Ang MRS agar ay isang selective at differential culture medium na ginagamit para sa paghihiwalay at paglilinang ng lactic acid bacteria ng Lactobacillus group. Ito ay binuo nina De Man, Rogosa, at Sharpe noong 1960 at binubuo ng isang tiyak na nutrient base na pinapaboran ang paglaki ng mga bakteryang ito kaysa sa iba pang mga mikroorganismo. Ang paghahanda nito ay nagsasangkot ng pagtunaw ng pulbos sa distilled water at isterilisado ito sa pamamagitan ng autoclaving. Ang MRS agar ay malawakang ginagamit sa microbiology ng pagkain, pagawaan ng gatas, fermentation, at biochemistry para sa pagkilala at pag-quantification ng lactic acid bacteria na pang-industriya at klinikal na kahalagahan.
Kunin ang atensyon ni Mrs. Merck sa mga mabilis at epektibong tip na ito.
Kung nais mong makuha ang atensyon ni Mrs. Merck, napunta ka sa tamang lugar. Gamit ang mabilis at epektibong mga tip na ito, epektibo mong makukuha ang kanyang atensyon. Ang isang paraan para gawin ito ay sa pamamagitan ng paggamit ng MRS Agar, isang makapangyarihang tool na makakatulong sa iyong maging kakaiba.
MRS Agar: Pundasyon, Paghahanda, at Mga Gamit
Ang MRS agar ay isang selective culture medium na ginagamit para sa paghihiwalay at paglilinang ng lactic acid bacteria ng Lactobacillus group. Ito ay binuo nina de Man, Rogosa, at Sharpe noong 1960 at mula noon ay malawakang ginagamit sa mga laboratoryo ng microbiology.
Upang ihanda ang MRS Agar, kakailanganin mong sundin ang ilang simpleng hakbang. Una, idagdag ang tamang dami ng MRS Agar powder sa distilled water at init hanggang sa ganap na matunaw. Pagkatapos, i-sterilize ang medium ng kultura sa isang autoclave at ibuhos ito sa mga Petri dish upang patigasin.
Ang MRS Agar ay may malawak na hanay ng mga gamit, kabilang ang pagtuklas at paghihiwalay ng lactic acid bacteria sa mga produkto ng pagawaan ng gatas gaya ng keso at yogurt. Maaari din itong gamitin upang pag-aralan ang gut microbiota at ang mga epekto nito sa kalusugan ng tao.
Ngayong alam mo na ang higit pa tungkol kay MRS Agar at kung paano ito gamitin, handa ka nang makuha ang atensyon ni Mrs. Merck. Tandaang sundin ang mga tip sa itaas, at sigurado kang magtatagumpay.
MRS Agar culture medium para sa paglaki ng Lactobacillus sa microbiology.
Ang MRS Agar culture medium ay isang selective medium na ginagamit para sa paglaki ng bacteria ng genus Lactobacillus sa microbiology. Ito ay binuo nina De Man, Rogosa, at Sharpe noong 1960, kaya ang acronym na MRS. Ang daluyan na ito ay binubuo ng ilang sangkap na nagbibigay ng mga sustansya na kailangan para sa paglaki ng ninanais na bakterya.
Upang ihanda ang MRS Agar culture medium, i-dissolve ang mga sangkap sa distilled water at idagdag ang agar upang patigasin ang medium. Pagkatapos ng isterilisasyon, ang daluyan ay maaaring ma- inoculate ng Lactobacillus culture at i-incubate sa isang temperatura na angkop para sa paglaki ng bacterial.
Ang MRS Agar ay isang selective medium dahil naglalaman ito ng mga substance na pumipigil sa paglaki ng mga hindi gustong bacteria, na nagpapahintulot lamang sa mga bacteria ng Lactobacillus genus na lumago. Pinapadali nito ang paghihiwalay at pagkakakilanlan ng mga bakteryang ito sa isang halo-halong sample.
