้อในปอด แต่ก็สามารถส่งผลกระทบต่ออวัยวะและระบบอื่นๆ ได้เช่นกัน ทั่วโลกมีผู้ป่วยวัณโรคปอดมากกว่า 6 ล้านคน
เชื้อ Mycobacterium tuberculosis และเชื้อ Mycobacterium ชนิด อื่นๆ ที่ไม่ใช่เชื้อวัณโรคมีชั้นไขมันเคลือบอยู่บนผนังเซลล์ซึ่งอุดมไปด้วยกรดไมโคลิก ซึ่งทนต่อการเปลี่ยนสีด้วยแอลกอฮอล์ที่เป็นกรดหลังจากย้อมด้วยสีย้อมพื้นฐาน
ดังนั้นจึงมีการใช้เทคนิคการย้อมสีแบบพิเศษ เช่น วิธี Ziehl-Neelsen วิธีการที่เรียบง่ายและราคาไม่แพงเหล่านี้ช่วยให้ผนังเซลล์คงสีไว้ได้โดยการล้างตัวอย่างด้วยสารละลายกรด และ ผนังเซลล์ ของแบคทีเรีย Mycobacteriumจะมีสีแดง ต่างจากแบคทีเรียชนิดอื่นที่มีสีน้ำเงิน
การเก็บตัวอย่างจากไม้พันสำลีต้องใช้ตัวอย่างเสมหะ ควรเก็บในตอนเช้าหลังจากตื่นนอน นอกจากนี้ยังสามารถใช้ตัวอย่างเนื้อเยื่อหรือของเหลวในร่างกายได้อีกด้วย
กระบวนการ
ตัวอย่างที่ต้องนำไปตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์สเมียร์ ได้แก่ ตัวอย่างเสมหะ ตัวอย่างเนื้อเยื่อ หรือตัวอย่างของเหลวในร่างกาย ตัวอย่างเนื้อเยื่อสามารถแยกออกได้โดยการส่องกล้องตรวจหลอดลม หรือการตัดชิ้นเนื้อต่อมน้ำเหลืองหรือเนื้อเยื่ออื่นๆ
เนื่องจากวัณโรคสามารถส่งผลต่ออวัยวะหรือระบบใดก็ได้ ตัวอย่างจึงสามารถมีได้หลากหลาย เช่น ตัวอย่างปัสสาวะ น้ำไขสันหลัง น้ำเยื่อหุ้มปอด น้ำในช่องท้อง เลือด หนองจากโพรงเปิด การตรวจชิ้นเนื้อ เป็นต้น
ตัวอย่างจากรอยโรคนอกปอดควรนำไปเพาะเชื้อด้วย ตัวอย่างเสมหะจะถูกเก็บในตอนเช้าหลังจากขึ้นสู่ที่สูง
สามารถเก็บตัวอย่างได้หลายตัวอย่างติดต่อกันหรือเก็บในวันติดต่อกัน ตัวอย่างควรติดฉลากในภาชนะปากกว้างที่ปิดสนิท ควรมีข้อมูลผู้ป่วย ประเภทตัวอย่าง และวันที่เก็บ
ขั้นตอนทางเทคนิค
เมื่อได้ตัวอย่างแล้ว สามารถนำไปปั่นเหวี่ยงเพื่อทำให้เข้มข้นขึ้นหรือนำไปใช้โดยตรงได้ ขั้นตอนแรกคือการหยดตัวอย่างลงไปสองสามหยดแล้วเกลี่ยลงบนสไลด์
– ตัวอย่างถูกเคลือบด้วยฟุคซินที่ผ่านการกรอง (สารละลายสีย้อม)
– จากนั้นนำไปให้ความร้อนจนเกิดไอสีขาวประมาณ 3 ไอ
