O ágar de bismuto sulfito é um meio de cultura seletivo utilizado para o isolamento e identificação de Salmonella spp. e outras bactérias coliformes. Foi desenvolvido por Leifson em 1935 e tem sido amplamente utilizado em laboratórios de microbiologia de alimentos e saúde pública. Sua composição contém bismuto, sulfeto de sódio, ágar e outros componentes que inibem o crescimento de bactérias não desejadas, permitindo o crescimento seletivo das bactérias alvo. A preparação do ágar de bismuto sulfito requer cuidado e precisão para garantir resultados confiáveis. Seus usos incluem a detecção de contaminação por Salmonella em alimentos, água e amostras clínicas, sendo uma ferramenta essencial no controle de qualidade e segurança alimentar.
Fórmula do sulfito de bismuto: Bi2(SO3)3
O ágar de bismuto sulfito é um meio seletivo utilizado para o isolamento e identificação de bactérias do gênero Salmonella. Sua formulação contém sulfato de bismuto, que inibe o crescimento de bactérias gram-negativas, e sulfito de sódio, que favorece o crescimento de Salmonella.
A fórmula química do sulfito de bismuto é Bi2(SO3)3, composta por dois átomos de bismuto e três grupos sulfito. O bismuto é um metal pesado que possui propriedades antimicrobianas, enquanto o sulfito atua como agente redutor, promovendo a formação de colônias características de Salmonella.
A preparação do ágar de bismuto sulfito envolve a dissolução dos ingredientes em água destilada, seguida da esterilização em autoclave. Após o resfriamento, o meio é solidificado em placas de Petri e está pronto para uso em laboratório.
O ágar de bismuto sulfito é amplamente utilizado em microbiologia para o isolamento de Salmonella em amostras clínicas, alimentares e ambientais. Sua seletividade e capacidade de diferenciar Salmonella de outras bactérias tornam-no uma ferramenta valiosa no diagnóstico de infecções causadas por esse patógeno.
Uso do Ágar Bismuto Sulfito para Identificação de Bactérias Patogênicas em Amostras Clínicas.
O Ágar Bismuto Sulfito é um meio de cultura seletivo utilizado para identificar bactérias patogênicas em amostras clínicas. Este meio foi desenvolvido por Holt-Harris e Teague em 1919, e é amplamente utilizado em laboratórios de microbiologia para isolar e diferenciar bactérias gram-negativas, em particular Salmonella spp. e Shigella spp.
A preparação do Ágar Bismuto Sulfito é relativamente simples, sendo composto por ágar, extrato de levedura, sulfato de sódio, citrato de sódio, sulfato ferroso, bismuto subnitrato, sulfito de sódio e pH ajustado para 7,6. O bismuto presente no meio inibe o crescimento de bactérias gram-positivas, enquanto o sulfito de sódio inibe bactérias gram-negativas não patogênicas.
Quando as amostras clínicas são inoculadas no Ágar Bismuto Sulfito, as bactérias patogênicas como Salmonella e Shigella produzem colônias pretas devido à formação de sulfeto de bismuto. Por outro lado, bactérias não patogênicas ou gram-positivas não crescem ou formam colônias de outras cores.
O uso do Ágar Bismuto Sulfito é fundamental no diagnóstico de infecções gastrointestinais causadas por bactérias patogênicas, permitindo uma identificação rápida e precisa dos agentes causadores da doença. Além disso, sua seletividade e facilidade de interpretação tornam este meio de cultura uma ferramenta indispensável para laboratórios de microbiologia clínica.
Ágar para identificação de Salmonella e Shigella em apenas uma placa de cultura.
O Ágar de bismuto sulfito é um meio de cultura seletivo utilizado para identificar Salmonella e Shigella em apenas uma placa. Foi desenvolvido por Castellani e Chalmers em 1919 e é amplamente utilizado até hoje.
Para preparar o Ágar de bismuto sulfito, é necessário dissolver os ingredientes em água destilada e aquecer até ferver. Depois, o meio é esterilizado em autoclave a 121°C por 15 minutos e posteriormente resfriado a 45-50°C antes de ser despejado em placas de Petri.
Este meio contém bismuto, que inibe o crescimento de bactérias gram-positivas, e sulfito, que é reduzido por Salmonella e Shigella, resultando em colônias de coloração preta. Além disso, o Ágar de bismuto sulfito é seletivo para essas bactérias, permitindo a identificação rápida e precisa em uma única placa de cultura.
Em laboratórios de microbiologia, o Ágar de bismuto sulfito é amplamente utilizado para o isolamento e identificação de Salmonella e Shigella em amostras clínicas e de alimentos. Sua eficácia e praticidade tornam-no uma ferramenta essencial no diagnóstico de infecções gastrointestinais causadas por essas bactérias.
