O caldo de malonato é um meio de cultura utilizado em microbiologia para o cultivo de bactérias que possuem a capacidade de metabolizar malonato. Este meio é composto por malonato de sódio, peptona, água destilada e um indicador de pH. A justificativa para o uso do caldo de malonato é a capacidade de diferenciar bactérias que são capazes ou não de utilizar o malonato como fonte de carbono em seu metabolismo. A preparação do caldo de malonato é simples e envolve a dissolução dos componentes em água destilada, seguida da esterilização por autoclavagem. Os usos do caldo de malonato incluem a identificação de bactérias, como por exemplo, a diferenciação entre Escherichia coli e Enterobacter aerogenes.
Caldo Malonato Merck: solução pronta para cultura bacteriana de alta qualidade.
O Caldo Malonato Merck é uma solução pronta para cultura bacteriana de alta qualidade, amplamente utilizada em laboratórios de microbiologia. Este meio de cultura é utilizado para o isolamento e identificação de bactérias que são capazes de utilizar o malonato como única fonte de carbono.
A justificativa para o uso do Caldo Malonato Merck está relacionada à sua composição balanceada, que fornece os nutrientes necessários para o crescimento das bactérias de interesse. Além disso, a solução pronta para uso economiza tempo e minimiza o risco de contaminação durante a preparação do meio de cultura.
A preparação do Caldo Malonato Merck é simples e rápida. Basta adicionar água estéril à solução conforme as instruções do fabricante e esterilizar por autoclavagem. Após o preparo, o meio de cultura está pronto para ser inoculado com a amostra bacteriana e incubado em condições adequadas.
Os usos do Caldo Malonato Merck incluem a identificação de bactérias fermentadoras de malonato, como alguns membros da família Enterobacteriaceae. A capacidade dessas bactérias de utilizar o malonato como fonte de carbono pode ser um importante critério para diferenciar espécies dentro deste grupo.
Em resumo, o Caldo Malonato Merck é uma ferramenta essencial para a microbiologia, permitindo o cultivo seletivo de bactérias de interesse e contribuindo para a identificação precisa de diferentes espécies bacterianas.
Inibidor de Malonato: sua eficácia na inibição da produção de malonato.
O inibidor de malonato é uma substância que atua inibindo a produção de malonato, um composto orgânico encontrado em células vivas. A eficácia desse inibidor se dá pela sua capacidade de bloquear a enzima responsável pela síntese do malonato, impedindo assim a sua formação.
O caldo de malonato é um meio de cultura utilizado para o isolamento e identificação de bactérias que possuem a capacidade de utilizar o malonato como única fonte de carbono. Sua preparação envolve a adição de malonato de sódio a um meio de cultivo adequado, proporcionando as condições ideais para o crescimento desses microrganismos.
O uso do caldo de malonato é importante em laboratórios de microbiologia para a identificação de bactérias com características metabólicas específicas. Ao adicionar o inibidor de malonato a esse meio de cultura, é possível verificar se a bactéria é capaz de produzir malonato mesmo na presença do inibidor, o que auxilia na classificação e estudo desses micro-organismos.
Informações sobre o Ágar SS: composição, indicações, posologia e contraindicações.
O Ágar SS é um meio de cultura seletivo utilizado para o isolamento e identificação de Salmonella e Shigella em amostras clínicas e de alimentos. Sua composição inclui sulfato de sódio, citrato de sódio, lactose, peptona, vermelho de fenol, ágar e outros componentes.
As indicações para o uso do Ágar SS incluem o diagnóstico de infecções gastrointestinais causadas por Salmonella e Shigella. A posologia recomendada é a semeadura das amostras nas placas de Ágar SS e incubação a 37°C por 24 horas.
Quanto às contraindicações, o Ágar SS não é indicado para o cultivo de bactérias não relacionadas a Salmonella e Shigella, pois sua seletividade pode inibir o crescimento de outras espécies bacterianas.
Caldo de malonato: justificativa, preparação e usos.
O caldo de malonato é um meio de cultura utilizado para o isolamento e identificação de bactérias que são capazes de utilizar o malonato como fonte de carbono. Sua justificativa de uso está na capacidade de distinguir bactérias que possuem a enzima malonato desidrogenase.
Para preparar o caldo de malonato, basta dissolver o malonato de sódio em água destilada e adicionar os demais componentes do meio, como peptona e indicador de pH. Após a autoclavagem, o meio está pronto para ser utilizado.
Os usos do caldo de malonato incluem o isolamento e identificação de bactérias como Enterobacter aerogenes e Klebsiella pneumoniae, que são capazes de utilizar o malonato como fonte de carbono. Além disso, o caldo de malonato também pode ser utilizado para diferenciar essas bactérias de outras que não possuem a capacidade de utilizar o malonato.
Síntese e aplicações do malonato de dietila: propriedades, usos e reações químicas.
