吉姆薩染色是一種用於微生物學和細胞遺傳學的技術，用於對細胞和組織進行染色，從而實現特定結構的可視化。吉姆薩染色由古斯塔夫·吉姆薩於1904年發明，是診斷實驗室中用於鑑定微生物、寄生蟲和染色體的最廣泛使用的技術之一。
吉姆薩染色需要吉姆薩染料、甲醇和蒸餾水等材料。此技術需要將細胞固定到玻片上，然後使用甲醇稀釋的吉姆薩染料進行染色。染色後，用蒸餾水清洗細胞，並在顯微鏡下觀察。
吉姆薩染色的主要用途包括鑑定病原體，例如瘧原蟲（導致瘧疾）、錐蟲（導致恰加斯病）以及細菌，例如衣原體和立克次體。此外，吉姆薩染色也廣泛用於染色體分析，以診斷遺傳疾病和識別染色體異常。
逐步指導如何有效地進行吉姆薩染色。
吉姆薩染色是臨床分析和研究實驗室中必不可少的技術。它透過對各種細胞結構（例如染色體、寄生蟲和細菌）的成分進行特異性染色，使其可視化。本文將逐步說明如何有效地進行吉姆薩染色。
步驟1： 準備吉姆薩溶液，可以購買現成的，也可以用粉末製備。應按照製造商建議的比例用蒸餾水稀釋溶液。
步驟2： 使用加熱或固定劑（例如乙醇）將樣品固定在玻璃載玻片上。確保樣品固定牢固，以免染色過程中變形。
步驟3： 用吉姆薩溶液覆蓋固定的標本，確保整個表面均勻覆蓋。讓載玻片與溶液接觸一段時間，通常為10至30分鐘。
步驟4： 用流水沖洗載玻片，去除多餘的污漬。用吸水紙或壓縮空氣輕輕擦乾載玻片。
步驟5： 使用合適的放大鏡在光學顯微鏡下觀察染色樣本。吉姆薩染色可以使細胞結構更清晰、對比更高。
吉姆薩染色廣泛應用於生物學和醫學的各個領域，例如診斷寄生蟲疾病、分析血球以及鑑定感染原。正確遵循上述步驟，即可獲得準確可靠的吉姆薩染色結果。
了解吉姆薩染色過程及其詳細工作原理。
吉姆薩染色是一種廣泛用於微生物學和血液學實驗室的染色方法，用於觀察細胞結構和檢測病原體。此方法由古斯塔夫·吉姆薩於1902年發明，基於鹼性和酸性染料對不同細胞成分的親和力。
吉姆薩染色所需材料包括吉姆薩染料、固定液和脫色液、玻片、蓋玻片和顯微鏡。吉姆薩染料是亞甲基藍、伊紅和甘油的混合物，用於染色細胞的細胞核和細胞質結構。
吉姆薩染色技術是將細胞固定到玻片上，然後施加吉姆薩染色劑一段時間。染色後，用蒸餾水清洗細胞並進行脫色以去除多餘的染料。最後，將載玻片乾燥並在顯微鏡下觀察。
吉姆薩染色的主要用途包括鑑定血源性寄生蟲，如瘧原蟲，以及分化週邊血液抹片中的血球。此外，此方法也廣泛應用於臨床樣本中細菌、病毒和其他病原體的鑑定。
其操作基於鹼性和酸性染料與不同細胞成分的親和力，在顯微鏡下提供清晰、詳細的圖像。
了解吉姆薩染色的病理解剖過程，以用於臨床分析。
吉姆薩染色是解剖病理學中用於臨床分析組織樣本的技術。該染色法由德國科學家古斯塔夫·吉姆薩 (Gustav Giemsa) 發明，因其能夠突出顯示各種細胞成分（例如細胞核、染色體和寄生蟲）而廣泛應用。
吉姆薩染色需要一些材料，包括吉姆薩染料、甲基化酒精、生理食鹽水和玻片。染色步驟包括：用甲基化酒精固定樣本，塗抹吉姆薩染料，然後用生理食鹽水清洗。染色後，在顯微鏡下觀察樣本進行分析。
吉姆薩染色廣泛應用於解剖病理學實驗室，用於識別各種病理，例如寄生蟲感染、白血病和自體免疫疾病。該技術可以對細胞結構進行詳細分析，從而促進臨床診斷和治療監測。
它的使用對於各種疾病的診斷和治療至關重要，使其成為醫療保健專業人員不可或缺的技術。
鑑定用於染色血液塗片的染料。
