Antiestreptolisina O: quantificação, justificativa, técnica, patologias

O ASO está anticorpo gerado em resposta a uma infecção causada pela bactéria Streptococcus pyogenes , também conhecidas como beta-hemolítico do grupo Streptococcus A. Isto produz duas exotoxinas com Estreptolisinas actividade hemolítica chamados “S” e “O” .

A estreptolisina S é responsável pela hemólise beta que ocorre no ágar sanguíneo e, embora seja tóxica para certas células do sistema imunológico, não é antigênica. Enquanto a estreptolisina O, por ser instável contra o oxigênio, é responsável pela hemólise que ocorre abaixo do ágar sanguíneo e isso é antigênico.

Antiestreptolisina O: quantificação, justificativa, técnica, patologias 1

Streptococcus pyogenes / Diagrama do que acontece no teste ASTO (reação de aglutinação). (Anticorpos ligados a partículas de látex contendo o antígeno específico). Fonte: Usuário: Graham Beards [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0)[/Alejandro Porto [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses/) by-sa / 3.0)]

Portanto, quando as células do sistema imunológico interagem com a estreptolisina O, ocorre uma resposta imune específica, que gera a ativação dos linfócitos B. Essas células produzem anticorpos direcionados contra a estreptolisina O. Portanto, os anticorpos são chamados antistreptolisina O.

O Streptococcus pyogenes produz diversas patologias, entre as quais: amigdalite, erisipela, impetigo, febre puerperal, escarlatina , e sepsis. Os anticorpos antistreptolisina O aparecem entre 8 a 30 dias após o início da infecção.

A maioria dessas infecções é muito comum na população, por isso é comum as pessoas terem anticorpos anti-estreptolisina O no sangue. Títulos baixos indicam uma infecção passada por essa bactéria, mas um título alto ou francamente indica uma infecção recente ou em andamento.

Quantificação de anticorpos anti-estreptolisina O

No laboratório, o título de anticorpos anti-estreptolisina “O” pode ser medido através de um teste sorológico. O teste anti-estreptolisina O (ASTO) é baseado em uma reação de aglutinação do látex.

Isso pode ser feito semiquantitativamente, os relatórios nos cruzamentos ou o título também podem ser quantificados. É normal e não significativo encontrar valores de até 200 UI / ml ou unidades de Todd / ml.Acima desse valor é considerado positivo e é clinicamente significativo.

Esta análise não exige que o paciente esteja em jejum. Como amostra, é utilizado soro, ou seja, o sangue do paciente é coletado e colocado em um tubo sem anticoagulante e, em seguida, centrifugado para obter o soro.

Fundação da técnica ASTO

A técnica utiliza partículas de látex como suporte para fixar o antígeno estreptolisina O. As partículas absorvidas do antígeno reagem com o soro do paciente. Se o paciente tiver um anticorpo anti-estreptolisina O, ele se ligará ao antígeno ligado à partícula de látex.

Essa união causa uma aglutinação que é macroscopicamente visível. A intensidade da reação é diretamente proporcional à concentração de anticorpos presentes.

Técnicas

– Técnica semiquantitativa

A intensidade da reação pode ser semi-quantificada em cruzamentos.Para isso, uma placa de reação sorológica é retirada e colocada:

50 µl de soro e 50 µl de reagente ASTO. Misture bem com uma vara de madeira e coloque na batedeira por 2 minutos. ObserveSe um rotador automático não estiver disponível, ele deverá ser executado manualmente.

Interpretação

Suspensão sem caroços (uniforme): negativa

1. + = reação fraca

2. ++ = reação leve

3. +++ = reação moderada

4. ++++ = reação forte

Os soros positivos com 3 e 4 cruzamentos podem ser quantificados.

– técnica quantitativa

Para quantificação em série, são feitas diluições em série 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

Isso é feito da seguinte maneira: são tomados 4 tubos de ensaio ou tubos de Kahn e são colocados 0,5 ml de solução salina fisiológica no total. Em seguida, 0,5 ml do soro do paciente é adicionado ao primeiro tubo. Mistura bem. Esse tubo corresponde à diluição 1: 2.

Posteriormente, 0,5 ml são transferidos para o tubo 2 e bem misturados. Este tubo corresponde à diluição 1: 4 e assim por diante, até atingir a diluição desejada.

São colhidos 50 µL de cada diluição e reagidos com 50 µL de reagente ASTO numa placa de aglutinação, conforme explicado na técnica semiquantitativa.

