MIO 培养基:基础、制备和用途

最后更新: 2月21,2024
作者: y7rik

“MIO培养基”是指一种被称为“基本矿物质培养基”的培养基,其成分基于实验室微生物生长所需的必需营养素。该培养基的研发旨在为科学研究中的细菌、真菌和其他微生物的生长发育提供理想的条件。本文将探讨MIO培养基的原理、制备方法以及它在微生物学中的主要用途。

Mio 介质在烹饪和制作饮料中有何用途?

Mio培养基是一种用途广泛的配料,可用于烹饪和饮料制作等多种用途。Mio培养基由卡夫食品于2011年研发,是一种浓缩液体,可为菜肴和饮料增添风味和色彩。

在烹饪中,Mio酱可以为腌料、酱汁、汤品甚至甜点增添独特的风味。它的实用性和多功能性使其成为厨师和美食爱好者厨房中不可或缺的食材。

在饮料制作中,Mio 广泛用于调味水、果汁、茶,甚至酒精饮料。只需几滴,就能将简单的饮料变成独特的感官体验。

Mio 也可以用来制作创意美味的甜点,例如冰淇淋、果冻和慕斯。它丰富的口味让您可以探索不同的组合,给您的味蕾带来惊喜。

简而言之,Mio 是厨师和调酒师打造美味创意菜肴和饮品的得力助手。它实用且用途广泛,是任何厨房或酒吧不可或缺的调酒工具。快来体验 Mio,探索它的无限可能!

吲哚测试在细菌鉴定中的应用:程序和在微生物学中的重要性。

吲哚试验是一种基于吲哚酶的产生来鉴定细菌的方法。这种酶能够将色氨酸代谢为吲哚、乙酸和氨。该技术在特定的培养基中进行,例如吲哚、鸟氨酸和运动培养基 (MIO),用于区分革兰氏阴性细菌(例如大肠杆菌)与其他菌种。

进行吲哚试验时,将细菌培养物接种到MIO培养基中,并在适当的温度下孵育。孵育后,加入Kovacs试剂,该试剂与细菌产生的吲哚发生反应,形成粉红色复合物。这种颜色的存在表明有吲哚的产生,从而表明存在负责产生吲哚的酶。

吲哚检测在微生物学中至关重要,因为它可以根据细菌的生化特性进行鉴定。此外,它是一种快速有效的区分细菌种类的方法,有助于诊断感染并选择合适的治疗方法。

逐步指导如何有效、准确地进行吲哚测试。

为了有效、准确地进行吲哚测试,请遵循以下步骤:

步骤1: 按照制造商的说明准备MIO培养基。务必遵循正确的比例和灭菌条件。

步骤2: 配制好MIO培养基后,将待测样品加入试管中。确保样品充分混合。

步骤3: 按照 MIO 培养基制造商的建议,在最佳温度和时间条件下孵育试管。

步骤4: 培养期结束后,向试管中加入几滴吲哚试剂。仔细观察培养基表面是否有颜色变化或环状结构形成。

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步骤5: 将所得结果与吲哚试验结果解释图进行比较。准确、详细地记录结果。

吲哚试验在微生物学中被广泛用于鉴定能够从氨基酸色氨酸中产生吲哚的细菌。它是一种根据细菌代谢特性区分不同类型细菌的有效且准确的方法。

微生物学中的吲哚:定义和在识别细菌中的重要性。

吲哚在微生物学中的作用: 吲哚是某些细菌在氨基酸代谢过程中产生的一种有机化合物。细菌产生吲哚的能力可以作为其鉴定和分类的重要标准。

鉴定细菌的重要性: 细菌是否产生吲哚可以通过特定的生化检测方法检测,例如科瓦奇试验。吲哚的存在与否有助于区分不同的细菌属和种,从而有助于微生物的鉴定和分类。

MIO 培养基:基础、制备和用途。

O 半 MIO (吲哚-鸟氨酸培养基)是一种用于检测吲哚生成量和细菌代谢鸟氨酸能力的培养基。该培养基含有促进吲哚阳性细菌生长的特定营养成分。

MIO培养基的制备: MIO培养基的制备包括将蛋白胨、氯化钠、酵母提取物、琼脂和其他提供细菌生长所需营养的成分混合。然后将培养基灭菌并在培养皿中固化,以用于细菌鉴定测试。