– รอให้ตัวอย่างเย็นลงประมาณ 5 นาที แล้วจึงล้างด้วยน้ำ
– ปิดด้วยสารละลายฟอกขาว (แอลกอฮอล์ที่มีฤทธิ์เป็นกรด) เป็นเวลา 2 นาที
– ล้างด้วยน้ำอีกครั้ง
– ปิดตัวอย่างด้วยเมทิลีนบลูแล้วทิ้งไว้ 1 นาที
– ล้างด้วยน้ำ
– ปล่อยให้แห้งโดยอากาศ แล้วจึงดำเนินการสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์
กระบวนการนี้รวดเร็ว ง่าย ราคาไม่แพง และทำให้ เซลล์ของเชื้อวัณโรค (Mycobacterium tuberculosis)ย้อมติดสีแดงเทคนิคนี้เรียกว่าเทคนิคการย้อมสีแบบ Ziehl-Neelsen
การสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์ประกอบด้วยการระบุการมีอยู่ของแบคทีเรียที่ทนกรดและการวัดปริมาณตามสนาม
เซลล์ของเชื้อ Mycobacterium tuberculosis มีลักษณะ เป็นแท่งโค้งสีแดง มีเม็ดเล็กๆ บนพื้นหลังสีน้ำเงิน อาจพบได้ทั้งแบบเดี่ยวๆ เป็นคู่ หรือเป็นกลุ่ม ควรสังเกตทีละช่องมองภาพ และควรตรวจสอบอย่างน้อย 100 ช่องมองภาพต่อสเมียร์แต่ละครั้ง
ถือว่าผลตรวจเป็นบวกเมื่อพบเซลล์ของ เชื้อ M. tuberculosisมากกว่า 10 เซลล์ ในแต่ละช่อง มองภาพ ซึ่งคิดเป็นจำนวนเชื้อแบคทีเรีย 5000 ถึง 100,00 ตัวต่อมิลลิลิตรของตัวอย่าง
ในกรณีเหล่านี้ ถือว่าผลตรวจเป็นบวกสำหรับเชื้อ Mycobacterium tuberculosis เนื่องจาก เชื้อ Mycobacteriumที่ไม่ใช่เชื้อวัณโรคหรือแบคทีเรียทนกรดชนิดอื่น ๆ มีรูปร่างแตกต่างกัน และค่าที่สังเกตได้ต่อช่องมองภาพโดยทั่วไปจะน้อยกว่า 10
ผู้ที่ตรวจสอบตัวอย่างจะต้องมีประสบการณ์หรือความรู้ในการตรวจจับและจดจำจุลินทรีย์เหล่านี้ เนื่องจากผลการตรวจอาจมีผลลบหรือผลบวกปลอมได้
ยังมีเทคนิคฟลูออโรสโคปแบบอื่น ๆ ที่มีความไวสูงกว่าแต่มีราคาแพงกว่ามาก เทคนิคหนึ่งใช้การย้อมสี Auramine-O เพื่อให้ได้การเรืองแสงสีเขียว หรือการย้อมสี Auramine O/Rhodamine B เพื่อดูการเรืองแสงสีเหลือง/ส้ม
โดยทั่วไปแล้วผู้ป่วยจะได้รับการเพาะเชื้อและทำการตรวจแอนติบอดีเพื่อยืนยันการวินิจฉัยและการเลือกวิธีการรักษาที่เหมาะสม
การส่องกล้องตรวจเชื้อแบคทีเรียมีไว้เพื่ออะไร?
