Agar MRS: fundação, preparação e usos

O ágar MRS é um meio de cultura seletivo e diferencial utilizado para o isolamento e cultivo de bactérias lácticas do grupo Lactobacillus. Foi desenvolvido por De Man, Rogosa e Sharpe em 1960 e é composto por uma base nutritiva específica que favorece o crescimento dessas bactérias em detrimento de outros microrganismos. Sua preparação envolve a dissolução do pó em água destilada e esterilização por autoclavagem. O ágar MRS é amplamente utilizado em microbiologia de alimentos, laticínios, fermentação e bioquímica para a identificação e quantificação de bactérias lácticas de importância industrial e clínica.

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Se você está procurando conquistar a atenção de Mrs. Merck, você veio ao lugar certo. Com estas dicas eficazes e rápidas, você será capaz de chamar a atenção dela de forma eficaz. Uma maneira de fazer isso é através do uso de Agar MRS, uma poderosa ferramenta que pode ajudá-lo a se destacar.

Agar MRS: fundação, preparação e usos

Agar MRS é um meio de cultura seletivo utilizado para o isolamento e cultivo de bactérias lácticas do grupo Lactobacillus. Ele foi desenvolvido por de Man, Rogosa e Sharpe em 1960 e desde então tem sido amplamente utilizado em laboratórios de microbiologia.

Para preparar o Agar MRS, você precisará seguir algumas etapas simples. Primeiro, adicione a quantidade correta de pó Agar MRS a água destilada e aqueça até dissolver completamente. Em seguida, esterilize o meio de cultura em autoclave e despeje em placas de Petri para solidificar.

Os usos do Agar MRS são variados e incluem a detecção e isolamento de bactérias lácticas em produtos lácteos, como queijos e iogurtes. Ele também pode ser utilizado para estudar a microbiota intestinal e seus efeitos na saúde humana.

Agora que você sabe mais sobre o Agar MRS e como utilizá-lo, você está pronto para conquistar a atenção de Mrs. Merck. Lembre-se de seguir as dicas acima e você certamente será bem-sucedido.

Meio de cultura Agar MRS para crescimento de Lactobacillus em microbiologia.

O meio de cultura Agar MRS é um meio seletivo utilizado para o crescimento de bactérias do gênero Lactobacillus em microbiologia. Ele foi desenvolvido por De Man, Rogosa e Sharpe em 1960, daí a sigla MRS. Este meio é composto por vários ingredientes que fornecem os nutrientes necessários para o crescimento das bactérias desejadas.

Para preparar o meio de cultura Agar MRS, é necessário dissolver os ingredientes em água destilada e acrescentar o agar para solidificar o meio. Após a esterilização, o meio pode ser inoculado com a cultura de Lactobacillus e incubado a uma temperatura adequada para o crescimento da bactéria.

O Agar MRS é um meio seletivo, pois contém substâncias que inibem o crescimento de bactérias indesejadas, permitindo que apenas as bactérias do gênero Lactobacillus se desenvolvam. Isso facilita o isolamento e a identificação dessas bactérias em uma amostra mista.

Os usos do meio de cultura Agar MRS são variados, sendo amplamente utilizado em estudos de microbiologia de alimentos, probióticos e saúde intestinal. A capacidade de promover o crescimento seletivo de Lactobacillus torna este meio essencial para pesquisas e testes laboratoriais que envolvam essas bactérias.

Meio de Cultura MRS: fundamentos e aplicações em microbiologia e biotecnologia.

O meio de cultura MRS é um meio de cultura seletivo e diferencial utilizado na microbiologia e biotecnologia para o crescimento de bactérias lácticas, especialmente do gênero Lactobacillus. A sigla MRS significa “de Man, Rogosa e Sharpe”, em homenagem aos pesquisadores que desenvolveram esse meio no início da década de 1960.

O meio de cultura MRS é composto por uma combinação de nutrientes que favorecem o crescimento das bactérias lácticas, como peptona, extrato de levedura, citrato de amônio, sulfato de magnésio e fosfato de potássio. Além disso, o meio contém um indicador de pH, geralmente vermelho de fenol, que permite diferenciar as bactérias que fermentam ou não os carboidratos presentes no meio.