MIO介质的用途: MIO培养基常用于微生物实验室,根据细菌的吲哚生成和鸟氨酸代谢来鉴定细菌。通过观察MIO培养基的检测结果,微生物学家可以根据细菌的生化特性对其进行分类和区分。

MIO 培养基:基础、制备和用途

O 半个 MIO 是一种用于帮助鉴定肠杆菌科细菌种类的生化检测试剂。它营养丰富,由葡萄糖、酵母提取物、蛋白胨、角蛋白、L-鸟氨酸盐酸盐、溴甲酚紫和琼脂组成。

其首字母缩写词 (MIO) 的含义描述了该培养基中可观察到的各个参数:运动性、吲哚和鸟氨酸。运动性是指微生物在鞭毛存在下移动的能力。为了观察到这一特性,培养基的稠度必须为半固体,以便制剂中琼脂含量较少。

MIO介质中结果解释图。资料来源:作者Marielsa Gil(理学硕士)编写

吲哚的产生证实了色氨酸酶的存在,该酶作用于氨基酸色氨酸。需要使用显色剂才能使吲哚的产生过程可见。

最后,鸟氨酸决定了细菌是否有能力将氨基酸脱羧,也就是是否具有鸟氨酸脱羧酶这种酶。

基础

蛋白胨、酵母提取物和胰蛋白酶

这些元素构成了该培养基的营养价值,它们是细菌生长所需的营养物质和必需氨基酸的来源。

此外,色氨酸是色氨酸的来源,以显示色氨酸酶的存在,该酶通过还原脱氨作用降解色氨酸,释放吲哚、丙酮酸、氨和能量。

吲哚是无色的,因此通过添加五滴 Ehrlich 试剂或 Kovacs 试剂(均含有对二甲氨基苯甲醛)即可发现其存在。

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该化合物的醛基与吲哚发生反应,在琼脂表面生成紫红色环状产物。

