Agar Hektoen: fundação, preparação e usos

Última actualización: fevereiro 21, 2024
Autor: y7rik

Agar Hektoen é um meio de cultura seletivo e diferencial utilizado para o isolamento de bactérias patogênicas encontradas em amostras clínicas, principalmente de fezes. Este meio foi desenvolvido por Edward Hektoen em 1906 e é uma variação do Agar Seletivo de Salmonella-Shigella. Sua composição inclui sais biliares, azul de bromotimol, lactose, sacarose, citrato de sódio, sulfato de sódio, vermelho de fenol e azul de bromotimol, que permitem a diferenciação de enterobactérias e a identificação de Salmonella e Shigella. Agar Hektoen é amplamente utilizado em laboratórios de microbiologia clínica para o diagnóstico de infecções gastrointestinais e é uma ferramenta importante no controle de infecções hospitalares.

Agar Hektoen: utilização em microbiologia para isolamento e identificação de bactérias patogênicas.

Agar Hektoen é um meio seletivo e diferencial amplamente utilizado em microbiologia para o isolamento e identificação de bactérias patogênicas. Este meio foi desenvolvido por Hektoen e Agar em 1968 e desde então tem sido uma ferramenta essencial em laboratórios de microbiologia.

A preparação do Agar Hektoen envolve a combinação de ingredientes como sais biliares, sulfato de sódio, lactose, sacarose, azul de bromotimol, vermelho neutro e agar. A combinação desses componentes permite a inibição do crescimento de bactérias não patogênicas e a identificação de bactérias patogênicas através da fermentação de açúcares e produção de ácidos.

Os principais usos do Agar Hektoen incluem a identificação de bactérias como Salmonella e Shigella, que são importantes agentes causadores de infecções gastrointestinais em humanos. Ao crescer em Agar Hektoen, essas bactérias produzem colônias de cores específicas que facilitam a sua identificação e diferenciação de outras bactérias presentes na amostra.

Em resumo, o Agar Hektoen é uma ferramenta valiosa na microbiologia para o isolamento e identificação de bactérias patogênicas, permitindo aos profissionais de saúde diagnosticar e tratar infecções de forma mais eficaz.

Cultura de Salmonella com isolamento seletivo em meio Ágar Sal e Sacarose.

A cultura de Salmonella com isolamento seletivo em meio Ágar Sal e Sacarose é uma técnica utilizada para identificar e isolar a bactéria Salmonella em amostras clínicas ou de alimentos. O Ágar Sal e Sacarose é um meio de cultura seletivo que inibe o crescimento de bactérias indesejadas, permitindo o crescimento apenas de Salmonella.

Para preparar o Ágar Sal e Sacarose, é necessário adicionar sal e sacarose ao meio de cultura base, juntamente com indicadores de pH que ajudam a identificar a presença de Salmonella. A concentração de sal e sacarose no meio é crucial para garantir a seletividade do meio e o crescimento adequado da Salmonella.

O Ágar Hektoen, por sua vez, é um meio de cultura diferencial que permite distinguir entre diferentes espécies de enterobactérias, incluindo a Salmonella. Este meio contém indicadores de pH e sais biliares que ajudam a diferenciar as colônias de Salmonella de outras bactérias.

O uso do Ágar Hektoen é especialmente útil em laboratórios de microbiologia clínica e de alimentos, onde a identificação precisa de Salmonella é essencial para o diagnóstico e controle de infecções. Este meio de cultura é uma ferramenta valiosa para a detecção e isolamento de Salmonella em amostras complexas.

Em resumo, a cultura de Salmonella com isolamento seletivo em meio Ágar Sal e Sacarose, juntamente com o uso do Ágar Hektoen, é uma abordagem eficaz para identificar e isolar a bactéria Salmonella em diferentes tipos de amostras. Este método é fundamental para garantir a segurança alimentar e a saúde pública, permitindo a rápida detecção e controle de infecções por Salmonella.

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Meio seletivo Agar XLD utilizado para isolamento e diferenciação de enterobactérias.

O Agar Hektoen é um meio seletivo utilizado para isolamento e diferenciação de enterobactérias. Este meio foi desenvolvido por Leifson em 1951 e é amplamente utilizado em laboratórios de microbiologia.

A preparação do Agar Hektoen envolve a adição de ingredientes como sais biliares, lactose, sacarose, citrato de sódio, e indicadores de pH como azul de bromotimol e vermelho neutro. Esses componentes permitem a seleção de enterobactérias e a diferenciação entre diferentes gêneros, como Salmonella e Shigella.