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A preparação do meio de cultura MRS envolve a dissolução dos componentes em água destilada, ajuste do pH para cerca de 6,5 a 6,8 e esterilização por autoclavagem. Após a esterilização, o meio é solidificado com a adição de Agar, tornando-se o meio de cultura MRS Agar.

O Agar MRS é amplamente utilizado em laboratórios de microbiologia para o isolamento e identificação de bactérias lácticas em diversos produtos fermentados, como iogurtes, queijos e produtos cárneos. Além disso, o meio de cultura MRS também é empregado em estudos de biotecnologia, visando a produção de enzimas, ácidos orgânicos e outros compostos de interesse industrial.

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MRS Microbiologia é uma empresa especializada em análises microbiológicas, com o objetivo de garantir a segurança e qualidade dos produtos. Com profissionais altamente qualificados e equipamentos de última geração, a MRS Microbiologia oferece serviços de alta qualidade para diversos setores da indústria.

Um dos meios de cultura mais utilizados pela MRS Microbiologia é o Agar MRS. Este meio de cultura foi desenvolvido por De Man, Rogosa e Sharpe na década de 1960 e é amplamente utilizado para o isolamento e cultivo de bactérias lácticas, especialmente do gênero Lactobacillus.

A preparação do Agar MRS é relativamente simples, envolvendo a dissolução do pó em água destilada e a esterilização por autoclavagem. Após a solidificação do meio, ele está pronto para receber as amostras a serem analisadas.

O Agar MRS é utilizado em diversos testes microbiológicos, como a contagem de bactérias lácticas em produtos lácteos, a avaliação da qualidade de fermentações e a identificação de bactérias probióticas. Sua composição específica favorece o crescimento das bactérias desejadas, tornando-o um meio seletivo e diferencial.

Em resumo, o Agar MRS é uma ferramenta essencial para os especialistas em microbiologia da MRS Microbiologia, garantindo análises precisas e confiáveis para seus clientes. Com sua fundação sólida, preparação simples e usos variados, o Agar MRS é um aliado indispensável no controle de qualidade de produtos microbiológicos.

Agar MRS: fundação, preparação e usos

O ágar MRS é uma cultura em meio sólido selectivo utilizado para o isolamento e enumeração de bactérias de ácido láctico, em especial o género Lactobacillus. Este ágar foi criado em 1960 por Man, Rogosa e Sharpe, com o mesmo nome, mas devido à sua complexidade, a abreviação MRS é frequentemente usada

É composto de peptona proteica, extrato de carne, extrato de levedura, glicose, monoleato de sorbitano, fosfato dipotássico, acetato de sódio, citrato de amônio, sulfato de magnésio, sulfato de manganês e ágar.

Agar MRS: fundação, preparação e usos 1

Agar Man Rogosa e Sharpe (MRS) plantados com Lactobacillus sp. Fonte: Foto doada para este artigo pelos autores: Báez E, González G, Hernández G, López E, Mega M. Foto tirada durante a pesquisa intitulada: Avaliação de bactérias do ácido láctico e Bifidobacteria com potencial probiótico no leite materno e nas fezes infantis .

Esta composição permite o bom desenvolvimento de bactérias do ácido lático a partir de amostras clínicas, como fezes, corrimento vaginal, amostras orais e leite materno, bem como alimentos lácteos e carnes.

Não é usado rotineiramente em laboratórios clínicos, porque as bactérias do ácido lático raramente estão envolvidas em processos patológicos. No entanto, na área da microbiologia alimentar, o uso de ágar MRS é mais frequente

Por outro lado, esse meio é utilizado por alguns Centros de Pesquisa, cujo objetivo é o estudo de bactérias do ácido lático.

Fundação

O ágar Man, Rogosa e Sharpe tem uma composição bastante complexa. Ao quebrar a função de cada um de seus componentes, sua lógica pode ser explicada.

Peptona protéica, extrato de carne, extrato de levedura e glicose são nutrientes que fornecem a fonte de carbono, nitrogênio, vitaminas e minerais necessários para o crescimento bacteriano. Além disso, a glicose é a fonte de energia universal usada na maioria dos meios de cultura.

