Coloração de May Grünwald-Giemsa: fundamento, técnica e usos

A coloração de May Grünwald-Giemsa é uma técnica utilizada em laboratórios de análises clínicas e patologia para a identificação e diferenciação de células sanguíneas e outros elementos celulares. Esta técnica combina os corantes de May Grünwald e Giemsa, que permitem visualizar diferentes estruturas celulares com maior nitidez e contraste. Além disso, a coloração de May Grünwald-Giemsa é amplamente utilizada para a identificação de patologias hematológicas, como leucemias, linfomas e outras doenças do sangue. Neste artigo, exploraremos os fundamentos, a técnica e os principais usos da coloração de May Grünwald-Giemsa.

Benefícios da coloração de May Grunwald Giemsa na análise de células sanguíneas.

A coloração de May Grunwald Giemsa é uma técnica amplamente utilizada na análise de células sanguíneas devido aos seus diversos benefícios. Esta técnica permite a visualização clara e detalhada das células sanguíneas, facilitando a identificação de diferentes tipos celulares e a detecção de possíveis anormalidades.

Um dos principais benefícios da coloração de May Grunwald Giemsa é a sua capacidade de corar diferentes componentes celulares de forma distinta. As células sanguíneas, como os glóbulos vermelhos, glóbulos brancos e plaquetas, são coradas de maneira específica, o que facilita a identificação e contagem de cada tipo celular.

Além disso, a coloração de May Grunwald Giemsa permite a visualização de estruturas celulares internas, como núcleo e citoplasma, com grande nitidez. Isso é essencial para a identificação de alterações morfológicas nas células sanguíneas, como anisocitose, poiquilocitose e presença de inclusões citoplasmáticas.

Outro benefício importante desta técnica é a sua versatilidade, pois pode ser aplicada em diferentes tipos de amostras sanguíneas, como sangue periférico, aspirado de medula óssea e esfregaços de tecidos. Isso torna a coloração de May Grunwald Giemsa uma ferramenta indispensável na rotina laboratorial para análise de células sanguíneas e diagnóstico de doenças hematológicas.

Em resumo, a coloração de May Grunwald Giemsa é uma técnica essencial na análise de células sanguíneas devido aos seus benefícios em facilitar a identificação de diferentes tipos celulares, detecção de anormalidades e visualização detalhada de estruturas celulares. Sua aplicação é fundamental para o diagnóstico preciso de doenças hematológicas e para o acompanhamento de pacientes em tratamento.

Para que serve a coloração Giemsa e qual sua importância na análise laboratorial.

A coloração Giemsa é um método utilizado na análise laboratorial para identificar e diferenciar diferentes componentes celulares, como cromossomos, organelas e microorganismos. Essa coloração é feita a partir de uma mistura de corantes básicos e ácidos, que se ligam a diferentes estruturas celulares, resultando em cores variadas.

Uma das principais aplicações da coloração Giemsa é na identificação de parasitas em amostras de sangue, como Plasmodium spp. (causador da malária) e Trypanosoma cruzi (causador da doença de Chagas). Além disso, essa técnica também é utilizada na análise de esfregaços de medula óssea para diagnóstico de doenças hematológicas, como leucemias e anemias.

A coloração Giemsa é importante na análise laboratorial por permitir uma visualização mais detalhada e precisa das estruturas celulares, auxiliando no diagnóstico de diversas doenças. Além disso, essa técnica é de fácil execução e baixo custo, sendo amplamente utilizada em laboratórios de análises clínicas e de pesquisa.

Em resumo, a coloração Giemsa é uma ferramenta fundamental na análise laboratorial, sendo essencial para a identificação de diferentes componentes celulares e para o diagnóstico de diversas doenças. Sua aplicação permite uma análise mais detalhada e precisa das amostras, contribuindo para um melhor entendimento dos processos biológicos e para a melhoria da saúde humana.

Guia prático para a coloração de May Grunwald Giemsa em laboratório de análises clínicas.

A coloração de May Grunwald Giemsa é amplamente utilizada em laboratórios de análises clínicas para visualização de células sanguíneas e parasitas. Esta técnica combina os corantes May Grunwald e Giemsa, proporcionando uma coloração diferencial que destaca estruturas celulares importantes.