วัณโรคเป็นโรคติดเชื้อที่ส่งผลกระทบต่อปอดและอวัยวะและระบบอวัยวะอื่นๆ ของร่างกาย เป็นโรคติดต่อที่ก่อให้เกิดความเสียหายอย่างรุนแรงต่อระบบทางเดินหายใจ ซึ่งหากไม่ได้รับการรักษาอย่างถูกต้องอาจนำไปสู่การเสียชีวิตได้
วัณโรคแพร่กระจายเกือบทั้งหมดผ่านเสมหะในอากาศจากผู้ป่วยวัณโรคปอด ละอองฝอยขนาดเล็กเหล่านี้สามารถตกค้างอยู่ในอากาศและแพร่เชื้อไปยังผู้ที่สูดดมเข้าไปได้
การติดเชื้อต้องอาศัยการสัมผัสเป็นเวลานานกับผู้ป่วยที่ติดเชื้อ ซึ่งขับเชื้อออกมาอย่างต่อเนื่องในสภาพแวดล้อมที่มีการระบายอากาศไม่ดี ผู้ที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่องมีแนวโน้มที่จะติดเชื้อได้มากกว่า
ผู้ป่วยเอชไอวีมีแนวโน้มที่จะเกิดการติดเชื้อทางเดินหายใจรุนแรง รวมถึงวัณโรคปอดมากกว่าประชากรทั่วไป ดังนั้น การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบสเมียร์จึงมีความสำคัญในฐานะวิธีการวินิจฉัยวัณโรคที่รวดเร็วและราคาไม่แพง
การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบสเมียร์ช่วยให้สามารถวินิจฉัยวัณโรคทางแบคทีเรียได้ อย่างไรก็ตาม จำเป็นต้องมีการยืนยันผลบวกด้วยการศึกษาอื่นๆ
การศึกษาที่ยืนยันการวินิจฉัยวัณโรค ได้แก่ การตรวจทางรังสีวิทยาที่แสดงภาพลักษณะเฉพาะในส่วนบนของปอด การทดสอบทูเบอร์คูลินให้ผลบวก และการเพาะเชื้อตัวอย่างให้ผลบวก
การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบสเมียร์ลบ
ผลการตรวจสเมียร์ที่เป็นลบไม่ได้หมายความว่าจะตัดการวินิจฉัยวัณโรคออกไปได้เสมอไป เนื่องจากเชื้อแบคทีเรียจะถูกกำจัดออกได้ไม่ทั่วถึง โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อตัวอย่างเป็นเสมหะ ดังนั้น ในกรณีเหล่านี้ หากสงสัยว่าจะวินิจฉัยได้ จำเป็นต้องใช้ตัวอย่างแบบต่อเนื่อง
การส่องกล้องตรวจเชื้อแบคทีเรียที่เป็นบวก
ผลการตรวจเสมหะด้วยกล้องจุลทรรศน์เป็นบวกบ่งชี้ถึงวัณโรค และควรได้รับการยืนยันด้วยการศึกษาเสริมอื่นๆ เมื่อผลเป็นบวก ควรทำการเพาะเชื้อและตรวจแอนติบอดี
เมื่อเริ่มการรักษาแล้ว การลดระดับผลการตรวจสเมียร์ให้เป็นบวกอย่างต่อเนื่องจนกระทั่งได้ผลเป็นลบ ช่วยให้สามารถติดตามประโยชน์ของการรักษาได้
อ้างอิง
- Aziz, MA (2002). การประเมินคุณภาพภายนอกสำหรับกล้องจุลทรรศน์ AFB
- Desikan, P. (2013). การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์เสมหะในวัณโรค: ยังมีความเกี่ยวข้องอยู่หรือไม่? วารสารวิจัยทางการแพทย์ของอินเดีย , 137 (3), 442
- Fauci, A.S., Kasper, D.L., Hauser, S.L., Jameson, J.L., & Loscalzo, J. (2012) หลักการแพทย์ภายในของแฮร์ริสัน (เล่ม 2012). DL Longo (Ed.). นิวยอร์ก: McGraw-Hill.
- Ngabonziza, J.C.S., Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M., … และ Muvunyi, C.M. (2016) ประสิทธิภาพการวินิจฉัยของกล้องจุลทรรศน์สเมียร์และผลผลิตที่เพิ่มขึ้นของ Xpert ในการตรวจหาวัณโรคปอดในรวันดา โรคติดเชื้อ BMC , 16 (1), 660
- Sardiñas, M., García, G., Rosários, MM, Díaz, R. และ Mederos, LM (2016). ความสำคัญของการควบคุมคุณภาพการส่องกล้องตรวจเชื้อแบคทีเรียในห้องปฏิบัติการที่ทำการวินิจฉัยวัณโรค Chilean Journal of Infectious Diseases: วารสารอย่างเป็นทางการของ Chilean Society of Infectious Diseases , 33 (3) 282-286
- Sequeira de Latini, MD และ Barrera, L. (2008). คู่มือการวินิจฉัยวัณโรคทางแบคทีเรียวิทยา: มาตรฐานและแนวทางทางเทคนิค: การส่องกล้องตรวจเชื้อแบคทีเรีย ส่วนที่ 1. เลขที่ คู่มือการวินิจฉัยวัณโรคทางแบคทีเรีย: มาตรฐานและแนวทางทางเทคนิค: การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบสเมียร์ส่วนที่ 1 (pp. 64-64)