Timolftalein: características, preparação e aplicações

A timolftaleína é um indicador de pH com o nome científico: 3,3-bis [4-hidroxi-2-metil-5- (1-metil) fenil] -1 (3H) -isobenzofuranona e a sua fórmula química é C 28 H 30 ou 4 . É sintetizado a partir de anidrido ftálico e timol.

Este indicador de pH possui propriedades muito peculiares, pois em pH extremamente baixo é vermelho intenso (pH <0). Posteriormente, existe uma ampla faixa de pH em que é completamente incolor (pH 1 – 9,2), com um intervalo de giro entre 9,3 e 10,5, onde pode mudar para azul, enquanto acima de 10,5 é azul. intenso

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Estrutura química da timolftaleína a pH ácido (incolor) e pH alcalino (azul profundo). Fonte: Dannybalanta [CC BY-SA 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0)[/Pxhere.com

Entre suas aplicações, deve servir como indicador ácido-base em certas reações químicas. Também é usado como cromogênio em algumas reações colorimétricas em que a atividade enzimática é avaliada. Por exemplo, na determinação da fosfatase alcalina.

Em relação à toxicidade, é menos nocivo que outros indicadores de pH, sendo classificado pela Associação Nacional de Proteção contra Incêndios (NFPA) como nível 1 em relação aos seus efeitos na saúde; o que significa que não é cancerígeno ou mutagênico.

Também não possui toxicidade específica contra nenhum órgão-alvo; isto é, representa um baixo risco de agressão à saúde. No entanto, o contato direto com a pele e as mucosas pode causar irritação leve.

Por outro lado, em termos de inflamabilidade é classificado como 1 e em termos de reatividade como zero.

Caracteristicas

O indicador de pH timolftaleína em sua forma sólida é um pó branco; em seu estado líquido, é vermelho escuro a pH menor que zero, incolor a pH 1-9,2 e azul acima de 10,5. Sua massa molar é de 430,54 g / mol, com um ponto de fusão de (258 ° C), enquanto o ponto de ebulição varia entre 248-252 ° C. A densidade é de 0,92 g / mL a 25 ° C

É insolúvel em água fria e solúvel em etanol. Não é uma substância explosiva.

Como precaução, durante o transporte, o armazenamento e o manuseio devem ser mantidos afastados de oxidantes fortes.

Preparação

Tipicamente, o indicador de pH da timolftaleína é utilizado a uma concentração de 0,1% para análise volumétrica. Para fazer isso, faça o seguinte:

– Pesar 100 mg de timolftaleína e dissolver em 100 ml de álcool etílico a 95%.

Também pode ser preparado da seguinte maneira:

– Pesar 100 mg de timolftaleína e dissolver em 60 ml de álcool absoluto e adicionar 40 ml de água destilada.

– Armazenar em temperatura ambiente (15-25 ° C). É importante que o local de armazenamento seja fresco, ventilado e livre de umidade.

Aplicações

Determinação da fosfatase alcalina

Na determinação deste teste, existe uma técnica baseada na ação hidrolítica que a fosfatase alcalina exerce sobre o monofosfato de timolftaleína. Se a fosfatase alcalina estiver presente, hidrolisará a timolftaleína monofosfato, liberando timoltaleína.

Isso produz uma coloração azul em pH alcalino. A atividade enzimática da fosfatase alcalina é diretamente proporcional à intensidade da cor formada. A absorvância é lida a 590 nm.

Determinação do antígeno prostático (PSA)

Nesse sentido, Shao F e colaboradores em 2018 desenvolveram uma técnica colorimétrica na qual eles usam nanopartículas de sílica mesoporosas que capturam moléculas de timolftaleína, fortemente vinculadas pela presença de feniltrimetiloxissilano.

Por sua vez, essas nanopartículas foram revestidas com polietilenoimina (PEI), favorecendo a ligação do anticorpo anti-PSA secundário.

Por outro lado, a amostra do paciente foi imobilizada em uma placa; e em contato com as nanopartículas presentes no PSA, ele se ligará aos anticorpos. Nanopartículas que não se ligam serão removidas.

Posteriormente, a timolftaleína será liberada facilmente pela adição de uma solução alcalina, que gera uma cor azul. O grau da cor é diretamente proporcional à concentração de PSA.