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Para realizar a coloração de May Grunwald Giemsa, siga o guia prático abaixo:

  1. Fixe a amostra em uma lâmina de vidro utilizando calor ou substâncias fixadoras, como álcool metílico.
  2. Prepare o corante May Grunwald e aplique sobre a amostra por um período de tempo determinado.
  3. Lave a lâmina suavemente com água para remover o excesso de corante.
  4. Prepare o corante Giemsa e aplique sobre a amostra por um período de tempo determinado.
  5. Lave novamente a lâmina com água e deixe secar.
  6. Analise a lâmina ao microscópio óptico para observar a coloração das células.

A coloração de May Grunwald Giemsa é fundamental para identificação de diferentes tipos de células sanguíneas, como eritrócitos, leucócitos e plaquetas. Além disso, também é utilizada na detecção de parasitas sanguíneos, como Plasmodium spp. em casos de malária.

Em resumo, a coloração de May Grunwald Giemsa é uma técnica essencial em laboratórios de análises clínicas para análise de células sanguíneas e parasitas, proporcionando informações importantes para o diagnóstico e tratamento de diversas doenças.

Guia prático para utilizar o corante Giemsa de maneira eficaz em laboratórios de análises clínicas.

Para realizar a coloração de May Grünwald-Giemsa de maneira eficaz em laboratórios de análises clínicas, é importante seguir alguns passos fundamentais. O corante Giemsa é amplamente utilizado na identificação de células sanguíneas e parasitas, sendo essencial para o diagnóstico de diversas doenças.

Primeiramente, é necessário preparar o corante Giemsa de acordo com as instruções do fabricante. Em seguida, é importante realizar a fixação das amostras em uma lâmina de vidro, garantindo a aderência das células para a correta visualização. Em seguida, aplique o corante Giemsa na lâmina e deixe agir por aproximadamente 10 minutos.

Após o tempo de incubação, lave a lâmina suavemente com água corrente para remover o excesso de corante. Em seguida, deixe a lâmina secar naturalmente ou utilize um secador de lâminas para acelerar o processo. Uma vez seca, a lâmina está pronta para ser observada ao microscópio.

É importante ressaltar que a correta utilização do corante Giemsa é essencial para a obtenção de resultados precisos. Qualquer desvio no processo de coloração pode comprometer a análise das amostras e interferir no diagnóstico final. Portanto, siga as instruções detalhadamente e mantenha um ambiente de trabalho limpo e organizado para garantir a eficácia do procedimento.

Em resumo, a coloração de May Grünwald-Giemsa é uma técnica fundamental em laboratórios de análises clínicas, sendo utilizada para identificar diferentes tipos de células sanguíneas e parasitas. Seguir um guia prático e realizar o procedimento de forma cuidadosa e precisa é essencial para obter resultados confiáveis e contribuir para o diagnóstico correto das doenças.

Coloração de May Grünwald-Giemsa: fundamento, técnica e usos

A coloração de May Grunwald-Giemsa ou Pappenheim é uma técnica de coloração diferencial de Giemsa e misturando os reagentes May Grunwald. É utilizado para a diferenciação de células sanguíneas normais e anormais em exames periféricos de sangue e medula óssea, bem como para a coloração de cortes histológicos e amostras citológicas.

Ambos os reagentes – Giemsa e May Grünwald – são derivados da coloração de Romanowsky, uma técnica baseada na combinação de corantes ácidos e básicos.

Coloração de May Grünwald-Giemsa: fundamento, técnica e usos 1

Esfregaço mostrando um neutrófilo segmentado e um milênio em um caso de leucemia mielóide crônica, corada com a coloração de May Grünwald Giemsa. Dr. Ramon Simon-Lopez (https://es.m.wikipedia.org/wiki/File:LMC-1.JPG) através do Wikipedia.org.

Giemsa melhorou a técnica estabilizando a mistura de eosina, azul de metileno e seus derivados, com glicerol. Em vez disso, May Grünwald usa eosina e azul de metileno, usando metanol como solvente. Essa combinação estratégica deu excelentes resultados.

Enquanto a observação da morfologia celular atua de maneira semelhante às colorações de Giemsa e Wright, essa técnica aprimora as anteriores, refinando a coloração dos parasitas causadores de malária, doença de Chagas, leishmaniose e tricomoníase.