Ang MRS Agar culture medium ay may malawak na hanay ng mga gamit, at malawakang ginagamit sa food microbiology, probiotics, at intestinal health studies. Ang kakayahan nitong isulong ang piling paglaki ng Lactobacillus ay ginagawang mahalaga ang daluyan na ito para sa pananaliksik at pagsubok sa laboratoryo na kinasasangkutan ng mga bakteryang ito.
MRS Culture Medium: mga pangunahing kaalaman at aplikasyon sa microbiology at biotechnology.
Ang MRS culture medium ay isang selective at differential culture medium na ginagamit sa microbiology at biotechnology para sa paglaki ng lactic acid bacteria, lalo na ang mga Lactobacillus genus. Ang acronym na MRS ay nangangahulugang "de Man, Rogosa, at Sharpe," bilang parangal sa mga mananaliksik na bumuo ng medium na ito noong unang bahagi ng 1960s.
Ang MRS culture medium ay binubuo ng kumbinasyon ng mga sustansya na nagtataguyod ng paglaki ng lactic acid bacteria, tulad ng peptone, yeast extract, ammonium citrate, magnesium sulfate, at potassium phosphate. Bukod pa rito, ang medium ay naglalaman ng pH indicator, kadalasang phenol red, na nagbibigay-daan sa amin na makilala ang pagitan ng bacteria na nagbuburo ng carbohydrates at ng hindi.
Ang paghahanda ng medium ng kultura ng MRS ay nagsasangkot ng pagtunaw ng mga sangkap sa distilled water, pagsasaayos ng pH sa humigit-kumulang 6,5 hanggang 6,8, at pag-sterilize sa pamamagitan ng autoclaving. Pagkatapos ng isterilisasyon, ang daluyan ay pinatigas sa pagdaragdag ng agar, na nagiging MRS Agar culture medium.
Ang MRS Agar ay malawakang ginagamit sa mga laboratoryo ng microbiology para sa paghihiwalay at pagtukoy ng lactic acid bacteria sa iba't ibang fermented na produkto, tulad ng mga yogurt, keso, at mga produktong karne. Higit pa rito, ginagamit din ang medium ng kultura ng MRS sa mga pag-aaral ng biotechnology, na naglalayon sa paggawa ng mga enzyme, mga organikong acid, at iba pang mga compound ng interes sa industriya.
MRS Microbiology: Mga espesyalista sa microbiological analysis upang matiyak ang kaligtasan at kalidad.
Ang MRS Microbiologia ay dalubhasa sa microbiological analysis, na tinitiyak ang kaligtasan at kalidad ng produkto. Sa mataas na kwalipikadong mga propesyonal at makabagong kagamitan, nag-aalok ang MRS Microbiologia ng mga de-kalidad na serbisyo sa iba't ibang sektor ng industriya.
Isa sa pinakamalawak na ginagamit na media ng kultura sa MRS Microbiology ay ang MRS Agar. Ang kulturang medium na ito ay binuo nina De Man, Rogosa, at Sharpe noong 1960s at malawakang ginagamit para sa paghihiwalay at paglilinang ng lactic acid bacteria, lalo na sa mga genus ng Lactobacillus.
Ang paghahanda ng MRS Agar ay medyo simple, na kinabibilangan ng pagtunaw ng pulbos sa distilled water at pag-sterilize nito sa pamamagitan ng autoclaving. Pagkatapos ng medium solidifies, handa na itong tumanggap ng mga sample para sa pagsusuri.
Ang MRS Agar ay ginagamit sa iba't ibang microbiological test, tulad ng pagbibilang ng lactic acid bacteria sa mga produkto ng pagawaan ng gatas, pagtatasa sa kalidad ng mga fermentation, at pagtukoy ng probiotic bacteria. Ang partikular na komposisyon nito ay pinapaboran ang paglaki ng ninanais na bakterya, na ginagawa itong isang pumipili at kaugalian na daluyan.
Sa madaling salita, ang MRS Agar ay isang mahalagang tool para sa mga espesyalista sa microbiology sa MRS Microbiologia, na tinitiyak ang tumpak at maaasahang pagsusuri para sa kanilang mga kliyente. Sa matibay na pundasyon nito, simpleng paghahanda, at iba't ibang gamit, ang MRS Agar ay isang kailangang-kailangan na kaalyado sa kontrol ng kalidad ng mga produktong microbiological.