任何颜色痕迹都应视为阳性。应立即读取测试结果;随着时间的推移,颜色会逐渐褪去。

另一方面,应在记录运动能力和鸟氨酸脱羧的结果后才揭示此项测试。

解释

阳性检测结果: 通过添加几滴科瓦奇试剂,形成紫红色环。

阴性测试: 没有形成环。

运动能力

如果观察到浑浊的环境或在初始接种周围出现粗生长线,则证明细菌具有移动能力。

如果观察到细长的生长线,则表明运动测试结果为阴性,并且其周围的一切都没有生长。

在显影吲哚之前读取运动能力非常重要,因为试剂聚集体会模糊整个培养基。

对于具有运动能力但生长缓慢的细菌,很难用该培养基证明其运动能力。在这种情况下,建议使用其他测试或方法,例如运动培养基或滴悬法。

葡萄糖

葡萄糖是一种可发酵的碳水化合物,除了提供能量外,还能使培养基酸化,这是氨基酸鸟氨酸脱羧的必要条件。

葡萄糖发酵必须始终发生,这是基于所有属于肠杆菌科的细菌都会发酵葡萄糖的原理。

L-鸟氨酸

如果细菌产生鸟氨酸脱羧酶,那么只要培养基通过葡萄糖发酵而酸化,它就能发挥作用。

鸟氨酸脱羧酶作用于氨基酸的羧基,产生一种叫做腐胺的胺,使培养基再次碱化。

该测试应在孵育 24 小时后读取,因为如果您尝试在此之前读取,则可能会误解测试结果并得出假阴性。

请记住,首先发生的反应是葡萄糖发酵,因此培养基最初(前10到12小时)会变黄。如果之后发生鸟氨酸脱羧,培养基会变成紫色。

在揭示吲哚之前解释鸟氨酸脱羧试验非常重要,因为科瓦奇试剂聚集体会改变培养基的颜色。

解释

阴性测试: 黄色或中黄色背景。

阳性检测结果: 一半完全是紫色。

pH 指示剂

在这种情况下,使用溴甲酚紫;它负责检测培养基pH值的变化。酸性条件下,指示剂会变成黄色;碱性条件下,指示剂会变成紫色。

播种和发育技术

为了接种 MIO 培养基,使用针或直环并收集要研究的一部分菌落。

在中前下腔静脉沿直线进行深穿刺。不建议进行双重穿刺,因为如果穿刺位置不在同一位置,可能会造成动脉活动性的假象。

24°C有氧培养48至37小时。按以下顺序观察结果:运动能力、鸟氨酸脱羧、最后吲哚显露。

建议以无菌方式取出 2 毫升培养基,将其转移到无菌管中并进行吲哚测试,如果结果为阴性,则可以将原管的剩余部分再孵育 24 小时,以再次显示吲哚。

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吲哚显影方法如下:将3至5滴Kovacs试剂加入MIO培养基中,剧烈摇晃,观察是否出现紫红色环。

制备

我的一半

称取 31 克 MIO 介质并溶解在一升蒸馏水中。

加热至混合物沸腾一分钟,不断搅拌直至琼脂完全溶解。将4毫升培养基分装到13/100个带棉帽的试管中。

放入高压灭菌器,121°C 灭菌 15 分钟。从高压灭菌器中取出,静置在架子上,使其形成半固体块。

储存于2-8°C冰箱中。待其冷却后再接种菌株。

脱水培养基的颜色为米色,制备好的培养基的颜色为略带乳白色的紫色。

配制培养基的最终pH值为6,5±0,2

培养基在酸性 pH 值下变黄色,在碱性 pH 值下变紫色。

Kovacs试剂(吲哚测试显影剂)

该试剂制备如下:

量取150 ml戊醇、异戊醇或丁醇(三者任选),溶解10 g对二甲氨基苯甲醛,然后缓慢加入50 ml浓盐酸。

配制后的试剂为无色或淡黄色。应储存于琥珀色瓶中并冷藏。深棕色表示试剂已变质。

科瓦奇试剂也可以用埃尔利希试剂代替。后者灵敏度更高,更适合检测产吲哚量极少的细菌中的吲哚,例如一些非发酵性革兰氏阴性杆菌和一些厌氧菌。

绝大部分储备使用

该培养基是对一系列生化测试的补充,用于鉴定属于肠杆菌科的细菌。

鸟氨酸脱羧数据有助于区分 宋内志贺氏菌, 这是积极的, 志贺氏杆菌、弗氏志贺氏杆菌和痢疾杆菌, 这些都是负面的。

它还将呈阴性的克雷伯氏菌属与大多数种类呈阳性的肠杆菌属区分开来。

来源:Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). 微生物诊断,第5版。Panamericana SA 阿根廷编辑部。

质量控制

每次制备一批MIO培养基时,都可以进行对照测试。为此,我们使用已知或经过认证的菌株来观察培养基的行为。

可以使用的菌株是 大肠杆菌、摩根氏菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌 e 奇异变形杆菌。

预期结果是 大肠杆菌和摩根氏体。 它们给出 M: +、I: + 和 O: +。

肺炎克雷伯氏菌 一切都是负面的(M:-,I:-,O:-)。 变形杆菌 e 产气肠杆菌 提供 M: + I: – 和 O: +。

参考文献

  1. Mac Faddin J. (2003). 用于鉴定临床重要细菌的生化检测。第三版。泛美出版社。阿根廷布宜诺斯艾利斯
  2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott 微生物诊断。第 12 版。Panamericana SA 阿根廷分社。
  3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004).微生物诊断,第5版。Panamericana SA 阿根廷编辑部。
  4. 英国实验室。MIO Medio 2015。网址:britanialab.com
  5. BD Laboratories BBL Motility Indole Ornithine (MIO) 培养基。2007年。网址:bd.com
  6. Valtek Laboratories MIO培养基,动力、吲哚、鸟氨酸。2010年。网址:andinamedica.com