O óleo de imersão é um líquido utilizado em microscopia óptica para melhorar a resolução e a qualidade das imagens observadas. Composto por substâncias de alta viscosidade e índice de refração similar ao do vidro, o óleo de imersão cria um ambiente homogêneo entre a lente do microscópio e a amostra, evitando a dispersão da luz e aumentando a nitidez das imagens. Além disso, o óleo de imersão é amplamente utilizado em laboratórios de pesquisa, hospitais e indústrias para análise de células, tecidos e materiais biológicos. Sua aplicação é fundamental em estudos que exigem alta precisão e detalhamento das estruturas observadas.
Para que serve o óleo de imersão em microscopia?
O óleo de imersão é um componente essencial na técnica de microscopia óptica, sendo utilizado para melhorar a resolução e qualidade das imagens observadas sob o microscópio. Composto por substâncias de alta viscosidade, como óleos minerais ou de silicone, o óleo de imersão possui características que o tornam ideal para esse fim.
Quando observamos amostras com grande poder de ampliação, como em microscopia de imersão, a luz tende a se dispersar ao passar pelo ar e pelo vidro do microscópio, resultando em perda de resolução e contraste. O uso do óleo de imersão tem o objetivo de minimizar essa dispersão, preenchendo o espaço entre a lente objetiva e a lâmina da amostra.
Com isso, o óleo de imersão cria um meio de refração homogêneo, permitindo que a luz passe diretamente da lente para a amostra, sem desvios. Isso resulta em imagens mais nítidas e detalhadas, possibilitando a observação de estruturas microscópicas com maior precisão.
Sua composição e características únicas contribuem para a melhoria da resolução e contraste, tornando a observação de micro-organismos e estruturas celulares mais precisa e detalhada.
Importância do óleo de imersão na objetiva de 100x: saiba para que serve.
O óleo de imersão é um componente essencial para a correta utilização da objetiva de 100x em microscópios de alta resolução. Este tipo de óleo possui uma composição específica que permite aumentar a resolução das imagens captadas, garantindo uma visualização mais nítida e detalhada de estruturas microscópicas.
Para utilizar a objetiva de 100x corretamente, é necessário aplicar uma pequena quantidade de óleo de imersão sobre a lâmina que contém a amostra a ser observada. O óleo de imersão possui uma característica única que o torna capaz de preencher o espaço entre a lente da objetiva e a lâmina, evitando a dispersão da luz e, consequentemente, melhorando a qualidade da imagem.
Além disso, o uso do óleo de imersão na objetiva de 100x também ajuda a reduzir a distorção causada pela refração da luz ao passar de um meio para outro, garantindo uma visualização mais precisa e detalhada das estruturas microscópicas. Sem o uso do óleo de imersão, a resolução das imagens seria significativamente comprometida.
Portanto, a utilização correta do óleo de imersão na objetiva de 100x é fundamental para garantir resultados precisos e confiáveis em análises microscópicas de alta resolução. Sem ele, a qualidade das imagens seria comprometida, dificultando a identificação e estudo de estruturas microscópicas importantes.
A importância do óleo de imersão em observações microscópicas: aspectos físicos explicados.
O óleo de imersão é um componente essencial em observações microscópicas de alta resolução, contribuindo significativamente para a qualidade das imagens obtidas. Composto por substâncias de baixa volatilidade, o óleo de imersão possui uma grande capacidade de refratar a luz, o que é fundamental para obter uma imagem nítida e detalhada. Além disso, sua alta viscosidade permite que ele preencha o espaço entre a lente objetiva e a lâmina, evitando a dispersão da luz e melhorando o contraste.
Quando um microscópio é utilizado com ótica de imersão, a distância entre a lente objetiva e a amostra é reduzida, o que aumenta significativamente a resolução da imagem. Isso ocorre devido ao fato de que a luz passa do ar para o óleo e depois para a amostra, sem sofrer desvios significativos. Dessa forma, é possível observar estruturas minúsculas com muito mais clareza e precisão.
Além disso, o óleo de imersão ajuda a minimizar a perda de luz durante a observação, garantindo uma maior intensidade luminosa e, consequentemente, uma imagem mais brilhante. Isso é especialmente importante em técnicas de microscopia de fluorescência, onde a detecção de sinais fracos requer uma iluminação adequada para uma visualização adequada.
Portanto, seu uso é indispensável para pesquisas científicas, análises clínicas e diversas outras aplicações que dependem da observação detalhada de estruturas microscópicas.
