Meio de Cary Blair: fundação, preparação e usos

O meio Cary Blair é um ágar semi-sólido, usado para o transporte e conservação de amostras biológicas que abrigam patógenos intestinais, microorganismos lábeis e anaeróbicos.Como todos os meios de transporte, sua função é manter a amostra em condições ideais até que ela seja cultivada. Os microrganismos patogênicos presentes, bem como a microbiota acompanhante, devem permanecer viáveis, mas sem aumentar sua população.

O meio Cary Blair é o resultado da mudança na formulação do meio de transporte Stuart. A modificação foi feita em 1964 e consistiu na substituição do sistema regulador de pH (glicerofosfato) por um tampão inorgânico de fosfato.

Meio de Cary Blair: fundação, preparação e usos 1

A. Culturette com metade de Cary Blair B. Coletor de fezes com metade de Cary Blair. Fonte: A. Video Meganhow, obtenha uma cultura de feridas 2011 youtube.com B. Usuário: Mattes [Domínio público]

A reformulação foi necessária porque seus criadores perceberam que o glicerofosfato após um certo tempo poderia ser metabolizado por algumas bactérias saprófitas. Estes se multiplicam sobrepõem os patógenos presentes.

Outras mudanças foram a eliminação do azul de metileno, bem como o reajuste do pH à alcalinidade (pH 8,4). Todas essas mudanças melhoraram a eficiência dos meios de transporte.

Originalmente, o meio Cary Blair era usado para a manutenção de patógenos intestinais, como Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae e Campylobacter sp.

No entanto, a eficácia na preservação da viabilidade de microrganismos patogênicos exigentes e lábeis, como: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae e alguns anaeróbios , foi vista posteriormente .

Fundação

O meio Cary Blair contém cloreto de sódio, tioglicolato de sódio, fosfato dissódico, cloreto de cálcio e ágar.

O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico do meio, o fosfato dissódico e o cloreto de cálcio equilibram o pH. Por sua vez, o tioglicolato de sódio mantém um baixo potencial de redução de óxido, enquanto a pequena porção de ágar fornece consistência semi-sólida.

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O meio Cary Blair não contém nutrientes, pois a função de um meio de transporte é manter a amostra sem que ela seja modificada em termos de umidade e carga microbiana; isto é, evita a desidratação da amostra, preservando a viabilidade e a quantidade dos microrganismos presentes.

Finalmente, o pH levemente alcalino evita a morte de microrganismos devido à acidez, especialmente os vibrios são muito sensíveis aos ácidos.

Preparação

A mídia Cary Blair pode ser comprada comercialmente como um dispositivo especial pronto para uso. O sistema de transporte é coberto por uma bolsa plástica Peel Pack. No interior, contém uma zaragatoa para a coleta da amostra e o tubo do recipiente do meio semi-sólido de Cary Blair.

Também estão disponíveis no mercado casas comerciais que fornecem o meio desidratado para preparação em laboratório.

Para fazer isso, pesar 13,2 gramas do meio desidratado e dissolva em um litro de água destilada. Aqueça e agite a preparação até dissolver completamente. Distribua o meio em tubos de ensaio com tampa de rosca (baquelite).

Vaporize os tubos por 15 minutos. Deixe esfriar e mantenha em temperatura ambiente até o uso.

O meio Cary Blair sem inoculação pode ser armazenado em condições ideais por até 18 meses em temperatura ambiente.

O pH do meio deve ser ajustado para 8,4 ± 0,2. A cor do meio preparado é bege, com alguma opalescência.

Use

Tipo de amostras

O meio Cary Blair é usado quando há uma incapacidade de processar imediatamente amostras de fezes, zaragatoas retais e vaginais.

Quando não é possível ter um meio de transporte, as amostras podem ser armazenadas a -70 ° C.

Amostragem

O swab é impregnado com a amostra e é introduzido no meio Cary Blair, sem atingir o fundo.

ID da amostra

O meio de Cary Blair deve ter uma etiqueta na qual os dados básicos são colocados, como: nome e sobrenome do paciente, número de identificação da amostra, fonte da amostra, médico responsável pelo tratamento, data e hora da coleta. amostra, diagnóstico presuntivo, tratamento com antibióticos.

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Transferir

É bem coberto e transportado à temperatura ambiente no caso de amostras fecais .Visto que, para amostras vaginais em busca de microrganismos anaeróbicos, recomenda-se transportar as amostras a 4 ° C.

Em todos os casos, o tempo de transferência recomendado é de 4-6 horas, com um máximo de 24 horas.

Se houver suspeita de presença de Campylobacter jejuni nas amostras de fezes e estas não puderem ser processadas dentro de 24 horas, recomenda-se a preservação em meio Cary Blair a 4 ° C.

Pesquisa realizada sobre o meio de transporte Cary Blair

Vários estudos demonstraram que o meio Cary Blair pode ser conservado viável a microorganismos enteropatogênicos do gênero Shigella e Salmonella por até 49 dias após a coleta da amostra.

Por outro lado, o Vibrio cholerae, outro importante patógeno intestinal, é capaz de sobreviver por 22 dias, enquanto a Yersinia pestis (agente causador da peste bubônica e pneumônica) pode ser recuperada após 75 dias.

No entanto, apesar da durabilidade demonstrada na recuperação desses microrganismos, recomenda-se que as amostras colhidas sejam transportadas no meio de Cary Blair para o laboratório o mais rápido possível.

Da mesma forma, uma vez que a amostra chega ao laboratório, ela deve ser semeada sem demora nos respectivos meios de cultura.

Por outro lado, o meio Cary Blair, além de útil para o transporte de microrganismos facultativos, também é recomendado para amostras contendo patógenos anaeróbicos.

Nesse sentido, DeMarco e colaboradores em 2017 realizaram um estudo intitulado: Sobrevivência de microrganismos vaginais em três sistemas de transporte disponíveis comercialmente .

Eles demonstraram que o meio de transporte Cary Blair é o melhor meio de transporte para a conservação e recuperação de microrganismos anaeróbicos vaginais.Da mesma forma, eles mostraram que a maior taxa de recuperação foi alcançada quando a temperatura da transferência foi de 4 ° C.

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Portanto, conclui-se que a temperatura de transporte de zaragatoas vaginais (microrganismos anaeróbicos) deve ser realizada a 4 ° C. Enquanto para amostras fecais em busca de microrganismos facultativos, a temperatura ideal é ambiental.

Controle de qualidade

Para avaliar o controle de qualidade do meio de transporte Cary Blair, linhagens conhecidas como Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae e Campylobacter sp.

O meio é inoculado com a cepa escolhida e mantida à temperatura ambiente por 24 horas. Eles são então semeados nos meios de cultura correspondentes. Em todos os casos, é esperada uma recuperação satisfatória do microrganismo em questão.

Referências

  1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, et al. Sobrevivência de microrganismos vaginais em três sistemas de transporte comercialmente disponíveis.Anaeróbio . 2017; 45: 44–49.
  2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Comparação de meios de preservação para armazenamento de amostras de fezes.J Clin Microbiol . 1995; 33 (8): 2176-2178.
  3. Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Comparação de meios de preservação e condições de congelamento para armazenamento de amostras de fezes. J Med Microbiol . 1989; 28 (2): 151-4.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnóstico microbiológico 5a ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnóstico microbiológico de Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
  6. Laboratórios Conda Pronadisa. Meio Cary Blair. Disponível em: condalab.com
  7. Laboratório Metrix. Cary Blair Disponível em: metrixlab.mx

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