Meio seletivo Agar XLD utilizado para isolamento de bactérias entéricas patogênicas.
O Ágar de bismuto sulfito é um meio seletivo utilizado para o isolamento de bactérias entéricas patogênicas. Ele foi desenvolvido para inibir o crescimento de bactérias não patogênicas e permitir o crescimento de cepas patogênicas. A preparação deste meio envolve a adição de bismuto e sulfito, que atuam como inibidores seletivos.
O Ágar XLD é um meio seletivo que contém xilose, lactose e desoxicolato de sódio, bem como sais biliares e citrato de sódio. Estes componentes ajudam a selecionar e diferenciar as bactérias entéricas, permitindo o crescimento de Salmonella e Shigella, por exemplo. As bactérias patogênicas produzem colônias características, que podem ser identificadas com base nas reações bioquímicas no meio.
Este meio é amplamente utilizado em laboratórios de microbiologia para isolar e identificar bactérias entéricas patogênicas, ajudando na investigação de surtos de doenças transmitidas por alimentos. O Ágar XLD é uma ferramenta importante para a saúde pública, permitindo a rápida identificação e controle de agentes patogênicos.
Ágar de bismuto sulfito: fundação, preparação e usos
O ágar sulfito de bismuto é um sólido meio de cultura selectivo e diferencial, especialmente formulado para o isolamento de Salmonella entérica subespécie entérica Typhi serotipo, entre outras espécies de Salmonella. O meio é conhecido como ágar BSA pelo acrônimo Bismuth Sulfite Agar.
A fórmula original do agar de bismuto sulfito foi criada em 1927 por Wilson e Blair (Glucose Bismuth Sulphite Iron Medium); Continha sulfito de sódio, glicose, solução de bismuto, citrato de amônio, sulfato ferroso e ágar-ágar.
Hoje existe uma modificação do meio original, consistindo em extrato de carne, peptonas de carne e caseína, indicador de sulfito de bismuto, glicose, fosfato dissódico, sulfato ferroso, ágar verde-claro e ágar.
Existem muitos meios para o isolamento de espécies de Salmonella, mas quando se trata de recuperar o sorotipo Typhi, o ágar bismuto sulfito tem uma vantagem notável sobre eles, uma vez que, na maioria, é obtida uma recuperação muito baixa ou inexistente desse microrganismo. .
No entanto, é necessário usar mais de um tipo de meio quando se trata de isolar enteropatógenos, porque o ágar de bismuto sulfito é menos eficaz para outras espécies de Salmonella e para o gênero Shigella, que são inibidos ou se desenvolvem muito mal. neste ágar.
Deve-se notar que, de todas as espécies de Salmonella, o sorotipo Typhi é um dos enteropatógenos mais importantes nos seres humanos, sendo este o seu único reservatório. Este serovar causa febre tifóide, gastroenterite, bacteremia e septicemia.
Por esse motivo, é relevante incluir esse ágar na análise de amostras de água, fezes ou alimentos em que se suspeite de sua presença.
Fundação
Como a maioria dos meios de cultura, o ágar bismuto sulfito contém substâncias nutritivas para promover o desenvolvimento bacteriano, como peptonas e extrato de carne. Da mesma forma, a glicose funciona como fonte de energia e carbono.
Agora, nem todas as bactérias crescerão neste meio, uma vez que o ágar bismuto sulfito é um meio seletivo. Contém compostos que inibem o crescimento de microorganismos Gram-positivos e certas bactérias Gram-negativas. Esses compostos são: o indicador de sulfito de bismuto e o verde brilhante.
Por sua vez, o fosfato dissódico mantém a osmolaridade e o pH do meio.
Além disso, ágar sulfito de bismuto é uma forma diferencial devido à presença de sulfato ferroso, que mostra a formação de H 2 S. O H 2 S formados por bactérias reage com sulfato ferroso e forma um precipitado preto insolúvel claramente visível.
Finalmente, o ágar-ágar fornece a consistência sólida ao meio.
Preparação
Pesar 52,3 gramas do meio desidratado e dissolver em um litro de água. Aqueça até ferver a mistura por 1 minuto, com agitação frequente, até sua dissolução total. Não superaqueça. Este meio não é autoclavado, porque o calor extremo danifica o meio de cultura.
Deixe esfriar até 45 ° C e mexa antes de servir em placas de Petri estéreis. Recomenda-se fazer chapas com boa espessura. Para isso, devem ser derramados 25 ml em cada prato. Deixe solidificar. Como é um meio que não é esterilizado, é normal que o uso imediato seja sugerido.