Qual a lente de microscópio que exige o uso exclusivo de óleo de imersão?
A lente de microscópio que exige o uso exclusivo de óleo de imersão é a lente de imersão. Essa lente é utilizada em microscópios de alta resolução, como o microscópio de imersão, para obter imagens mais nítidas e detalhadas.
O óleo de imersão é um líquido transparente e incolor, geralmente de origem mineral, com uma refração semelhante à do vidro. Ele é utilizado para preencher o espaço entre a lente de imersão e a lâmina de amostra, eliminando o índice de refração entre o ar e o vidro, o que melhora significativamente a qualidade da imagem.
O uso de óleo de imersão permite uma maior resolução e contraste nas imagens observadas ao microscópio, pois reduz a dispersão da luz e minimiza a perda de detalhes. Além disso, ele também ajuda a reduzir as aberrações cromáticas, proporcionando uma visualização mais precisa das estruturas biológicas.
É importante ressaltar que o óleo de imersão deve ser utilizado com cuidado e precisão, pois qualquer impureza ou bolha de ar pode prejudicar a qualidade da imagem. Por isso, é essencial seguir as instruções do fabricante e realizar a limpeza adequada da lente e da lâmina de amostra antes de aplicar o óleo.
O óleo de imersão é um componente essencial para a observação de amostras em microscopia de alta resolução, proporcionando uma visualização mais detalhada e precisa das estruturas biológicas.
Óleo de imersão: composição, características, usos
O óleo de imersão é um líquido viscoso e transparente, possuindo um índice de refracção elevado. Por esse motivo, é amplamente utilizado em observações microscópicas, pois fornece a propriedade de concentrar a luz quando ela passa pelo objetivo de 100X do microscópio, aumentando seu poder de resolução.
Isso ocorre porque um filme viscoso é formado entre a lente e a mancha, impedindo a dispersão dos raios de luz ao atingir o ar, conseguindo concentrar os feixes de luz em direção à amostra.
O óleo de imersão é usado apenas com o objetivo de 100X. É por isso que o objetivo 100X também é chamado de objetivo de imersão. O resto é conhecido como alvos secos. Este objetivo não pode ser utilizado sem o óleo de imersão, pois sem isso a exibição não seria satisfatória.
A principal função do óleo de imersão é fornecer imagens mais nítidas, mais nítidas e definidas, permitindo a observação de detalhes que com outros objetivos não seriam possíveis.
O primeiro óleo usado para esse fim foi o óleo de anis, usado em conjunto com a primeira lente de imersão criada por Giovanni Battista Amici. Isso apenas evitou a aberração cromática, mas não aumentou a abertura numérica do sistema de lentes.
Então, o óleo de cedro foi usado, mas apresentou muitas desvantagens que forçaram seu desuso. Entre eles, estava a alta acidez, que prejudicou os objetivos em curto prazo.
Posteriormente, outras substâncias, como água e glicerina, foram utilizadas até a criação de óleos de imersão sintéticos, que foram gradualmente aperfeiçoados até atingir o óleo de imersão atual, que é um composto complexo de substâncias orgânicas.
Composição do óleo de imersão
O óleo de imersão é constituído por uma mistura de compostos orgânicos, tais como: terfenil, terfenil hidrogenado, hidrocarbonetos naturais e polibutenos.
Características do óleo de imersão
óleo de imersão é um líquido de cor amarela clara, ligeiramente viscoso aparência, odor característico e densidade entre 0,92-0,99 g / cm 3 .
O óleo de imersão não é solúvel em água e tem um ponto de ebulição de 340 ° C. O índice de refração a (n 20 ° C / D): varia de 1.482 – 1.516. Enquanto isso, o índice de inflamação é de 110 ° C e a viscosidade varia de 100 a 120 mPa.s.
Este produto deve ser descartado adequadamente, pois é ecotóxico. Em outras palavras, é prejudicial ao meio ambiente, afetando principalmente animais aquáticos. Por outro lado, é irritante para a pele e as mucosas. Se ingerido, é nefrotóxico e cardiotóxico.
O óleo de imersão é estável de 15 a 25 ° C, a temperatura na qual deve ser armazenado.
Fundamentos do óleo de imersão
Ao usar alvos de maior ampliação, a intensidade da luz deve ser aumentada. No entanto, muitos dos feixes de luz são perdidos porque são dispersos quando atingem o ar (espaço entre a lamela e a lente), e até alguns raios sofrem uma reflexão total.