吉姆薩染色是觀察血液抹片中不同類型血球的常用方法。該過程中使用的主要染料是 吉姆薩染色，它是亞甲藍、伊紅和天青 B 的混合物。這種染料對染色細胞核、染色體和細胞質內含物等結構特別有效。
吉姆薩染色：基礎、材料、技術與用途
O 吉姆薩染色 是一種用於臨床樣本的染色方法，以酸性和鹼性染料混合物為基礎。它的發明靈感源自於羅曼諾夫斯基（Romanowsky）的研究，德國化學家兼細菌學家古斯塔夫·吉姆薩（Gustav Giemsa）透過添加甘油來穩定化合物，使其更加完善。
對 Romanowsky 原始技術所做的改變使我們能夠顯著改善顯微鏡觀察；因此，該技術被命名為吉姆薩染色。
由於它是一種簡單、強大且經濟的技術，目前廣泛應用於臨床實驗室的血液抹片、骨髓樣本和組織切片。
吉姆薩染色技術在細胞學研究中非常有用，因為它可以觀察特定的細胞結構。此技術可以染色細胞的細胞質、細胞核、核仁、液泡和顆粒，從而能夠區分染色質的細微痕跡。
此外，還可以檢測到細胞核的大小、形狀或顏色的顯著變化，從而可以看到細胞核與細胞質關係的喪失。
另一方面，它可以識別骨髓和周邊血液中的未成熟細胞，這對於白血病等嚴重疾病的診斷至關重要。它還可以檢測血液寄生蟲、細胞外和細胞內細菌、真菌和其他病原體。
在細胞遺傳學中，它被廣泛應用，因為可以研究細胞有絲分裂。
吉姆薩染色基礎
羅曼諾夫斯基型染色劑利用酸性染料和鹼性染料的對比，分別對鹼性結構和酸性結構進行染色。由此可見，酸性染料對鹼性結構具有親和力，反之亦然。
所使用的鹼性染料是亞甲基藍及其氧化衍生物（天青 A 和天青 B），而酸性染料是伊紅。
細胞的酸性結構是核酸、分段嗜鹼性粒細胞顆粒等，因此它們被亞甲藍染色。
同樣，細胞的基本結構是血紅蛋白和一些顆粒，例如分節嗜酸性粒細胞中所含的顆粒等；這些將被伊紅染色。
另一方面，由於亞甲基藍和天藍具有異染性染料的特徵，它們可以根據其所具有的多陰離子電荷為不同的結構提供可變的色調。
這就是鹼性和酸性染料的策略組合如何根據每種結構的生化特性產生廣泛的顏色範圍，從酸性結構的淡藍色、深藍色、淡紫色和紫色。
雖然伊紅提供的顏色更穩定，但它會產生介於紅橙色和橙紅色之間的顏色。
，材料
製備原液的材料
製備原液需秤取600mg吉姆薩粉染劑，量取500ml不含丙酮的甲醇，50ml中性甘油。
製備原液的方法
將稱好的吉姆薩粉放入研缽中。如有結塊，應將其粉碎。然後，加入適量已稱量的甘油，充分混合。將混合物倒入一個非常乾淨的琥珀色瓶中。
將剩餘的甘油加入研缽中。再次攪拌，去除黏附在研缽壁上的染料，然後將其倒入同一個瓶子中。
將瓶子蓋好，放入2°C的水浴中運送55小時。在水浴中，每半小時輕輕攪拌一次混合物。
待混合物冷卻後，再加入酒精。先將一定量的酒精加入研缽中，徹底洗去殘留的染料，再與剩餘的酒精一起加入混合物中。
此製劑應放置至少兩週使其成熟。母液中使用的部分應進行過濾。
為避免製劑污染，建議將經常使用的試劑轉移到一個帶有滴管的琥珀色小瓶中。每次試劑用完後，請重新加註。
製備緩衝溶液的材料
另一方面，pH 值為 7,2 的緩衝溶液製備如下：
6,77 克磷酸鈉（無水）（稱量 NaHPO 4 )、2,59克磷酸二氫鉀(KH 2 PO 4 )和蒸餾水至1000毫升。
最終染料製備
配製最終染色溶液：量取2 ml過濾後的原液，與6 ml緩衝液混合，搖勻。
必須考慮的一個相關事實是，染料製備技術可能會根據商業安裝而改變。