Os principais usos do Agar Hektoen incluem a identificação de patógenos entéricos em amostras clínicas, alimentos e água. Através da observação das colônias crescentes no meio, os microbiologistas podem determinar a presença de agentes patogênicos e auxiliar no diagnóstico de infecções bacterianas.

Em resumo, o Agar Hektoen é um meio seletivo importante na microbiologia, que permite o isolamento e a diferenciação de enterobactérias, contribuindo para o diagnóstico preciso de infecções bacterianas.

Cultivo de Ágar sabor Chocolate: Uma deliciosa opção para suas experiências científicas!

O Agar Hektoen é um meio de cultura seletivo e diferencial utilizado para o isolamento e identificação de bactérias entéricas patogênicas. Este meio foi desenvolvido por R. R. Hektoen em 1893 e é amplamente utilizado em laboratórios de microbiologia.

Para preparar o Agar Hektoen, basta seguir as instruções da embalagem, adicionando o pó do meio à água e aquecendo até dissolver completamente. Em seguida, é necessário esterilizar o meio para garantir que não haja contaminação durante o cultivo das bactérias.

O Agar Hektoen é utilizado para diferenciar bactérias entéricas com base na capacidade de fermentar lactose, sacarose e salicilato de sódio. As bactérias que fermentam esses açúcares produzem ácido, o que resulta em mudanças de cor no meio de cultura.

Uma opção interessante para tornar o cultivo de bactérias mais atrativo é o Cultivo de Ágar sabor Chocolate. Este meio de cultura possui um delicioso aroma de chocolate que pode tornar suas experiências científicas mais agradáveis e divertidas.

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Agar Hektoen: fundação, preparação e usos

O Hektoen agar ou meio de ágar Hektoen entérico é uma cultura sólida, selectivo e diferencial. Foi criado no Instituto Hektoen por King e Metzger para o isolamento de bactérias enteropatogênicas dos gêneros Shigella e Salmonella.

O meio é composto de peptona proteica, extrato de levedura, sais biliares, lactose, sacarose, salicina, tiossulfato de sódio , cloreto de sódio , citrato de ferro, citrato de amônio, azul de bromotimol, fucsina ácida e ágar. Esta formulação permite diferenciar os gêneros Shigella e Salmonella do restante das bactérias capazes de crescer neste meio.

A. Agar Virgin Hektoen B. Hektoen semeado. Fonte: Flickr.com/O remetente original foi Philippinjl na Wikipedia em francês. [CC BY-SA 2.0 fr (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/2.0/fr/deed.en)]

Embora existam outros meios com a mesma função que o ágar Hektoen, ele tem uma vantagem maior em comparação com outros meios, especialmente quando você deseja recuperar espécies de Shigella.

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As espécies de ambos os gêneros produzem graves problemas gastrointestinais em humanos devido ao consumo de alimentos contaminados; portanto, a transmissão é fecal – oral. É por isso que o uso do ágar Hektoen é indicado principalmente na análise microbiológica de amostras de fezes e alimentos.

Fundação

O ágar Hektoen contém peptonas e extrato de levedura como fonte de nutrientes, fornecendo os elementos essenciais para o desenvolvimento microbiano.

No entanto, também possui sais biliares que atuam inibindo o crescimento de algumas bactérias, especialmente Gram-positivas e Gram-negativas. É por esse motivo que é considerado um meio seletivo.

Por outro lado, o ágar Hektoen é um meio diferencial. Essa propriedade é conferida pela presença de carboidratos fermentáveis, como lactose, sacarina e salicina, juntamente com o sistema indicador de pH, representado pelo azul de bromotimol e fucsina ácida.

Todas as bactérias capazes de crescer neste meio que não pertencem ao gênero Salmonella e Shigella desenvolverão colônias de salmão ou laranja, com exceção do gênero Proteus. Isso ocorre devido à fermentação de um ou mais carboidratos presentes, que acidificam o meio, o que faz com que o indicador de pH gire.

Por outro lado, os gêneros Shigella e Salmonella não são capazes de fermentar nenhum dos carboidratos presentes, utilizando apenas as peptonas como fonte de energia, que alcaliniza o meio e, portanto, suas colônias são azul-esverdeadas.

Também neste meio, as bactérias capazes de formar sulfeto de hidrogênio (gás incolor) podem ser distinguidas. O tiossulfato de sódio atua como fonte de sulfeto, enquanto o citrato de ferro é o desenvolvedor. Ambos os compostos possibilitam a formação de um precipitado preto de sulfeto de ferro que evidencia a reação.