O óleo de imersão possui um índice de refração semelhante ao do vidro. Portanto, quando o óleo é contatado entre a lente 100X e a lamela, os feixes de luz são concentrados.
Os raios concentrados passam pela amostra e aumentam a nitidez da imagem, ou seja, aumentam a abertura numérica da lente e corrigem as aberrações cromáticas e esféricas.
Usos ou aplicativos
O uso de óleo de imersão é especialmente necessário quando é necessário observar uma imagem de maneira mais ampla, utilizando o objetivo de maior ampliação (objetiva 100X) e, assim, poder ver detalhes essenciais para estabelecer um diagnóstico.
Portanto, é amplamente utilizado em estudos microscópicos de diversas áreas, tais como: histologia, citologia, hematologia e bacteriologia. Por exemplo, é útil para estudar as características das células e tecidos de um paciente.
Serve também para a análise de esfregaços de sangue, onde você deseja detalhar características dos hemoparasitas dentro e fora dos eritrócitos, bem como nas preparações de Gram, para definir as características morfotetoriais dos microrganismos.
Geralmente é usado em preparações fixas, pois não é recomendado em preparações frescas. Isso ocorre porque a tensão superficial do óleo faz com que a lamela se mova, o que faz com que a amostra se mova durante sua observação e impede sua análise.
Por outro lado, o óleo de imersão não é útil apenas na microscopia óptica convencional: também é usado em microscópios de fluorescência de reflexão interna total (TIRFM) e em aplicações de fluorescência confocal.
Etapas para observar uma preparação usando óleo de imersão
Para ver uma preparação sob o microscópio, você deve primeiro se concentrar na preparação com o objetivo de aumentar a ampliação, geralmente 10X, com baixa intensidade de luz.
Em seguida, o objetivo de 40X é passado e o passo da luz é ligeiramente aumentado. Algumas análises podem ser realizadas com esse aumento, mas para ver detalhes estruturais, você precisa do aumento de 100X.
Antes de passar para a objetiva 100X, uma gota de óleo de imersão é colocada na lamela, exatamente onde você deseja observar e, em seguida, o revólver do microscópio é movido para localizar a objetiva 100x na preparação.
A intensidade da luz é regulada (aumentada) (movendo o condensador e abrindo o diafragma). Então, com pequenos movimentos que são dados ao parafuso do micrômetro (para frente ou para trás), ele deve estar perfeitamente focado se o microscópio usar lentes parafocais.
Se você tentar focar a preparação diretamente com o objetivo de imersão, pode haver problemas para encontrar o foco. Não é uma ação impossível, mas a dificuldade aumenta significativamente.
Cuidado
Para usar o óleo de imersão, certas condições devem ser levadas em consideração.
Quando uma preparação colorida é realizada, como um esfregaço manchado com Giemsa ou um Gram, deve-se esperar que o esfregue secar completamente antes de colocar o óleo de imersão. Caso contrário, o óleo e a água formarão micelas que não permitirão a visualização da preparação.
Por outro lado, depois de observar o lote de preparações, ou seja, no final do dia de trabalho, a objetiva 100X deve ser cuidadosamente limpa, usando um papel para lentes com etanol. Se a lente for deixada suja, o óleo secará e será muito difícil removê-la, danificando o campo de visão.
Além disso, lembre-se de que o óleo é inflamável e deve ser mantido longe de fontes de calor (isqueiros). É importante evitar aquecê-lo acima de 65 ° C.
Finalmente, o petróleo é um produto tóxico. Portanto, deve-se evitar o contato direto com a pele e as mucosas, onde pode ocorrer irritação leve. Para evitar acidentes, recomenda-se o uso de luvas e óculos de segurança.
Em caso de contato com o óleo, a área deve ser lavada com água em abundância. Se o óleo espirrar nos olhos, ele deve ser lavado da mesma maneira, mantendo os olhos abertos. Em caso de ingestão acidental, é importante beber água morna e provocar vômitos, além de procurar o médico mais próximo.
Referências
- «Microscópio de fluorescência de reflexão interna total.» Wikipedia, A Enciclopédia Livre . 30 de dezembro de 2018 às 22:46 14 de maio de 2019, 01:54 <https://es.wikipedia.org/w
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- Biologia Ambiental e Microbiologia. Operação do microscópio óptico. Disponível em: eumed.net/books.
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