MRS Agar: Pundasyon, Paghahanda, at Mga Gamit
O MRS agar ay isang selective solid medium culture na ginagamit para sa paghihiwalay at pag-enumeration ng lactic acid bacteria, lalo na ang genus Lactobacillus. Ang agar na ito ay nilikha noong 1960 nina Man, Rogosa, at Sharpe, sa ilalim ng parehong pangalan, ngunit dahil sa pagiging kumplikado nito, madalas na ginagamit ang pagdadaglat na MRS.
Binubuo ito ng protein peptone, meat extract, yeast extract, glucose, sorbitan monoleate, dipotassium phosphate, sodium acetate, ammonium citrate, magnesium sulfate, manganese sulfate at agar.
Ang komposisyon na ito ay nagbibigay-daan sa mahusay na pag-unlad ng lactic acid bacteria mula sa mga klinikal na sample tulad ng feces, vaginal discharge, oral sample at gatas ng ina, pati na rin ang mga dairy food at karne.
Ito ay hindi karaniwang ginagamit sa mga klinikal na laboratoryo dahil ang lactic acid bacteria ay bihirang kasangkot sa mga proseso ng pathological. Gayunpaman, sa larangan ng microbiology ng pagkain, ang MRS agar ay mas madalas na ginagamit.
Sa kabilang banda, ang medium na ito ay ginagamit ng ilang Research Centers, na ang layunin ay pag-aralan ang lactic acid bacteria.
Pundasyon
Ang Man, Rogosa, at Sharpe agar ay may medyo kumplikadong komposisyon. Sa pamamagitan ng paghahati-hati sa tungkulin ng bawat bahagi nito, maipaliwanag ang lohika nito.
Ang protein peptone, meat extract, yeast extract, at glucose ay mga sustansya na nagbibigay ng carbon, nitrogen, bitamina, at mineral na kailangan para sa paglaki ng bacterial. Higit pa rito, ang glucose ay ang unibersal na mapagkukunan ng enerhiya na ginagamit sa karamihan ng media ng kultura.
Sa kabilang banda, upang paboran ang paglaki ng lactic acid bacteria, ang pagkakaroon ng mahahalagang cofactor (cations) sa metabolismo ng Lactobacillus at mga kaugnay na bacteria ay kinakailangan; ang mga compound na ito ay sodium, magnesium at manganese salts.
Katulad nito, ang sorbitan monoleate o polysorbate 80 ay isang mahalagang pinagmumulan ng mga fatty acid kapag hinihigop bilang mga sustansya.
Higit pa rito, ang sorbitan monoleate at ammonium citrate ay kumikilos sa pamamagitan ng pagpigil sa pagbuo ng mga nauugnay na flora, lalo na ang Gram-negative bacteria, na nagbibigay ng pumipiling katangian ng agar na ito.
Sa wakas, ang agar-agar ay ang nagbibigay sa daluyan ng solidong pagkakapare-pareho.
Mayroong iba pang mga variant ng Man Rogosa Sharpe agar; ang isa ay cysteine-supplemented (MRSc), lubhang kapaki-pakinabang para sa paghihiwalay ng bifidobacteria, bukod sa iba pang mga microorganism. Sa kabilang banda, mayroong MRS medium na dinagdagan ng neomycin, paromomycin, nalidixic acid, at lithium chloride, lalo na para sa piling pagbibilang ng bifidobacteria sa mga produkto ng pagawaan ng gatas.
Paghahanda
Timbangin ang 68,25 gramo ng dehydrated medium at i-dissolve sa isang litro ng distilled water. Hayaang tumayo ng 5 minuto. Upang ganap na matunaw, init sa katamtamang init, patuloy na pagpapakilos, at pakuluan ng 1 hanggang 2 minuto. I-sterilize sa isang autoclave sa 121°C sa loob ng 15 minuto.
Pagkatapos alisin mula sa autoclave, hayaan itong magpahinga ng ilang minuto at ipamahagi ito habang mainit pa sa mga sterile Petri dish.