Determinação da atividade da enzima arginina quinase ou fosfoquinase

Usando o indicador de pH da timolftaleína, a atividade enzimática da arginina quinase pode ser determinada. O teste é baseado no seguinte:

A enzima arginina quinase é uma fosfotransferase que participa da formação de fosfoarginina, conforme revelado na seguinte reação química:

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Fonte: “Arginine Kinase.” Wikipedia, A enciclopédia livre. 10 de julho de 2018 13:49 UTC. 20 de maio de 2019, 03:58 wikipedia.org/

Se esta reação for realizada contra o indicador de pH da timolftaleína, é possível medir a atividade enzimática. Isso é possível de acordo com a seguinte explicação: a reação ocorre em pH alcalino, onde a timolftaleína mostra sua cor azul.

A atividade enzimática é medida pelo desbotamento da cor refletida pela diminuição da absorvância a 575 nm, porque, à medida que a enzima atua, são liberados prótons (H +), que acidificam o meio.

Isso faz com que a timolftaleína perca a cor quando se aproxima da área de torneamento. Se o pH atingir valores abaixo de 9,2, ele ficará completamente incolor.

Portanto, a intensidade da cor azul é inversamente proporcional à atividade enzimática.

Toxicidade

No humano

Este composto é menos tóxico que a maioria dos indicadores de pH, uma vez que nenhum efeito cancerígeno ou mutagênico foi atribuído até agora. No entanto, não é completamente inofensivo: o contato com a pele e as mucosas pode causar vermelhidão nas áreas mencionadas.

Também pode causar reações indesejáveis ​​se ingerido ou inalado acidentalmente.

Se houver contato direto com a pele e as mucosas, a área afetada deve ser lavada com água em abundância por pelo menos 15 minutos. E se você perceber sinais de irritação, deve ir ao centro de saúde mais próximo.

É por isso que é recomendado o uso de instrumentos de segurança, como bata, luvas e óculos de segurança durante o manuseio.

Apesar de ter um baixo risco de inflamabilidade, é recomendável ficar prudentemente longe dos isqueiros.

Impacto no meio ambiente

Apesar de ser menos tóxico para a saúde humana, é tóxico em ambientes aquáticos, afetando os organismos ali encontrados. Além disso, possui alto poder de bioacumulação e, a longo prazo, é possível formar produtos de degradação prejudiciais ao meio ambiente.

Portanto, deve-se evitar que este produto chegue às águas superficiais ou subterrâneas, pois afetaria a água potável.

Nesse sentido, os laboratórios que utilizam esse indicador devem descartar seus resíduos de acordo com os regulamentos em vigor em cada país.

Referências

  1. Pizzani P, Godoy S, León M, Rueda E, Castañeda M, Arias A. Efeito do aumento das concentrações de fósforo fítico na atividade das enzimas fitase e fosfatase alcalina no epitélio intestinal de ovinos jovens. Rev. Cient . (Maracaibo). 2008.18 (1): 59-64. Disponível em: scielo.org.
  2. «Timolftalein.» Wikipedia, A Enciclopédia Livre . 22 de fevereiro de 2019 às 04:40 UTC 19 de maio de 2019 às 22:20
  3. O teste de imunoabsorção de antígeno específico da próstata foi amplificado pela liberação de moléculas indicadoras de pH capturadas em nanopartículas de sílica mesoporosa. Anal Chem. 2018; 17; 90 (14): 8673-8679.
  4. Yu Z, Pan J, Zhou HM. Um ensaio espectrofotométrico contínuo direto de pH para a atividade da arginina-quinase. Protein Pept Lett. 2002; 9 (6): 545-52.
  5. Scharlau Ficha de Segurança de Timolftaleína. 2013. Disponível em: javeriana.edu.co
  6. Timolftaleína na ficha de segurança. MSDS Universidade Nacional de Heredia, Costa Rica. Disponível em: Timolftaleína% 20 (3).
  7. «Arginina quinase.» Wikipedia, A enciclopédia livre . 10 de julho de 2018 13:49 UTC. 20 de maio de 2019, 03:58 es.wikipedia.org.

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