O que é coloração simples? Destaques Recursos

A única coloração é um rápido e simples coloração procedimento em que um corante é usado sozinho, assim que é chamado simples. É usado principalmente para determinar a morfologia e organização das células presentes em uma amostra.

Naturalmente, as células não têm cor, por isso é necessário torná-las visíveis de alguma maneira quando vistas ao microscópio.

O que é coloração simples? Destaques Recursos 1

Células da face humanas coradas por coloração simples com azul de metileno.

É importante notar que os corantes utilizados na coloração simples devem ser básicos com carga positiva (catiônica), para que possam se ligar espontaneamente ao citoplasma da parede e da célula.

Essas estruturas celulares são carregadas negativamente. É por isso que o corante carregado positivamente é atraído para as células e se liga a elas espontaneamente. Assim, todas as células presentes em uma amostra são rapidamente coloridas.

Corantes utilizados na coloração simples

Existem vários corantes básicos que podem ser usados ​​no laboratório de microbiologia. Os mais utilizados são:

– Azul de metileno.

Violeta de cristal.

– Malaquita verde.

– Fuchsina básico.

Todos esses corantes funcionam bem em bactérias porque possuem íons coloridos (cromóforos) com carga positiva (catiônica).

Os tempos de coloração para a maioria desses corantes são relativamente curtos. Eles geralmente variam de 30 segundos a 2 minutos, dependendo da afinidade do corante.

É importante observar que, antes da coloração de uma amostra por coloração simples, ela deve ser estendida e fixada à folha de vidro (lâmina); A amostra estendida e fixa é chamada de esfregaço.

As 6 etapas para realizar uma coloração simples

Passo 1

Coloque a lâmina em uma prateleira de coloração e aplique o corante desejado. Deixe no horário correspondente.

Normalmente, a coloração simples leva alguns segundos ou alguns minutos, dependendo do corante usado.

Observação

Nesta etapa, é importante não exceder o tempo recomendado para o corante usado, pois os cristais podem se formar na folha, produzindo o que é conhecido como “artefato” que distorce a morfologia das células.

Etapa 2

Lave cuidadosamente o esfregaço da lâmina com água destilada de uma garrafa ou também com água da torneira que flui lentamente, até que o escoamento se torne transparente. Normalmente, isso leva de 5 a 10 segundos.

Observação

Não aplique a corrente de água diretamente no esfregaço, para evitar danos à amostra.

Se a água destilada não estiver disponível, a água da torneira poderá ser usada sem problemas, pois não afetará o resultado da mancha.

Etapa 3

Seque a lâmina com papel absorvente em uma direção e sem esfregar. Verifique se a parte inferior do slide está limpa.

Etapa 4

Observe o esfregaço manchado no microscópio. Comece com os objetivos mais distantes para localizar adequadamente a área que deseja observar com mais detalhes. Mude o alvo para se aproximar cada vez mais da amostra.

Observação

Para o uso da lente com maior ampliação (geralmente 100X), deve-se usar óleo de imersão, pois isso ajuda a luz a penetrar melhor e torna a imagem mais nítida. Não é necessário usar uma lamela.

Etapa 5

Por fim, descarte todas as amostras em um recipiente apropriado que esteja devidamente rotulado como “risco biológico”.

Referências

  1. (2001) Aplicações microbiológicos: Manual de laboratório em Microbiologia Geral (8 th ed.). As empresas McGraw-Hill.
  2. Harisha, S. (2006). Introdução à Biotecnologia Prática ( ). Mídia de firewall
  3. Moyes, RB, Reynolds, J., & Breakwell, DP (2009). Coloração preliminar de bactérias: manchas simples. Current Protocols in Microbiology , (SUPPL. 15), 1–5.
  4. Pommerville, J. (2013). Fundamentos da Alcamo de Laboratório de Microbiologia (10 th ). Jones & Bartlett Learning.
  5. Prescott, H. (2002). Exercícios de Laboratório em Microbiologia ( ). As empresas McGraw-Hill.
  6. Sumbali, G. e Mehrotra, R. (2009). Princípios de Microbiologia ( ). Tata McGraw-Hill Educação.

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