Por outro lado, para favorecer o crescimento de bactérias do ácido láctico, é necessária a presença de cofatores essenciais (cátions) no metabolismo do Lactobacillus e bactérias relacionadas; Estes compostos são sais de sódio, magnésio e manganês.

Da mesma forma, o monoleato de sorbitano ou o polissorbato 80 são uma fonte importante de ácidos graxos quando absorvidos como nutrientes.

Além disso, o monoleato de sorbitano e o citrato de amônio atuam inibindo o desenvolvimento da flora associada, especialmente as bactérias Gram-negativas, proporcionando o caráter seletivo deste ágar.

Finalmente, o ágar-ágar é o que confere consistência sólida ao meio.

Existem outras variantes do ágar Man Rogosa Sharpe; Um deles é a suplementação de cisteína (MRSc), muito útil para o isolamento de bifidobactérias, entre outros microorganismos. Por outro lado, existe o meio MRS suplementado com neomicina, paromomicina, ácido nalidíxico e cloreto de lítio, especialmente para a contagem seletiva de bifidobactérias em produtos lácteos.

Preparação

Pesar 68,25 gramas do meio desidratado e dissolver em um litro de água destilada. Deixe descansar por 5 minutos. Para dissolver completamente, leve a uma fonte de calor mexendo sempre e deixe ferver por 1 a 2 minutos. Esterilizar em autoclave a 121 ° C por 15 minutos.

Ao sair da autoclave, deixe repousar alguns minutos e distribua ainda quente em placas de Petri estéreis.

Deixe solidificar e inverter as placas, pedir as plaquetas e guardar na geladeira até o uso. Deixe as placas atingirem a temperatura ambiente antes de usá-las.

O pH do meio deve ser 6,4 ± 0,2. Algumas casas comerciais recomendam pH entre 5,5 e 5,9.

O meio desidratado é bege e preparado é âmbar escuro.

O meio desidratado e as placas preparadas devem ser armazenadas de 2 a 8 ° C.

Usos

As placas de ágar MRS podem ser semeadas na superfície (depleção ou com a espátula de Drigalski). Também pode ser semeado por profundidade. As placas devem ser incubados a 37 ° C em ambiente microaerofilico (4% de O 2 e 5-10% de CO 2 ) durante 24 a 72 horas.

O método de semeadura é escolhido de acordo com a finalidade pretendida (isolamento ou contagem).

Características da colônia

As colônias presuntivas de Lactobacillus crescem esbranquiçadas e apresentam uma aparência mucóide ou cremosa neste ágar. Posteriormente, eles devem ser identificados.

Isolamento de bactérias do ácido láctico

Para isso, a semeadura de superfície é usada. As amostras a serem semeadas requerem um procedimento anterior.

No caso de amostras de leite materno, recomenda-se centrifugar 1 ml da amostra a 14.000 rpm por 10 minutos, a fim de remover a camada gordurosa. São descartados 900 µl e, nos 100 µl restantes, o sedimento é suspenso e derramado sobre a superfície do ágar MRS, devendo então ser distribuído uniformemente com uma espátula de Drigalski.

No caso de amostras de fezes, um (1) grama de fezes é pesado e homogeneizado em 9 mL de água peptonada estéril a 0,1%, correspondendo a uma diluição de 1/10. Diluições seriadas são então feitas, até que seja obtida uma diluição final de 10 -4 .

Finalmente, 100 μl das diluições 10 -2 , 10 -3 e 10 -4 são coletados e cada diluição é semeada em ágar MRS, distribuído uniformemente com uma espátula de Drigalski.

Contagem de bactérias do ácido láctico

Nesse caso, a semeadura é feita em profundidade.

Para amostras de leite materno, 1 mL é coletado e colocado em um tubo plástico cônico estéril. O ágar MRS é adicionado a uma temperatura aproximada de 40 ° C até um volume final de 25 mL, obtendo-se uma mistura homogênea. Em seguida, é vertida em placas de Petri estéreis uniformemente e deixada repousar até a polimerização.

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Para amostras de fezes, são feitas diluições, conforme descrito acima. Toma-se 1 mL de cada diluição e coloca-se em tubos plásticos cônicos estéreis. O ágar MRS fundido é adicionado a um volume de 25 mL.