Hayaang patigasin at baligtarin ang mga plato, i-order ang mga platelet, at iimbak sa refrigerator hanggang magamit. Hayaang maabot ng mga plato ang temperatura ng silid bago gamitin ang mga ito.
Ang pH ng medium ay dapat na 6,4 ± 0,2. Inirerekomenda ng ilang komersyal na bahay ang pH sa pagitan ng 5,5 at 5,9.
Ang dehydrated medium ay beige at ang inihanda ay dark amber.
Ang dehydrated medium at handa na mga plato ay dapat na nakaimbak sa 2 hanggang 8 °C.
Mga Paggamit
Ang mga MRS agar plate ay maaaring surface-seeded (depletion o gamit ang Drigalski spatula). Maaari rin silang maging deep-seeded. Ang mga plato ay dapat na incubated sa 37°C sa isang microaerophilic na kapaligiran (4% O 2 at 5-10% CO 2 ) sa loob ng 24 hanggang 72 oras.
Ang paraan ng pagtatanim ay pinili ayon sa nilalayon na layunin (paghihiwalay o pagbibilang).
Mga katangian ng kolonya
Ang mga inaakalang kolonya ng Lactobacillus ay lumalaking maputi-puti at may mucoid o creamy na anyo sa agar na ito. Dapat silang makilala sa ibang pagkakataon.
Paghihiwalay ng lactic acid bacteria
Para sa layuning ito, ginagamit ang surface seeding. Ang mga sample na bubulaanan ay nangangailangan ng paunang pamamaraan.
Para sa mga sample ng gatas ng ina, inirerekomendang i-centrifuge ang 1 ml ng sample sa 14.000 rpm sa loob ng 10 minuto upang maalis ang mataba na layer. Ang 900 µl ay itinapon, at ang natitirang 100 µl ay sinuspinde sa sediment at ibinuhos sa ibabaw ng MRS agar, kung saan dapat itong ipamahagi nang pantay-pantay gamit ang isang Drigalski spatula.
Sa kaso ng mga sample ng dumi, isang (1) gramo ng dumi ay tinimbang at homogenized sa 9 mL ng sterile 0,1% peptone na tubig, na tumutugma sa isang 1/10 dilution. Ang mga serial dilution ay ginagawa hanggang makuha panghuling pagbabanto ng 10 -4 .
Sa wakas, 100 μl ng 10 dilutions -2 , 10 -3 e 10 -4 ay kinokolekta at ang bawat dilution ay nilagyan ng MRS agar, na ibinahagi nang pantay-pantay gamit ang isang Drigalski spatula.
Bilang ng bakterya ng lactic acid
Sa kasong ito, ang paghahasik ay ginagawa nang malalim.
Para sa mga sample ng gatas ng ina, 1 mL ay kinokolekta at inilagay sa isang sterile conical plastic tube. Ang MRS agar ay idinagdag sa humigit-kumulang 40°C hanggang sa huling dami ng 25 mL, na nakakakuha ng homogenous na timpla. Pagkatapos ay ibinubuhos ito nang pantay-pantay sa mga sterile Petri dish at pinahihintulutang tumayo hanggang sa mangyari ang polimerisasyon.
Para sa mga sample ng dumi, ang mga dilution ay ginawa tulad ng inilarawan sa itaas. Ang isang mL ng bawat pagbabanto ay kinuha at inilagay sa mga sterile na plastik na conical tubes. Ang molten MRS agar ay idinagdag sa dami ng 1 mL.
Ang halo ng bawat pagbabanto ay ibinubuhos nang pantay-pantay sa mga sterile Petri dish. Sa wakas, hayaan itong magpahinga hanggang sa mangyari ang polimerisasyon.
Sa antas ng pananaliksik
Ang pag-aaral ng lactic acid bacteria ay nagiging lalong kawili-wili araw-araw; partikular na interesado ang mga mananaliksik sa paggalugad ng mga bagong strain at ang kanilang potensyal bilang panimulang kultura para sa standardisasyon sa produksyon ng pagawaan ng gatas, bukod sa iba pang gamit.