O malonato de dietila é um éster que possui diversas aplicações na indústria química. Sua síntese pode ser realizada através da reação entre o éster dietílico e o cianeto de hidrogênio. Este composto apresenta propriedades importantes, como a capacidade de ser um intermediário em diversas reações químicas, além de possuir um ponto de fusão e ebulição adequados para muitas aplicações.
Entre os usos do malonato de dietila, podemos destacar sua utilização como reagente em sínteses orgânicas, na produção de corantes e na fabricação de produtos farmacêuticos. Além disso, este composto pode participar de reações químicas importantes, como a síntese de compostos carbonílicos e a formação de derivados de ácido malônico.
As reações químicas envolvendo o malonato de dietila são variadas e podem resultar em produtos de grande importância. Por exemplo, a reação deste éster com um aldeído pode levar à formação de um ácido dicarboxílico, ampliando as possibilidades de síntese de compostos orgânicos complexos.
Caldo de malonato: justificativa, preparação e usos.
O caldo de malonato é um meio de cultura utilizado para o crescimento de bactérias que possuem a capacidade de utilizar o malonato como fonte de carbono. Esta justificação se dá pela necessidade de identificar e diferenciar esses microorganismos em laboratórios de microbiologia.
A preparação do caldo de malonato envolve a dissolução de malonato de sódio em água destilada, juntamente com outros componentes que garantem as condições ideais para o crescimento das bactérias de interesse. Após a esterilização, o meio de cultura está pronto para ser utilizado em testes laboratoriais.
Os usos do caldo de malonato incluem a identificação de bactérias capazes de metabolizar o malonato, auxiliando na classificação e caracterização desses microorganismos. Além disso, este meio de cultura pode ser útil na pesquisa científica e no diagnóstico de infecções bacterianas em seres humanos e animais.
Caldo de malonato: justificativa, preparação e usos
O caldo de malonato é o meio de cultura líquido utilizado para o teste de diagnóstico (malonato), usado para diferenciar alguns géneros da família Enterobacteriaceae. Foi criado por Leifson em 1933 e posteriormente modificado por Ewing, que adicionou uma pequena quantidade de dextrose e extrato de levedura à fórmula original.
Atualmente, o meio consiste em extrato de levedura, sulfato de amônio, fosfato dipotássico, fosfato monopotássico, cloreto de sódio, malonato de sódio, dextrose e azul de bromotimol. Este teste é geralmente incluído na bateria bioquímica de identificação de Enterobactérias, ajudando a diferenciar certos gêneros e espécies.
O teste do malonato baseia-se principalmente na capacidade de alguns microrganismos de usar o malonato de sódio como única fonte de carbono e como fonte de nitrogênio do sulfato de amônio.
O teste de malonato é geralmente positivo em algumas espécies dos gêneros Enterobacter, Klebsiella e Citrobacter. Enquanto isso, a maioria das espécies dos gêneros Escherichia, Salmonella, Shigella, Edwardsiella, Yersinia, Serratia, Morganella, Proteus e Providencia, apresentam uma reação negativa.
Fundação
O teste de malonato consiste em evidenciar as bactérias capazes de usar o malonato de sódio como única fonte de carbono e o sulfato de amônio como fonte de nitrogênio.
A maioria das enterobactérias que não usam malonato são capazes de crescer nesse ambiente, tendo como dextrose e extrato de levedura como nutrientes.
Nesse caso, qualquer tentativa de alcalinização pelo uso de peptons será neutralizada pela produção de ácidos gerados pela fermentação da dextrose. Da mesma forma, os fosfatos de dipotássio e monopotássio atuam como um tampão, mantendo o pH em 6,7.
É por isso que, quando o teste é negativo, o caldo é da mesma cor original (verde). Em raras ocasiões, o meio pode se acidificar devido à fermentação da dextrose; Sem o uso das peptonas, o indicador de pH mudaria a cor do meio para amarelo. Para que isso aconteça, o pH deve cair para 6.
Agora, quando esse teste é positivo, diz-se que o microorganismo usou o malonato e o sulfato de amônio como fontes de carbono e nitrogênio, respectivamente, sem fazer uso dos outros componentes.
Nesse caso, o meio é alcalinizado devido à liberação de sódio e à consequente formação de NaOH. Nesse sentido, o indicador de pH (azul de bromotimol) muda a cor do meio de verde para azul quando o pH é igual ou superior a 7,6. O azul pode ser claro ou intenso (azul da Prússia).
Finalmente, o cloreto de sódio mantém a osmolaridade do meio e a água é o diluente de todos os componentes.
Interpretação
Caldo da mesma cor (verde): teste negativo
Caldo amarelo: teste negativo
Caldo azul claro ou intenso: teste positivo
Existe uma variante chamada caldo de malonato de fenilalanina, também chamada meio Shaw e Clarke. Nesse caso, dois testes podem ser analisados, o uso de malonato como fonte de carbono e a produção de ácido pirúvico a partir da fenilalanina.