O precipitado preto no centro da colônia com um halo transparente ao redor dá a aparência de um olho de peixe. Essa característica sugere a presença do gênero Salmonella.

Finalmente, o cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico e o ágar fornece a consistência sólida ao meio.

Preparação

Pesar 76 g do meio desidratado e dissolver em um litro de água destilada. Agite vigorosamente a mistura e deixe descansar por 10 a 15 minutos. Pode ser aquecido e fervido, dando movimentos rotacionais até sua dissolução total. Este meio não é autoclavado.

Quando o meio atinge uma temperatura aproximada de 45 ° C, um volume de 20 ml é diretamente derramado em placas de Petri estéreis.

O ágar é deixado solidificar. Naquele momento, eles estão prontos para uso. É aconselhável usá-los imediatamente. Se não for possível, eles são armazenados na geladeira até o uso.

As placas devem ser removidas antecipadamente da geladeira antes de plantá-las em temperatura ambiente.

O pH do meio deve ser 7,5 ± 0,2. A cor do meio desidratado é roxa e preparada é verde marrom.

Use

O uso do ágar Hektoen é recomendado para a pesquisa de bactérias do gênero Shigella e Salmonella em amostras de fezes e alimentos.

A possibilidade de isolar essas bactérias aumenta consideravelmente se a amostra for previamente enriquecida em caldos especiais, como caldo de selenito, caldo de selenito de cistina, caldo de tetrationato, etc.

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O inóculo deve ser forte e a semeadura é feita por listras. As placas são incubadas a 37 ° C por 24 a 48 horas em aerobiose.

A incubação por 48 horas é recomendada porque as características das colônias são mais claras para interpretação e diferenciação no momento.

Controle de qualidade

Cepas bacterianas certificadas, como: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Shigella flexneri ATCC 12022 e Shigella sonnei ATCC 25931 são usadas para executar o controle de qualidade .

Os resultados esperados são os seguintes: Salmonella typhimurium e Salmonella enteritidis devem desenvolver colônias verde-azuladas com ou sem centro preto. Enquanto as espécies Shigella crescerão como colônias verde-azuladas.

Também podem ser incluídas cepas de Escherichia coli ATCC 29212, Proteus mirabilis , Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Enterococcus faecalis ATCC 29212 e Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Nestes casos, as características observadas são as seguintes: E. coli e K. pneumoniae se desenvolverão nessas colônias médias de laranja-salmão, com um precipitado da mesma cor ao redor. Enquanto isso, Proteus desenvolverá colônias verde-azuladas com ou sem um centro preto.

Embora o S. aureus e o E. faecalis devam ser inibidos, às vezes o E. faecalis consegue crescer como pequenas colônias amarelas.

Por outro lado, como este meio não é autoclavado, é importante avaliar a esterilidade do meio. Portanto, cada lote preparado deve ser incubado com uma a duas placas sem inocular a 37 ° C por 24 horas em aerobiose.

Obviamente, espera-se que não haja crescimento de qualquer tipo no prato.

Limitações

-As espécies de Proteus podem se desenvolver nesse ambiente e as características de suas colônias podem ser confundidas com as espécies de Salmonella ou Shigella. Por esse motivo, todas as colônias suspeitas devem ser confirmadas com testes bioquímicos .

-É necessário acompanhar o uso deste meio com outros ágares menos seletivos, porque se o microrganismo desejado estiver em baixas concentrações, ele pode não se desenvolver nesse meio.

-Não superaqueça durante a preparação, pois o calor excessivo altera a composição do meio.

-Excepcionalmente, podem aparecer colônias de Salmonella fermentadoras de lactose que podem passar despercebidas.

Referências

  1. Contribuidores da Wikipedia. Agar entérico de Hektoen. Wikipedia, A Enciclopédia Livre. 13 de março de 2019 às 23:38 UTC. Disponível em: .wikipedia.org / Acessado em 16 de março de 2019.
  2. Laboratórios BD Agar entérico BD Hektoen (ágar HE). 2013. Disponível em: bd.com
  3. Laboratórios britânicos. Agar Hektoen entérico. 2015. Disponível em: britanialab.com
  4. Laboratórios Difco Francisco Soria Melguizo. Agar Hektoen agar. Disponível em: f-soria.es
  5. Disco & BBL Manual, Hektoen Entic Agar. 2ª Edição Disponível em: bd.com/europe