Além disso, provou ser uma técnica muito útil para o estudo citológico do líquido espermático. Destacou-se não apenas por mostrar as características morfológicas dos espermatozóides, mas também permite diferenciar leucócitos, células epiteliais e espermatogênicas com grande eficiência .

Fundação

A técnica segue a base das manchas de Romanowsky, nas quais os corantes ácidos têm afinidade seletiva pelos componentes básicos celulares e os componentes ácidos atraem os corantes básicos.

Em outras palavras, as estruturas celulares e os corantes têm cargas elétricas positivas ou negativas; encargos iguais repelem e encargos diferentes atraem.

Por exemplo, corantes básicos como o azul de metileno são carregados positivamente e atraídos por estruturas carregadas negativamente. É por isso que esse corante mancha núcleos ricos em DNA e RNA que carregam negativamente grupos fosfato.

Os grânulos dos basófilos segmentados e citoplasmas dos glóbulos brancos mononucleares contendo RNA também são corados.

Da mesma forma, o corante ácido carrega uma carga negativa, por isso se liga a estruturas carregadas positivamente, como eritrócitos e grânulos dos eosinófilos segmentados. Quanto aos grânulos dos neutrófilos segmentados, estes fixam os dois corantes.

Variedade de corantes

Nesta técnica coexiste uma combinação de reações entre corantes orto- cromáticos e metacromáticos. Os ortocromáticos (eosina e azul de metileno) são fixados à estrutura celular à qual estão relacionados e fornecem uma cor estável que não varia.

Por outro lado, os metacromáticos (aqueles derivados do azul de metileno azul A e azul B) variam sua cor original uma vez anexada à estrutura específica, e pode até haver uma variedade de nuances.

Finalmente, o passo dado pela solução de May Grünwald requer a presença de água, pois sem ela o corante penetrará nas estruturas, mas não será corrigido. Para que isso aconteça, o corante deve tornar-se polar ou ionizado e, assim, ser capaz de precipitar e se ligar a estruturas relacionadas.

Técnica

Materiais

– Slides.

– Pontes para colorir.

– Solução de May-Grünwald.

– coloração de Giemsa.

– Água destilada.

Solução de corante concentrado May Grünwald

0,25 g de azul de eosina-metileno (corante de acordo com May Grünwald) devem ser pesados ​​e dissolvidos em 100 ml de metanol. Em seguida, a preparação é misturada por 1 hora e deixada em repouso por 24 horas. Depois que o tempo termina, ele é filtrado.

Para aplicar a técnica, o corante May Grünwald deve ser diluído da seguinte forma: para 200 ml de corante diluído, são medidos 30 ml da solução concentrada, 20 ml de solução tampão e 150 ml de água destilada ajustados para pH7.2-7.3. . É posteriormente misturado e filtrado.

Coloração Giemsa Concentrada

0,5 g de azul de azur-eosina-metileno (corante de acordo com Giemsa) devem ser pesados, dissolvidos em 50 ml de metanol e colocados na mistura 50 ml de glicerina.

Para executar a técnica, dilua 1:10 com solução tampão e deixe repousar por 10 minutos. Pode ser filtrado, se necessário.

Preparação da solução tampão a pH 7,2

Eles devem ser pesados:

– 40 mg de di-hidrogenofosfato de potássio (KH2PO4).

– 151 mg de hidrogenofosfato dissódico 12-hidrato (Na2HPO4).

Ambos os compostos são dissolvidos em 100 ml de água.

Procedimento de esfregaço de sangue ou coloração da medula óssea

Existem duas modalidades: uma clássica e uma rápida.

Modo clássico

  1. Cubra as manchas por 2 ou 3 minutos com a solução diluída de May-Grünwald.
  2. Lave com água destilada tamponada para remover a solução anterior.
  3. Cubra com a mesma solução de lavagem tamponada e deixe por 1 minuto. A idéia é que o corante anterior seja fixado às estruturas e que, ao mesmo tempo, as células sejam hidratadas.
  4. Adicione 12 gotas de tintura de Giemsa diluída sobre a água tamponada e sopre para misturar e homogeneizar. Deixe descansar por 15 ou 20 minutos.
  5. Lave as manchas com água destilada tamponada e deixe-a secar ao ar.
  6. Focalize e observe as células sanguíneas manchadas em um microscópio óptico usando a objetiva 40X. Se necessário, 100X pode ser usado.
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Modo rápido

  1. Cubra o esfregaço com o corante May Grünwald diluído por 1 minuto.
  2. Lave com água destilada tamponada.
  3. Cubra com água tamponada e deixe descansar por 1 minuto.
  4. Coloque o corante Giemsa diluído e deixe por 5 minutos.
  5. Lave com água destilada tamponada e deixe secar ao ar.