著色所需的額外材料
除了所描述的材料外，還必須有彩色橋樑、裝有水的 T 卹或用於洗衣服的衛生棉條、帶有物體或蓋子的床單、用於控制著色時間和吸墨紙的計時器或一些用於乾燥的材料（紗布或棉花）。
技術
著色過程
1) 染色前，必須將樣本鋪在乾淨的玻片上。
樣本可以是血液、骨髓、組織切片或子宮頸陰道樣本。建議將糊劑稀釋，靜置1至2小時後再進行染色。
2) 將所有彩色的葉子放在一座著色橋上。它總是按照相同的順序工作，並且每片葉子都有清晰的標籤。
3) 將幾滴100％甲醇（甲醇）滴在塗片上，靜置3至5分鐘，以固定和脫水樣本。
4) 丟棄葉子上的甲醇並讓其風乾。
5) 乾燥後，用滴管將最終的染色液滴入，直到覆蓋整片葉子。靜置15分鐘。有些作者建議最多25分鐘。具體時間取決於商店。
6) 吸乾污漬，並用蒸餾水或7.2的緩衝液清洗塗片。
7) 將葉子放在吸水紙上，以支架垂直排列，讓其風乾。
8) 用沾滿酒精的紗布墊或棉花棒擦拭載玻片背面，以去除任何染料。
公用事業
吉姆薩染色技術用於多個領域，包括：血液學、真菌學、細菌學、寄生蟲學、細胞學和細胞遺傳學。
血液學
這是此染色劑最常見的用途。它可以識別骨髓或週邊血液樣本中的每個細胞。除了估算每個系列中的細胞數量外，它還可以檢測白血球增多或減少、血小板減少等。
由於它對識別未成熟細胞非常敏感，因此可用於診斷急性或慢性白血病。它還可以診斷鐮狀細胞疾病等貧血症。
真菌學
在這個領域，通常使用 組織胞漿菌（capsoplasma capsulatum） （細胞內二態真菌）在組織樣本中。
細菌學
在用吉姆薩染色的血液抹片中，可以檢測到 伯氏疏螺旋體屬 在患有回歸熱的患者中。在發燒高峰期採集的樣本中，紅血球中大量觀察到螺旋體。
也可以將細胞內細菌可視化為 立克次體 e 沙眼衣原體 在受感染的細胞中。
寄生蟲學
在寄生蟲學領域，吉姆薩染色可以診斷瘧疾、恰加斯病和利甚曼病等寄生蟲疾病。
在前兩種寄生蟲中， 瘧原蟲 e 克氏錐蟲， 分別可見於感染患者的周邊血液中，並可根據疾病的階段找到不同的階段。
為了提高在血液中尋找寄生蟲的效果，建議使用吉姆薩染色劑與 May-Grünwald 染色劑混合。
類似地，可以透過評估發現寄生蟲的吉姆薩染色的皮膚活檢樣本來診斷皮膚利甚曼病。
細胞學
吉姆薩染色也用於子宮頸管樣本的細胞學研究，儘管它不是用於此目的的最廣泛使用的技術。
然而，在資源匱乏的情況下，可以使用這種方法，它具有與巴氏抹片類似的功能，而且成本更低。然而，這種方法需要檢查人員的專業知識。
細胞遺傳學
吉姆薩染色的一個關鍵特性是它能夠與富含腺嘌呤和胸腺嘧啶的DNA區域緊密結合。這使得在細胞有絲分裂過程中，DNA在不同凝聚狀態下能夠被視覺化。
這些研究對於檢測色差（例如染色體不同區域的重複、缺失或易位）是必要的。
證明吉姆薩染色有效性的研究
Cannova 等人（2016 年）比較了三種用於診斷皮膚利甚曼病的染色技術。
為此，使用了從實驗動物身上取得的樣本（ 鯽魚 實驗性地接種了利甚曼病。
作者證明了吉姆薩染色優於Pap-mart®和Gaffney染色。因此，他們認為吉姆薩染色是診斷皮膚利甚曼病的理想方法。
作者所獲得的優異結果是由於構成吉姆薩混合物的染料組合具有產生良好對比的必要條件，從而可以清楚地區分細胞內和細胞外的無鞭毛體結構。
其他技術（Pap-mart® 和 Gaffney）也能做到這一點，但效果較弱，因此更難顯影。這就是為什麼推薦使用吉姆薩染色法進行利甚曼病的寄生蟲學診斷。