No entanto, um estudo realizado por D’aoust em 1977, mostrou que há uma melhor recuperação de Salmonella typhimurium e Salmonella enteritidis como as idades médias do sulfito de bismuto, não afetando o desempenho dos sorovares Typhi e Paratyphi B.
D’aoust recomenda o uso das placas no dia 4 de refrigeração, embora ele avise que, à medida que a idade média diminui, a seletividade diminui, desenvolvendo cepas de Proteus vulgaris com mais facilidade .
É por isso que, para amostras fortemente contaminadas, como fezes, é preferível usar o meio preparado na hora. Caso contrário, use no dia 4 de sua preparação. Outros autores recomendam o uso das placas no dia seguinte à sua preparação, armazenadas em refrigeração.
As placas refrigeradas devem ser temperadas antes do uso. O pH do meio deve ser 7,5 ± 0,2. A cor do meio não preparado é bege e preparada é cinza esverdeado opalescente.
Usos
Entre as amostras que podem ser semeadas neste meio estão amostras de fezes, bebidas ou águas residuais e alimentos.
Para melhorar os isolados, recomenda-se realizar um tratamento de pré-enriquecimento com caldo de lactose e, em seguida, enriquecer com caldo de tetrationato ou caldo de selenito e cistina, antes de semear no ágar de bismuto sulfito.
As placas são incubadas a 35 ° C ± 0,2 por 24 a 48 horas, em aerobiose.
Características das colônias em ágar bismuto sulfito
As colônias de Salmonella Typhi geralmente são vistas neste ágar em 24 horas, com um centro preto e cercadas por uma auréola verde brilhante. Enquanto, em 48 horas, eles ficam completamente pretos devido à formação de sulfeto de hidrogênio.
A Salmonella Paratyphi A possui colônias com características variáveis. Após 18 horas de incubação, podem ser observadas colônias pretas, verdes ou transparentes com aparência mucóide.Enquanto isso, às 48 horas eles são completamente pretos e às vezes com um brilho metálico pronunciado.
S. Paratyphi A tende a escurecer o ambiente ao redor da colônia.
Salmonella sp mostra colônias pretas ou cinza esverdeadas, com ou sem brilho metálico, escurecendo o ambiente circundante ou não.
As cepas de coliformes geralmente são totalmente inibidas, mas, se crescem, desenvolvem-se como colônias opacas verde ou marrom, sem brilho metálico. Não tinja o meio ao redor da colônia.
Limitação
– Inóculos muito fracos podem originar colônias verde-claras de Salmonella Typhi , passando despercebidas e relatando a cultura como negativa.
– O ágar bismuto sulfito pode inibir a recuperação de algumas espécies de Salmonella, como S. sendai, S. berta, S. gallinarum, S. abortus-equi.
-Este meio inibe a maioria das espécies do gênero Shigella.
– S. Typhi e S. arizonae podem dar colônias muito semelhantes.
-As coliformes produzir H 2 S, tais como Proteus e Citrobacter produzir semelhante a colónias de Salmonella, por isso é necessário testes bioquímicos identificação.
-Você deve executar uma boa estriação para obter colônias isoladas; É a única maneira de observar as características típicas das colônias do gênero Salmonella.
Controle de qualidade
Para controle de esterilidade, uma placa não inoculada é incubada a 37 ° C, espera-se que não haja crescimento, nem mudança de cor.
Para controle de qualidade, cepas conhecidas como:
Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella Typhi ATCC 19430, Shigella flexneri ATCC 12022, Enterococcus faecalis ATCC 29212.
Espera- se que Escherichia coli e Shigella flexneri sejam parcialmente inibidas pelo desenvolvimento de colônias marrom-esverdeada e marrom, respectivamente.Enquanto isso, ambas as salmonelas devem ter um excelente desenvolvimento com colônias negras com brilho metálico e, finalmente, Enterococcus faecalis deve ser totalmente inibido.
Referências
- Wilson, W. & EM McV. Blair Uso de um Meio de Ferro Glicose Bismuto Sulfito para o Isolamento de B. typhosus e B. proteus .O Jornal de Higiene, 1927; 26 (4), 374-391. Obtido em .jstor.org
- D’aoust JY. Efeito das condições de armazenamento do desempenho do ágar bismuto sulfito.J Clin Microbiol . 1977; 5 (2): 122-124. Disponível em: ncbi.nlm.nih.gov
- Laboratórios de DIV. Agar de bismuto-sulfito de acordo com WILSON-BLAIR. 2009. Disponível em: BismuthSulfitagar_span_Jan_2009% 20 (2) .pdf
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