As técnicas descritas aqui são um guia, mas deve-se ter em mente que os procedimentos e os tempos de coloração variam de acordo com a empresa comercial que vende os reagentes. É aconselhável seguir os passos estritamente indicados por cada casa comercial.

Técnica alargada de coloração de líquido espermático

1- Cubra a pasta com uma fina camada da solução May Grünwald por 4 minutos.

2- Remova o corante e lave com água destilada.

3- Coloque uma camada de Giemsa diluído (1:10) em água destilada por 15 minutos.

4- Remova o corante e lave com água destilada.

5- Deixe secar e observe ao microscópio.

Coloração de May Grünwald-Giemsa: fundamento, técnica e usos 2

Cores esperadas com a coloração May Grünwald Giemsa

Especificações importantes

A técnica requer que os reagentes e as soluções de lavagem tenham um pH ajustado para 7,2 -7,3, para que as afinidades dos corantes pelas estruturas celulares não sejam distorcidas e a cor final esperada não varie.

Usos

Essa técnica é usada pelos laboratórios clínicos para manchar sangue periférico e esfregaços de medula óssea, cortes de tecidos e citologias.

No campo hematológico, essa técnica é de vital importância no estudo de anormalidades celulares em termos de forma, tamanho e número. É uma ferramenta muito valiosa para o diagnóstico de certas doenças, como leucemia e anemias.

Além disso, possui uma excelente utilidade na busca de parasitas nas áreas hematológica ( Plasmodium sp e Trypanosoma cruzi ) ou histológica ( Leishmanias sp ).

Citologia vaginal

No que diz respeito à citologia vaginal, esta técnica é especialmente vantajosa para a observação de Trichomonas vaginalis. Esse é um achado importante, pois sua presença simula quadros in situ de carcinoma que desaparecem mais tarde quando o parasita é eliminado.

Amostra de esperma

Tem sido uma ferramenta ideal para o estudo de amostras de espermatozóides, pois fornece informações valiosas sobre a qualidade dos espermatozóides.

Os dados que ele oferece têm a ver principalmente com número e morfologia, bem como com células concomitantes que podem estar presentes e que são de importância vital, como células germinativas, leucócitos e células epiteliais.

Com esta análise, é possível descrever as anormalidades observadas no espermatozóide da cabeça, pescoço, peça do meio e peça principal.

Além disso, eles também podem ajudar a mostrar casos de hemosspermia (presença de glóbulos vermelhos no sêmen) e leucospermia ou piospermia (aumento do número de leucócitos no sêmen).

Referências

  1. Costamagna S, Prado M. Validação de teste fresco, manchas de Grünwald-Giemsa e Gram e meios de cultura para o diagnóstico de Trichomonas vaginalis . Parasitol 2001; 25 (1-2): 60-64. Disponível em: scielo.
  2. Laboratório Merck KGaA. Pode Grünwald eosina azul metileno para microscopia.
  3. «Coloração de May-Grünwald-Giemsa.» Wikipedia, A enciclopédia livre . 15 Nov 2018, 14:37 UTC. 8 de janeiro de 2019 às 04:29: en.wikipedia.org
  4. Laboratório de Produtos Químicos do Panreac. Reagentes para técnicas histológicas, hematologia e microbiologia. Disponível em: glasschemicals.com
  5. Retamales E, Manzo V. Recomendação para a coloração de esfregaços de sangue para leitura de hemograma. Laboratório Nacional de Biomédica e Referência. Instituto de Saúde Pública do Chile.
  6. Espermograma de Sarabia L. de acordo com os critérios da OMS. Programa de Anatomia e Biologia do Desenvolvimento. Faculdade de Medicina. Universidade do Chile. Disponível em: pp.centramerica.com

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