Interpretação

A diluição mais alta na qual é observada aglutinação visível é levada em consideração. Os cálculos são realizados da seguinte forma:

ASTO = Inverso da maior diluição positiva x sensibilidade da técnica (constante).

Exemplo: Paciente com reação positiva de até 1: 8

ASTO = 8 x 200 UI / ml = 1600 UI / ml ou Unidades Todd / ml.

Valor referencial

Adulto normal: até 200 UI / ml

Crianças normais: até 400 UI / ml

Recomendações

É aconselhável montar um controle positivo e negativo com os pacientes para garantir que o reagente esteja em ótimas condições. Se o controle positivo não se aglutinar ou o controle negativo conseguir aglutinar o reagente, ele não poderá ser utilizado.

A reação deve ser interpretada após 2 minutos, após esse período não é válido se houver aglutinação. São falsos positivos.

Soros hiperlipidêmicos interferem na reação. Eles podem dar falsos positivos.

Um valor isolado de ASTO não é muito útil. Deve ser acompanhado por sintomatologia.

Além disso, é aconselhável realizar pelo menos duas medições de ASTO quando houver suspeita de febre reumática ou glomerulonefrite pós-estreptocócica, para demonstrar o aumento dos níveis de anti-estereotolisina O e confirmar o diagnóstico.

Patologias com altos títulos de antistreptolisina O

Os anticorpos antistreptolisina são aumentados após sofrer uma infecção por Streptococcus pyogenes ou Streptococcus beta-hemolítico do Grupo A.

Entre eles estão: faringite aguda, escarlatina, impetigo, erisipela, febre puerperal e septicemia.

Alguns pacientes que sofreram infecções estreptocócicas recentes ou repetidas podem desenvolver doenças auto-imunes, como sequela ou complicação da infecção pós-estreptocócica, como glomerulonefrite aguda e febre reumática.

Doenças auto-imunes pós-estreptocócicas

Febre reumática

É uma complicação ou sequela inflamatória que pode aparecer após 1 a 5 semanas de ter sofrido uma infecção estreptocócica. Os títulos de antistreptolisina O aumentam consideravelmente 4 a 5 semanas após o início da doença.

Um alto título de ASTO orienta o diagnóstico, mas não está relacionado à gravidade da doença, pois sua diminuição não implica melhoria.

Os anticorpos antistreptolisina O reagem de maneira cruzada com o colágeno e as fibras musculares, afetando certos órgãos (coração, pele, articulações e sistema nervoso, entre outros).

Esta complicação ou sequela está associada a envolvimento cardíaco, febre, mal-estar, poliartrite migratória não supurativa, coreia, etc.

Glomerulonefrite aguda

A glomerulonefrite aguda é uma sequela não supurativa produzida pela deposição de complexos antígeno-anticorpo na membrana basal glomerular.

A formação e circulação de complexos antígeno-anticorpo (ag-ac) gerados por infecções estreptocócicas podem levar a alterações exsudativas e inflamação dos glomérulos, com proteinúria e hematúria.

Esses complexos ag-ac são depositados no glomérulo e ativam a cascata do complemento, causando dano endotelial glomerular. Portanto, é considerada uma doença auto-imune, uma vez que o sistema imunológico do indivíduo danifica seus próprios tecidos.

Os anticorpos anti-estreptolisina O são muito altos e os níveis de complemento diminuídos.

Referências

  1. Wiener Laboratories Látex ASO. 2000. Disponível em: wiener-lab.com.ar
  2. Contribuidores da Wikipedia. «Anti-estreptolisina O.» Wikipedia, A Enciclopédia Livre . Wikipedia, The Free Encyclopedia, 23 de janeiro de 2019. Web. 19 de julho de 2019.
  3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolisina O título em saúde e doença: níveis e significância.Pediatr Rep . 2012; 4 (1): e8. Disponível em: ncbi.nlm.nih
  4. Sen E, Ramanan A. Como usar o antistreptolisina O titre. Arch Dis Child Educ Pract Ed. 2014; 99 (6): 231-8. Disponível em: ncbi.nlm.nih
  5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnóstico microbiológico (5ª ed.). Argentina, Editorial Panamericana SA
  6. González M, González N. 2011. Manual de Microbiologia Médica. 2ª edição, Venezuela: Gerenciamento de mídia e publicações da Universidade de Carabobo.

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