Sa ganitong diwa, Alvarado et al. (2007) ginamit ang MRS agar upang magsagawa ng isang pag-aaral kung saan sila ay naghiwalay, nakilala at nailalarawan ang lactic acid bacteria na nasa isang tradisyonal na Andean na pinausukang Venezuelan na keso.
Sa keso, natagpuan nila ang pagkakaroon ng bakterya mula sa genera na Lactococcus at Lactobacillus, at napagpasyahan na ang mga mixtures ng mga nakahiwalay na strain ay angkop bilang mga paunang strain sa paggawa ng mga keso mula sa pasteurized na gatas.
Sa kabilang banda, Sánchez et al. (2017) ginamit ang MRS agar upang siyasatin ang pagkakaroon ng lactic acid bacteria sa digestive tract ng mga biik, upang gamitin ang mga ito bilang mga katutubong probiotic na nagpapataas ng produktibidad ng malusog na mga biik.
Sa pamamagitan nito, nagawa nilang ihiwalay ang apat na species: Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus brevis, Enterococcus hirae e Pediococcus pentosaceus.
Katulad nito, Báez et al. (2019) ginamit ang MRS agar upang suriin ang lactic acid bacteria (LAB) at bifidobacteria na may potensyal na probiotic sa gatas ng ina at feces ng sanggol.
Nagawa nilang ihiwalay ang 11 BAL at 3 Bifidobacteria sp sa gatas ng ina at 8 BAL at 2 Bifidobacteria sp . sa stool Natugunan ng lahat ang ilang partikular na parameter na nagpapakilala sa kanila bilang bacteria na may aktibidad na probiotic.
Napagpasyahan ng mga may-akda na ang gatas ng ina at mga dumi mula sa eksklusibong mga sanggol na pinasuso ay nagsisilbing natural na pinagmumulan ng probiotic bacteria.
Kontrol sa kalidad
Upang masuri ang kalidad ng MRS agar, kontrolin ang mga strain gaya ng:
Lactobacillus fermentum ATCC 9338, Lactobacillus casei ATCC 393, Bifidobacterium bifidum ATCC 11863, Lactobacillus plantarum MKTA 8014, Lactobacillus lactis MKTA 19435, Pediococcus damnosus MKTA 29358, Escherichia cereus at Bacillus cereus .
Ang mga inaasahang resulta ay kasiya-siyang paglago para sa unang 6 na bakterya, habang E. coli e Bacillus Cereus dapat ganap na pigilan.
Mga sanggunian
- Alvarado C, Chacón Z, Otoniel J, Guerrero B, López G. Paghihiwalay, pagkilala at paglalarawan ng lactic acid bacteria mula sa Venezuelan Andean artisan na pinausukang keso. Ang paggamit nito bilang paunang pag-aani. Cem (Maracaibo) 2007; 17 (3): 301-308. Makukuha sa: scielo.org.
- Sánchez H, Fabián F, Ochoa G, Alfaro Paghihiwalay ng lactic acid bacteria mula sa digestive tract ng mga biik. Veterinary Invest. Rev. Peru 2017; 28 (3): 730-736. Makukuha sa: scielo.org.
- Báez E, González G, Hernández G, López E, Mega M. Pagsusuri ng lactic acid bacteria at bifidobacteria na may potensyal na probiotic sa gatas ng ina at feces ng sanggol sa munisipalidad Acevedo, Miranda 2017. Undergraduate na trabaho upang maging kwalipikado para sa Bachelor's Degree sa Bioanalysis University of Carabobo, Venezuela
- British Laboratory Agar MRS 2015. Magagamit sa: britanialab.com
- Mga Contributor ng Wikipedia. Agar MRS Wikipedia, Ang Libreng Encyclopedia. Enero 10, 2018, 19:44 PM UTC. Makukuha sa: wikipedia.org Na-access noong Pebrero 17, 2019.
- Roy D. Media para sa paghihiwalay at enumeration ng bifidobacteria sa mga produkto ng pagawaan ng gatas. Int J Food Microbiol, 200128; 69 (3): 167-82.