Preparação
Caldo Malonate
A quantidade de gramas especificada pelo folheto da casa comercial escolhida é pesada (pode variar de uma para outra). Gramas pesados são suspensos em um litro de água destilada. Aqueça levemente até dissolver completamente. Distribua 3 ml do meio nos tubos de ensaio 13/100 com tampa de algodão.
Esterilizar em autoclave a 121 ° C por 15 ou 20 minutos.
Deixe esfriar antes de usar. Se eles não forem usados imediatamente, guarde na geladeira até o uso. Traga os caldos à temperatura ambiente antes de inoculá-los.
O pH do meio deve ser 6,7 ± 0,2. A cor do meio preparado é verde garrafa.
Caldo de malonato de fenilalanina
Pesar 11 g do meio desidratado e dissolver em 1 litro de água destilada. O restante da preparação é igual ao descrito acima.
Também pode ser preparado adicionando 2 g / L de fenilalanina ao meio de caldo de malonato antes de ser esterilizado.
Use
É usado como parte da bateria de testes bioquímicos montados para a identificação de bactérias da família Enterobacteriaceae.
Ajuda a distinguir entre:
-O gênero Klebsiella e Enterobacter (+) do gênero Escherichia e Serratia (-).
-As espécies de Salmonella enterica ssp arizonae , Salmonella enterica ssp salame e Salmonella enterica ssp diarizonae (+), das espécies Salmonella enterica ssp enterica (-).
-O gênero Klebsiella geralmente (+) do gênero Actinobacillus (-).
-Em algumas ocasiões, pode ajudar na diferenciação de gêneros e espécies de bactérias não pertencentes à família Enterobacteriaceae, como entre bacilos Gram-negativos não fermentativos Alcaligenes faecalis (+) e Acinetobacter sp (-).
Procedimento
Sob um isqueiro, uma porção de uma colônia pura é retirada, usando uma alça de platina devidamente esterilizada e resfriada. A amostra colhida (inóculo leve) se dissolve no caldo de malonato. Incubar com a tampa solta na aerobiose a 35 ° C ± 0,2 por 24 a 48 horas.
O caldo de malonato também pode ser inoculado a partir de uma cultura de 18 a 24 horas em caldo de soja tripticase. Neste caso, são tomados 0,01 ml com uma pipeta estéril e o caldo de malonato é inoculado. Incubar com a tampa solta na aerobiose a 35 ° C ± 0,2 por 24 a 48 horas.
Após o tempo, os resultados são interpretados. Qualquer vestígio de azul que culminou após 48 horas de incubação deve ser considerado positivo. O teste não deve ser interpretado como negativo até que o tempo de incubação de 48 horas seja cumprido.
No caso de usar a variante do caldo de malonato de fenilalanina, o malonato é interpretado primeiro e depois são adicionadas 5 gotas de HCL 1N e 3-5 gotas de cloreto férrico a 8%. Uma cor verde escura é interpretada como um teste positivo para fenilalanina. Se, em vez disso, o meio ficar azul claro, o teste será negativo para a fenilalanina.
Controle de qualidade
Para realizar o controle de esterilidade do meio, um ou dois caldos devem ser incubados a 35 ° C ± 0,2 por 24 horas de incubação. Após esse período, não deve haver turbidez ou alteração de cor.
Cepas conhecidas ou certificadas podem ser usadas para controle de qualidade, como: Enterobacter aerogenes ATCC 13048, Klebsiella pneumoniae ATCC 33945, Salmonella enteric ssp arizonae ATCC 13314 e Escherichia coli ATCC 25922.
Os resultados esperados são:
- Enterobacter aerogenes , Klebsiella pneumoniae e Salmonella enteric ssp arizonae dão uma reação positiva (cor azul média).
- Para Escherichia coli, o resultado deve ser negativo, ou seja, espera-se que não haja mudança de cor (verde) ou que fique amarelo devido à fermentação da glicose.
Limitações
Não use caldos que mostrem turbidez, precipitados, mudança de cor ou qualquer sinal de deterioração.
Referências
- Pedraza J, Sanandres N, Varela Z, Aguirre E, Camacho J. Isolamento microbiológico de Salmonella spp . e ferramentas moleculares para detecção. Uninorte saúde. Barranquilla (Col.) 2014; 30 (1): 73-94. Disponível em: scielo.org.co
- BBL Caldo de malonato, Ewing modificado. 2007. Disponível em: bd.com
- Laboratórios Senna Caldo de Malonato. Disponível em: cientificasenna.com
- RenyLab Caldo de Malonato. 2013. Disponível em: es.renylab.ind.br
- Mbiolog Diagnostics. Caldo de Malonato. Disponível em: mbiolog.com
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnóstico microbiológico 5a ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
- Laboratórios Conda Pronadisa. Caldo de malonato de fenilalanina. Disponível em: condalab.com