同樣，Ramírez 等人（1994 年）的研究評估了結膜塗片中 Giemsa 和 Lendrum 染色法在鑑定 沙眼衣原體。
作者確定吉姆薩染色和萊德魯姆染色具有相同的特異性，但吉姆薩染色被證明更敏感。
這解釋了為什麼吉姆薩染色目前最常用於診斷披衣菌感染，特別是在資源匱乏的環境中。
良好著色的建議
葉子不宜乾燥過快。應等待適當的時間，讓其自然風乾。大約2小時。
為獲得最佳效果，2 小時後立即染色。
為了使污漬更好地固定和混合，應將樣品均勻地薄薄地舖在床單上。
首選的血液樣本是毛細管血樣，因為塗片直接從一滴血中取出，因此樣本不含任何添加劑，有利於維持細胞結構。
然而，如果使用靜脈血，則應使用 EDTA 作為抗凝血劑，而不是肝素，因為後者通常會使細胞變形。
吉姆薩染色的常見錯誤
使用這種著色技術時，難免會出現錯誤，例如結構色調的突然變化。
極藍的顏色
可能是因為：
- 非常厚的污漬
- 超過著色時間
- 清洗不充分。
- 使用 pH 值遠高於中性（鹼性）的試劑。
在這些條件下，以下結構的顏色會失真，因此紅血球不會染成鮭魚粉紅色，而是變成綠色，嗜酸性粒細胞顆粒應該染成磚紅色，會變成藍色或灰色，等等。偏離通常的色調。
過度粉紅色
可能是因為：
- 染色時間不足。
- 長時間或過度清洗。
- 不太乾
- 使用酸性極強的試劑。
在這種特定情況下，通常呈藍色的結構幾乎看不見，而呈粉紅色的結構則會具有非常誇張的色調。
例如：紅血球會呈現鮮紅色或深橙色，核染色質會呈現淡粉紅色，嗜酸性粒細胞顆粒會染成鮮紅色。
塗片中存在沉澱物
原因可能如下：
- 使用髒的或洗得很差的床單。
- 不要讓污漬完全乾燥。
- 將定影液放置較長時間。
- 染色結束時清洗不當。
- 所用染料過濾不充分或沒有過濾。
存在形態偽影
染色過程中可能會出現形態學偽影，導致結構難以觀察與解讀。這是因為：
- 使用的抗凝血劑類型，例如肝素。
- 使用髒的、受損的或油性的葉子。
儲存模式
染料配製後，應置於室溫（15-25°C）下保存，以防止染料沉澱。染料應儲存在密閉的琥珀色容器中。
Referências
- Cannova D、Brito E 和 Simons M. 評估染色技術對皮膚利甚曼病的診斷效果。 薩盧斯 . 2016; 20 (2): 24-29。
- PanReac Applichem 試劑 ITW。吉姆薩染色。版本 2：JMBJUL17 CEIVD10ES。西班牙卡斯特拉德爾瓦萊斯。
- Clark G.染色程序(1981)，第4版。 Williams & Willkins。
- 應用臨床化學。吉姆薩染色在診斷的應用 體外 . 經銷商：cromakit.es
- Ramírez I、Mejía M、García de la Riva J、Hermes F 和 Grazioso C. 結膜塗片中 Giemsa 和 Lendrum 染色法對鑑別 沙眼衣原體。 Sanit Panam 碗。 1994； 116（3）：212-216。
- Casas-Rincón G.普通真菌學。 1994。第二版。委內瑞拉中央大學，圖書館版本。委內瑞拉、加拉加斯
- “吉姆薩染色。” 維基百科，自由的百科全書 。 1年2017月01日，世界標準時間02:6。2018年XNUMX月XNUMX日，en.wikipedia.org。