A mistura de cada diluição é vertida uniformemente em placas de Petri estéreis. Finalmente deixe repousar até a polimerização.

Agar MRS: fundação, preparação e usos 2

Contagem de colônias no ágar Man Rogosa e Sharpe (MRS). Fonte: Foto doada para este artigo. Autores: Báez E, González G, Hernández G, López E, Mega M. Foto tirada durante a pesquisa intitulada: Avaliação de bactérias do ácido láctico e Bifidobacteria com potencial probiótico no leite materno e nas fezes infantis.

No nível de pesquisa

O estudo das bactérias do ácido lático se torna cada vez mais interessante a cada dia; Especialmente os pesquisadores buscam conhecer novas cepas e seu potencial como fermento inicial para padronização na fabricação de laticínios, entre outros usos.

Nesse sentido, Alvarado et al. (2007) utilizaram o ágar MRS para realizar um estudo no qual isolaram, identificaram e caracterizaram as bactérias do ácido láctico presentes em um queijo venezuelano defumado andino tradicional.

No queijo, encontraram a presença de bactérias dos gêneros Lactococcus e Lactobacillus, e concluíram que misturas de cepas isoladas são adequadas como cepas iniciais na fabricação de queijos a partir de leite pasteurizado.

Por outro lado, Sánchez et al. (2017) utilizaram o ágar MRS para investigar a presença de bactérias do ácido lático no trato digestivo dos leitões, para usá-las como probióticos nativos que aumentam a produtividade de leitões saudáveis.

Com isso, eles conseguiram isolar quatro espécies: Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus brevis, Enterococcus hirae e Pediococcus pentosaceus.

Da mesma forma, Báez et al. (2019) utilizaram o ágar MRS para avaliar as bactérias do ácido lático (LBA) e as bifidobactérias com potencial probiótico no leite materno e nas fezes infantis.

Eles conseguiram isolar 11 BAL e 3 Bifidobacteria sp no leite materno e 8 BAL e 2 Bifidobacteria sp . no banquinho Todos cumpriram certos parâmetros que os credenciam como bactérias com atividade probiótica.

Os autores concluíram que o leite materno e as fezes de bebês amamentados exclusivamente servem como fontes naturais de bactérias probióticas.

Controle de qualidade

Para avaliar a qualidade do ágar MRS, cepas de controle como:

Lactobacillus fermentum ATCC 9338, Lactobacillus casei ATCC 393, Bifidobacterium bifidum ATCC 11863, Lactobacillus plantarum MKTA 8014, Lactobacillus lactis MKTA 19435, Pediococcus damnosus MKTA 29358, Escherichia cereus e Bacillus cereus .

Os resultados esperados são um crescimento satisfatório para as 6 primeiras bactérias, enquanto E. coli e Bacillus cereus devem ser completamente inibidos.

Referências

  1. Alvarado C, Chacón Z, Otoniel J, Guerrero B, López G. Isolamento, identificação e caracterização de bactérias do ácido láctico de um queijo venezuelano defumado artesão andino. Seu uso como uma colheita inicial. Cem (Maracaibo) 2007; 17 (3): 301-308. Disponível em: scielo.org.
  2. Sánchez H, Fabián F, Ochoa G, Alfaro Isolamento de bactérias do ácido láctico do trato digestivo do leitão. Rev. Invest. veterinário Peru 2017; 28 (3): 730-736. Disponível em: scielo.org.
  3. Báez E, González G, Hernández G, López E, Mega M. Avaliação de bactérias do ácido lático e bifidobactérias com potencial probiótico no leite materno e fezes infantis no município Acevedo, Miranda 2017. Trabalho de graduação para se qualificar para o Bacharelado em Bioanálise Universidade de Carabobo, Venezuela.
  4. Laboratório Britânico Ágar MRS 2015. Disponível em: britanialab.com
  5. Contribuidores da Wikipedia. Ágar MRS Wikipedia, A Enciclopédia Livre. 10 de janeiro de 2018 19:44 UTC. Disponível em: wikipedia.org Acesso em 17 de fevereiro de 2019.
  6. Roy D. Media para o isolamento e enumeração de bifidobactérias em produtos lácteos. Int J Food Microbiol, 200128; 69 (3): 167-82.

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